甘蓝型油菜fad2基因差异表达与脂肪酸合成的相关性分析

论文摘要

提高油酸含量是油菜品质育种的一个重要目标,有利于生物柴油的生产和新能源的开发。在现有的低芥酸油菜中,油酸的含量与油酸是否进一步减饱和转化为亚油酸有关。而油酸减饱和酶基因fad2是控制减饱和反应的关键。本研究运用RT—PCR技术研究湘油15号品种中不同处理材料的fad2基因表达差异,以及这些材料的脂肪酸积累模式:并对湘油15号进行不同温度的处理,研究温度对fad2基因表达和油酸、亚油酸的影响。主要研究结果如下:1、普通的湘油15号材料的fad2基因表达量在油菜种子发育的各个时期都显著高于高油酸突变的湘油15号材料,而油酸含量则显著低于高油酸突变材料。证明fad2基因的表达与油酸积累呈显著负相关,与亚油酸积累显著正相关。2、在甘蓝型油菜中,油酸积累的过程是“升——平——降”模式,油酸的主要积累时期为授粉后第14～35天。亚油酸积累模式为“升——降——升”,亚油酸含量的最低值出现在授粉后第20多天。3、fad2基因表达量和油酸、亚油酸的积累都具有明显的时期变化性。温度对fad2基因表达的变化不显著,对油酸、亚油酸积累的影响也不显著;但是授粉后在不同的时期内,温度对它们的影响却是显著的。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1 研究目的
• 2 研究意义
• 3 国内外研究现状
• 3.1 与油酸合成相关的基因的研究进展
• 3.1.1 油酸合成的过程
• 3.1.2 油酸相关基因的研究进展
• 3.2 基因表达的研究
• 3.2.1 Northern杂交
• 3.2.2 mRNA差异显示技术（mRNA differential display,mRNA DD）
• 3.2.3 cDNA—AFLP技术
• 3.2.4 反转录—聚合酶链反应（RT—PCR技术）
• 3.2.4.1 半定量RT—PCR技术
• 3.2.4.2 实时定量RT—PCR技术
• 3.2.4.3 RT—PCR技术的运用
• 4 实验技术路线
• 2基因在不同时期的表达差异分析'>第二章 不同甘蓝型油菜品种fad₂基因在不同时期的表达差异分析
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要仪器
• 1.4 试验方法
• 1.4.1 RNA的提取、检测与保存
• 1.4.2 逆转录反应
• 2及actin引物的PCR扩增'>1.4.3 fad₂及actin引物的PCR扩增
• 1.4.4 电泳及结果检测
• 2 结果与分析
• 2基因半定量RT—PCR扩增电泳图'>2.1 fad₂基因半定量RT—PCR扩增电泳图
• 2基因半定量RT—PCR扩增结果分析'>2.2 fad₂基因半定量RT—PCR扩增结果分析
• 3 讨论
• 2基因在不同时期的表达差异'>3.1 fad₂基因在不同时期的表达差异
• 2基因表达差异'>3.2 不同材料间fad₂基因表达差异
• 第三章 不同甘蓝型油菜品种的脂肪酸积累模式研究
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 试剂
• 1.3 仪器
• 1.4 取样方法及甲酯化处理
• 1.5 气相色谱仪分析
• 1.6 数据处理与分析方法
• 2 试验结果与分析
• 2.1 脂肪酸与出峰时间对应关系的摸索结果
• 2.2 种子发育过程中脂肪酸含量的测定结果
• 3 讨论
• 3.1 各种脂肪酸的积累模式
• 3.2 高低油酸材料中脂肪酸积累模式的变化
• 3.3 油酸与亚油酸相关性分析
• 2基因表达量与油酸、亚油酸积累的相关性'>3.4 fad₂基因表达量与油酸、亚油酸积累的相关性
• 2基因的差异表达'>第四章 甘蓝型油菜在不同温度条件下fad₂基因的差异表达
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 试验材料的处理
• 1.3 试验方法
• 2 结果与分析
• 2基因半定量RT—PCR扩增结果'>2.1 不同昼温条件下fad₂基因半定量RT—PCR扩增结果
• 2基因半定量RT—PCR扩增结果'>2.2 不同夜温条件下fad₂基因半定量RT—PCR扩增结果
• 3 讨论
• 2基因在不同时期的表达差异'>3.1 六个处理中fad₂基因在不同时期的表达差异
• 2基因表达的差异'>3.2 不同昼温对fad₂基因表达的差异
• 2基因表达的差异'>3.3 不同昼温对fad₂基因表达的差异
• 第五章 甘蓝型油菜在不同温度条件下油酸、亚油酸积累差异研究
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 试验材料的处理
• 1.3 试验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 不同处理油菜的生长发育图
• 2.2 不同处理油菜种子发育过程中油酸、亚油酸含量的测定结果
• 2.3 油酸、亚油酸含量测定的结果分析
• 3 讨论
• 3.1 不同昼温对油酸、亚油酸积累的差异
• 3.2 不同夜温对油酸、亚油酸积累的差异
• 3.3 不同温度对油酸、亚油酸积累的影响
• 2基因表达和油酸、亚油酸积累的综合影响'>3.4 温度变化对fad₂基因表达和油酸、亚油酸积累的综合影响
• 第六章 本实验的结论与创新点
• 1 本文的主要研究结果
• 2 本文研究的创新点之处
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介