犬皮肤真菌病治疗药物的筛选与临床疗效试验

论文摘要

犬皮肤真菌病是宠物门诊的常见病、多发病,为人畜共患,严重影响了动物及人类的健康。临床上多选用抗真菌药物治疗,但现有疗法所用药物价格昂贵,具有明显的副作用。近来随着耐药菌株的不断出现,并根据该病的临床复发率增高等问题,促使广大科研工作者不断寻找新型广谱、高效、廉价的抗真菌药物。中药是我国的传统优势资源,其作用和相对安全性已得到广泛的认可,中药抗真菌药物研究也已取得许多进展。本研究选取31味中草药,针对分离自临床皮肤真菌病患犬的特定菌株,进行单味中药和复方中药的研究。旨在研制一种具有抑真菌活性的中西药结合处方。本研究包括如下内容:1.病原真菌的分离培养与鉴定旨在分离几种常见的犬皮肤真菌病致病真菌。针对临床皮肤病患犬,经实验室检查确诊为皮肤真菌病。采毛样接种于沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂平面培养基上,培养7～14 d,观察菌落生长特征并结合显微镜检查进行真菌鉴定。获得4种病原真菌,分别是犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、絮状表皮癣菌和马拉色菌。2.中西结合抗皮肤真菌病药物的研制选择31种具有抑真菌活性的中药,采用试管内药基法比较这些药物的抑真菌作用,筛选出12味效果较好的药物;再用试管内药基法测定这12味中药的最小抑菌浓度(MIC)。选用3种抗真菌西药,测定其MIC值。根据上述抑菌效果,设计2个中药组方,以筛选出较好的复方组合。采用3因素3水平正交设计实验,同时引入临床已有成方作为对照组,最终筛选出体外抑真菌效果优良的中西药复合处方,命名为“复方抗癣剂”:以黄芩、玄参、川芎、土槿皮、厚朴等5味中药为主,浓度为50 mg/mL,再辅以冰醋酸,调整浓度为1.25 mg/mL。3.自制复方抗癣剂的刺激性和安全性实验用自制复方抗癣剂涂布脱毛后的大白兔皮肤,观察多次给药(3次/d,5 mL/次,连用7 d)后对完整皮肤及受损皮肤的刺激性反应;选取昆明小鼠,灌胃给药(折合日用药量为:中药36000 mg/kg、冰醋酸3600 mg/kg),测定其最大耐受量(MTD),连续用药7 d。结果表明,该复方抗癣剂无皮肤刺激性,无毒性,属实际无毒类药物。4.复方抗癣剂的药效学研究将4只健康犬随机分为治疗组(3只)和对照组(1只),分别从每只犬的头、嘴、耳、背、腹、前肢、后肢和尾部8个部位取样,进行真菌分离培养和鉴定。治疗组用自制复方抗癣剂全身药浴,2次/周,30 min/次;结合使用复方抗癣剂制成的喯剂喷涂于取样部位,5 mL/次,2次/d,连用14 d;对照组仅采取常规洗浴。用药后再次从取样部位拔毛分离培养,结果表明3只受试犬,用药前共24个被毛样本,分离出真菌22株,占样本总量91.7%;对照犬共8个被毛样本,分离出真菌8株,检出率为100%;3只受试犬用药后,24个被毛样本共分离出真菌2株,占样本总量8.3%,抑菌率为90.9%。对照组抑菌率为25%。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分:文献综述
• 第一章:真菌与犬皮肤真菌病
• 1.真菌概述
• 1.1 真菌简介
• 1.2 真菌的生长繁殖
• 1.3 真菌的致病性
• 1.4 常见的致病真菌
• 2.犬皮肤真菌病概述
• 2.1 皮肤真菌病的发病机制
• 2.2 临床表现
• 2.3 诊断方法
• 3 治疗
• 3.1 皮肤癣菌病全身疗法
• 3.2 马拉色菌感染全身疗法
• 3.3 局部疗法
• 3.4 中西药结合治疗
• 4 预防
• 参考文献
• 第二章:犬皮肤真菌病药物研究现状与前景
• 1.中兽医学对犬皮肤真菌病的病因及治疗研究概况
• 1.1 中兽医学对犬皮肤真菌病的解释
• 1.2 中药材抗皮肤真菌研究现状
• 1.3 中药材的应用前景及存在问题
• 2 现代医学对犬皮肤真菌病的病因及治疗研究概况
• 2.1 现代医学对皮肤真菌病的解释
• 2.2 西药材治疗犬皮肤真菌病研究现状
• 2.3 西药材的应用前景及存在问题
• 3 中西药结合的应用前景
• 参考文献
• 第二部分:实验研究
• 第三章:病原真菌的分离培养与鉴定
• 1.材料
• 1.1 病例来源
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要器械
• 1.4 培养基
• 2.方法
• 2.1 犬皮肤真菌病诊断
• 2.2 病料采集与接种培养
• 2.3 致病真菌鉴定
• 2.4 菌种保存
• 3.结果
• 3.1 四种致病真菌的形态特征
• 4.讨论
• 4.1 致病真菌的选择
• 4.2 分离培养
• 4.3 真菌鉴定
• 参考文献
• 第四章:中西结合抗皮肤真菌病药物的研制
• 1.材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据统计
• 2.结果
• 2.1 31味中药体外抑菌结果
• 2.2 12味中药体外最小抑菌浓度（MIC）值
• 2.3 西药体外最小抑菌浓度（MIC）值
• 2.4 中西药结合组方体外抑真菌实验结果
• 3.讨论
• 3.1 丝状真菌体外药物敏感性实验方法
• 3.2 关于药物选择
• 3.3 关于组方筛选
• 参考文献
• 第五章:自制中药抗癣剂的安全性和刺激性实验
• 1 皮肤刺激性实验
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 急性毒性实验
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 3.结果
• 3.1 复方抗癣剂对家兔完整皮肤和破损皮肤的刺激性试验
• 3.2 复方抗癣剂急性毒性实验
• 4.讨论
• 4.1 复方抗癣剂毒性研究的必要性和方法
• 4.2 关于刺激性和安全性评价
• 参考文献
• 第六章:抗皮肤真菌病药物的临床实验研究
• 1 复方抗癣剂常规护理使用实验
• 1.1 复方抗癣剂的制备工艺
• 1.2 材料
• 2.方法
• 2.1 部位选择
• 2.2 用药前真菌的分离培养
• 2.3 用药剂量、频率、持续时间
• 2.4 药浴
• 2.5 保证药物的良好吸收
• 2.6 用药后真菌的分离培养
• 3 结果
• 4 讨论
• 4.1 关于实验设计
• 4.2 药物的作用机理分析
• 4.3 皮肤真菌病的平时预防
• 参考文献
• 全文总结
• 致谢