论文摘要
研究背景:鼻咽癌(Nasopharyngeal cancer, NPC)是原发于鼻咽粘膜上皮的恶性肿瘤,是我国发病率最高的十大恶性肿瘤之一,也是最常见的头颈部肿瘤。目前流行病学的研究表明鼻咽癌具有明显的地区聚集性和家族易感性的特点。其特点具体如下:①虽然在世界各国鼻咽癌均有发生,但其发病率高低差别却很大,主要见于我国南部和东南亚的一些国家,而在欧美等国家则很少见。据世界卫生组织统计,世界上约80%的鼻咽癌发生在中国,中国的两广地区、湖南、福建、海南五省(区)属于高发区,其中广东省发病率最高,居世界首位,故又著称“广东癌”,这是唯一以地区命名的肿瘤。②鼻咽癌病人一级亲属中患鼻咽癌的风险比正常人一级亲属高十几倍。大约10%鼻咽癌病人有患本病的家族史,这种家族癌史并不是偶然现象,可见鼻咽癌的发生有一定的遗传性。众所周知,鼻咽癌的发病与EB病毒的感染有着密切的关系,但是EB病毒感染的普遍性不能清楚解释鼻咽癌地区聚集性和家族易感性的特点,由此可见,鼻咽癌的发生是多基因参与的多步骤的复杂过程。虽然关于鼻咽癌的病因以及发病机制目前尚不清楚,但是大部分学者已经公认鼻咽癌是EB病毒感染、环境因素、遗传易感性共同作用的结果。原发性肝癌(Primary hepatic carcinoma,PHC)(以下简称为肝癌)是指肝细胞或肝内胆管细胞内发生的癌。肝癌是世界上最常见同时也是危害性最大的恶性肿瘤之一。肝癌被人称为“癌中之王”,因为它的死亡率约等于它的发病率。据世界卫生组织报道,每年全世界新发的肝癌病例约有100万例,位于恶性肿瘤死亡率的第七位(男性)和第八位(女性)。我国是肝癌高发的地区之一,其发生率约为30.3/10万,每年约有14万人死于肝癌,占全世界肝癌死亡人数的45%左右,其中以广西自治区的扶绥县和江苏省的启东县的发病率最高。值得注意的是,肝癌的发病率每年都有所上升,而有关肝癌的治疗效果目前尚不理想,由此可见,肝癌是一种严重威胁着人类健康及生命的疾病。迄今为止,关于肝癌的病因和发病机制一直是医学工作者及流行病学研究者关注的热点。虽然目前关于肝癌的病因及发病机制尚不清楚,但是国内外研究人员均证实肝癌的发生与乙肝病毒的感染有关。流行病学的研究表明,肝癌的发生有明显的家族聚集性,这说明遗传因素在肝癌的发病中起到了不可忽视的作用,这一说法得到了国内外医学研究者的认可。肝癌的发生同时与环境因素有着密不可分的关系,肝癌的发生是多基因、多因素、多步骤共同作用的结果,同鼻咽癌有着类似的危险因素,病毒感染、遗传易感性、环境因素是导致肝癌发生的三大主要因素。研究鼻咽癌、肝癌的发病因素及发病机制对降低鼻咽癌、肝癌的发病率及死亡率有着重大的理论和现实意义。鼻咽癌、肝癌核心家系是指以血缘父母健在的明确诊断的鼻咽癌或肝癌患者(先证者)为核心,并包括先证者的一级亲属主要是血缘父母。由每一个先证者可确定一个鼻咽癌或肝癌的核心家系。广西壮族自治区既是鼻咽癌的第二大高发区同时也是肝癌的高发区之一,在广西壮族自治区建立鼻咽癌、肝癌的核心家系标本库是可行的,鼻咽癌、肝癌核心家系标本库的建立是研究鼻咽癌、肝癌遗传易感基因及发病机制的重要物质基础和保障。目的:利用鼻咽癌、肝癌在广西壮族自治区高发的优势,摸索一套合理的操作方法,有计划的建立规范的鼻咽癌、肝癌的核心家系标本库,为进一步系统研究鼻咽癌、肝癌遗传易感基因及发病机制提供宝贵的标本及标本信息的平台。方法:⑴鼻咽癌、肝癌核心家系标本库建立的前提是经本单位有关部门的批准以及认可,在血标本采集前均需获得患者及其家属的知情同意。⑵核心标本库中标本来源:①来医院就诊的已经明确诊断的并且血缘父母健在的鼻咽癌或肝癌患者(先证者)。主要采集来广西医科大学第一附属医院、广西壮族自治区人民医院及广西医科大学附属肿瘤医院就诊诊断的先证者及其血缘父母的外周静脉血7-8ml,其中抗凝血5ml,非抗凝血2ml.②在广西壮族自治区鼻咽癌的高发区苍梧县和肝癌的高发区扶绥县,通过当地的卫生行政部门及当地医院和村医的帮助下找到符合核心家系条件的已经在上级医院诊断或治疗过的先证者,收集先证者及其血缘父母的外周静脉血7-8ml。⑶由经过专业培训的实验室调查员,按照统一制定的鼻咽癌或肝癌的核心家系登记表的内容,详细询问以先证者为核心的家系资料:①人口学特征的资料:主要是先证者及其父母的姓名、年龄、性别、民族、职业、籍贯、联系方式等;②先证者的相关疾病信息:先证者的初诊日期、实验室检查结果包括鼻咽癌患者的EB病毒相关抗原抗体检测结果、肝癌患者的血清乙肝两对半以及甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)检测结果、影像学检查结果(MRI、B超、腹部CT、胸片等)、病理诊断、鼻咽癌的TNM分期(参照92福州分期的标准)及临床分期、肝癌的临床分期;③先证者及其父母的生活习惯主要是烟酒史及其家族史,是否有相同疾病的家族史或其他癌症病史的家族史。将上述信息详细记录下来,并按照收集先证者先后顺序将核心家系标本库中的标本行入库编号。⑷将采集先证者及其父母的外周静脉血,严格按照血标本的保存要求尽快送到本实验,将先证者及父母的抗凝血离心、分离血清和血细胞分别放到两个冻存管中按照标本的入库编号进行标记,-80℃的冰柜冻存;对先证者及其父母的非抗凝血进行EB病毒IgA/VCA检测或血清乙肝两对半及甲胎蛋白(AFP)检测,并将实验结果记录下来。⑸有专人详细记录标本入库信息、存入位置信息和使用信息资料,并定期监测低温下鼻咽癌、肝癌核心家系血标本的保存情况。⑹对鼻咽癌、肝癌核心家系标本库的资料实行信息化管理,主要是录入核心家系标本的人口学资料及其病理、临床分期资料,统计分析核心家系中先证者的一般发病特点,及将其父母的实验室检查结果与正常人群进行比较。结果:⑴在鼻咽癌核心家系中,256例鼻咽癌先证者情况:男性191例、女性65例;汉族187例、其他(主要是壮族和瑶族)69例;职业分布情况:农民132例、工人32例、干部21例、其他71例;年龄分布:最小的是6岁,最大的是53岁,平均26.60岁;家族史分布情况:有36个鼻咽癌核心家系有癌家族史,其中26个鼻咽癌核心家系有鼻咽癌家族史,共35人患有鼻咽癌,最多一个家族是包括先证者在内5个人都患有鼻咽癌;病理类型:低分化鳞癌246例、未分化癌8例、其他类型癌2例;临床分期:Ⅰ期12例、Ⅱ期62例、Ⅲ75例、Ⅳ107例。先证者的父母EB病毒抗原抗体检查结果:父亲阳性人数47人,阳性率18.4﹪,母亲阳性人数35人,阳性率13.7﹪。⑵在肝癌核心家系中, 221例先证者情况:男性197例、女性24例;汉族129例、其他(主要是壮族和瑶族)92例;职业分布情况:农民164例、工人15例、干部16例、其他26例;年龄分布:最小的13岁,最大的56岁,平均35.44岁;家族史分布情况:有25个肝癌核心家系有癌家族史,其中23个肝癌核心家系有肝癌家族史,共33人患有肝癌,最多一个家族是包括先证者在内6个人都患有肝癌。先证者的父母乙肝两对半检查结果:先证者父亲HBsAg阳性人数是32例,阳性率是14.5﹪;HBsAb阳性人数是128例,阳性率是57.9﹪; HBeAg阳性人数是5例,阳性率是2.3﹪; HBeAb阳性人数是35例,阳性率是15.8﹪; HBcAb阳性人数是65例,阳性率是28.1﹪; HBsAg+HBcAb阳性人数是30例,阳性率是13.6﹪。先证者母亲HBsAg阳性人数是63例,阳性率是28.5﹪;HBsAb阳性人数是95例,阳性率是43.0﹪; HBeAg阳性人数是5例,阳性率是2.3﹪; HBeAb阳性人数是73例,阳性率是33.0﹪; HBcAb阳性人数是112例,阳性率是50.7﹪; HBsAg+HBcAb阳性人数是61例,阳性率是27.6﹪。结论:以前的医学工作者把对肿瘤的研究大部分时间和精力都放在动物和细胞株上,随着对肿瘤研究的逐渐深入,人们的观点也发生了改变。医学工作者对肿瘤的研究从动物和细胞株的研究逐渐转向人体肿瘤标本的研究。因为肿瘤研究的最终服务对象是人体,人们逐渐认识到肿瘤标本是恶性肿瘤研究的重要资料,建立规范的、标准的肿瘤标本库是时代发展的要求。肿瘤标本库的建立在能够更有效的利用肿瘤标本资源,使其更有好地服务到肿瘤研究中,起到了不可忽视的作用。我实验室充分利用广西壮族自治区鼻咽癌、肝癌高发的优势利用四年时间建立了256例鼻咽癌核心家系、221例肝癌核心家系,并在这四年过程中逐渐摸索了一套建立标准化、规范化的标本采集、保存和管理的体系。我们应该在这基础上,充分利用我国肿瘤种类多样,地域广泛的特点,抓住发展的机遇,将肿瘤标本库做的更大,充分利用肿瘤标本库的巨大资源优势,协助深入开展肿瘤基础研究,造福千千万万的肿瘤患者。
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