屋尘螨过敏原转染树突状细胞诱导哮喘小鼠免疫耐受的研究

屋尘螨过敏原转染树突状细胞诱导哮喘小鼠免疫耐受的研究

论文题目: 屋尘螨过敏原转染树突状细胞诱导哮喘小鼠免疫耐受的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 内科学

作者: 吴奎

导师: 王长征

关键词: 疫苗,变应原,免疫治疗,尘螨,树突状细胞,免疫耐受,调节性细胞

文献来源: 第三军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:“Th1/Th2偏移”假说是哮喘发病的主要免疫学机制,但近年的研究发现该学说不能完全解释哮喘的免疫学机制异常,提出了哮喘是一种对过敏原免疫耐受缺陷的疾患,其中树突状细胞(DCs)可能是关键的调节因素之一。本实验拟构建尘螨主要变应原基因转染的DCs,研究基因屋尘螨转染DCs诱导哮喘小鼠对致敏抗原的免疫耐受作用和机制。研究内容:1、分离小鼠骨髓后体外培养扩增DCs。2、将屋尘螨主要过敏原Der p1、Der p2真核表达质粒转染DCs,构建过敏原转染DCs,观察过敏原基因转染对DCs表面分子和炎性介质分泌的影响;3、建立屋尘螨提取液致敏/激发小鼠的肺部变应性炎性模型。4、观察屋尘螨过敏原转染DCs对小鼠脾脏淋巴细胞中调节性T细胞及肺泡灌洗液中细胞因子、肺组织病理变化的影响。5、观察清除调节性T细胞对屋尘螨转染DCs作用的影响方法:1、分离小鼠骨髓细胞,在含GM-CSF的完全培养基进行培养。以流式细胞仪鉴定培养细胞表面分子CD8α、CD11c、MHC II分子。2、将携带有屋尘螨主要过敏原Der p1、Der p2的pDs-Der p1、pCIneo-Der p2质粒转化入大肠杆菌DH5α后大量扩增抽提质粒。以Lipofectamine 2000分别将此二质粒转染DCs后,以流式细胞仪检测其细胞表面分子CD40、CD80、CD86、MHC II的变化。采用ELISA方法检测转染后DCs分泌IL-4、IL-10、IL-12、IFN-γ和TGF-β1的变化,采用RT-PCR方法检测Der p1、Der p2在DCs内的表达。3、用尘螨提取液经腹腔和皮下注射途径致敏C57BL/6小鼠,14天后滴鼻激发,建立尘螨致敏小鼠肺部变应性炎症模型。4、分离哮喘小鼠和正常小鼠脾脏CD4+T细胞分别加入屋尘螨转染DCs和非转染DCs进行共培养后,检测上清液中IL-4、IL-10、IFN-γ含量的变化,观察屋尘螨转染

论文目录:

英文缩写一览表

英文摘要

中文摘要

论文正文 屋尘螨过敏原重组树突状细胞诱导哮喘小鼠免疫耐受的研究

前言

第一部分 屋尘螨重组 D C s 的构建以及基因转染对 D C s 表面分子和细胞因子分泌的影响

第一节

材料与方法

结果

讨论

第二节

材料与方法

结果

讨论

第二部分 屋尘螨主要过敏原重组 D C 对哮喘小鼠肺部变应性炎症及 C D 4 + C D 2 5 + 调节性 T 细胞的影响

第一节

材料和方法

结果

讨论

第二节

材料和方法

结果

讨论

第三节

材料和方法

结果

讨论

第四节

材料与方法

结果

讨论

全文结论

参考文献

致谢

照片

文献综述一 调节性 T 细胞与过敏原特异性免疫治疗

参考文献

文献综述二 屋尘螨主要过敏原 Der p1 研究进展

参考文献

发布时间: 2006-10-19

相关论文

  • [1].屋尘螨抗原Der p2重组耻垢分枝杆菌口服疫苗的制备及其实验研究[D]. 简文.第四军医大学2008
  • [2].特异性免疫治疗对过敏性哮喘作用机制的研究[D]. 程晓明.第三军医大学2003
  • [3].户尘螨过敏原实验研究[D]. 孙劲旅.中国协和医科大学2002
  • [4].从T细胞受体δ链多态性及T细胞凋亡的改变探讨支气管哮喘的慢性气道炎症机制[D]. 白彦.中国协和医科大学2000
  • [5].调节性T细胞和树突状细胞Notch信号对哮喘Th1/Th2失衡的影响[D]. 孙鲲.第三军医大学2005
  • [6].FasL和屋尘螨基因共转染树突状细胞诱导屋尘螨致敏/激发小鼠免疫耐受的实验研究[D]. 王彦.第三军医大学2006
  • [7].Ad-mIL-10及IL-10基因修饰的树突状细胞对小鼠哮喘模型气道炎症的抑制作用的研究[D]. 许飞.中国协和医科大学2005
  • [8].变应性鼻炎患者转录因子T-bet的表达特征及其对尘螨变应原体内外刺激的反应[D]. 瞿申红.中山大学2006
  • [9].大剂量过敏原诱导致敏小鼠T细胞不反应性及机制研究[D]. 宋云熙.第三军医大学2007
  • [10].树突状细胞靶向性DNA疫苗治疗哮喘的实验研究[D]. 王耀丽.第三军医大学2007

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

屋尘螨过敏原转染树突状细胞诱导哮喘小鼠免疫耐受的研究
下载Doc文档

猜你喜欢