线粒体移植对年老小鼠卵母细胞受精能力及植入前胚胎发育潜能的影响

论文摘要

目的:观察线粒体移植（MIT）对年老小鼠卵母细胞受精能力及其形成植入前胚胎发育潜能的影响。方法:6～8周龄雌性昆明种小鼠经超排卵、卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）及培养液空注后形成的胚胎为A组,12月龄雌性昆明种小鼠经同样处理后形成的胚胎为B组,12月龄雌性昆明种小鼠经超排卵、ICSI及MIT后形成的胚胎为C组。比较3组卵母细胞在相应注射处理后的存活率、受精率、卵裂率及其形成胚胎在冷冻复苏后的存活率和囊胚形成率,并以JC-1（5,5′,6,6′-tetrachloro-1,1′,3,3′-tetr-aethylbenzimidazoylcarbocyanine iodide）荧光染色法检测并分别比较在二细胞期、四细胞期、八细胞期、桑椹胚期和囊胚期各阶段3组胚胎的线粒体膜电位（△Ψm）以及每组胚胎△Ψm在植入前各阶段的变化趋势。结果:（1）在ICSI及MIT或空注后,A组卵母细胞存活率分别高于B组和C组（P＜0.01）,而后两者间无显著性差异（P＞0.05）。A、C两组卵母细胞受精率均高于B组（P＜0.05）,而前两者间无显著差异（P＞0.05）。3组卵裂率之间均无显著性差异（P＞0.05）。C组胚胎在冷冻复苏后存活率和囊胚形成率均高于B组（P＜0.05）,而C组与A组之间无显著性差异（P＞0.05）。（2）在二细胞期和桑椹胚期,A、C两组胚胎△Ψm均高于B组（P＜0.01）,而在四细胞期、八细胞期和囊胚期,A、C两组胚胎△Ψm均高于B组（P＜0.05）。3组中,桑椹胚和囊胚△Ψm均高于二细胞期、四细胞期和八细胞期胚胎（P＜0.05）,而前两者间以及后3者间均无显著性差异（P＞0.05）。结论:卵母细胞MIT可通过提高卵母细胞和早胚卵裂球内线粒体活性而明显改善年老小鼠卵母细胞受精能力,提高其所形成植入前胚胎的发育潜能。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 前言
• 一、线粒体在受精及植入前胚胎发育过程中的作用
• 二、卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）和线粒体移植（MIT）技术的发展及应用
• 三、胚胎的冷冻保存
• 材料和方法
• 一、研究对象
• 二、主要试剂和仪器
• 三、方法
• 结果
• 一、MIT对卵母细胞存活率、受精率和卵裂率的影响
• 二、MIT对胚胎冷冻复苏后存活率和囊胚形成率的影响
• 三、MIT对植入前胚胎细胞内Δψm的影响
• 讨论
• 一、MIT可提高年老小鼠卵母细胞受精能力
• 二、MIT后形成的小鼠植入前胚胎具有更强的耐受冷冻能力
• 三、MIT对年老小鼠植入前胚胎Δψm的影响
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 学位论文评阅及答辩情况表