T-bet和GATA3在儿童过敏性哮喘脱敏治疗中的变化

论文摘要

背景与目的：支气管哮喘是一种常见的呼吸道疾病，其发病机制尚未被完全阐明。已证实其发生过程受到遗传、免疫调控和环境等多重因素的影响。近年来随着对过敏性哮喘研究的深入，越来越多的证据表明过敏性支气管哮喘与Th1／Th2细胞比例失衡密切相关。初始Th细胞分化为Th1型或Th2型细胞需要一些特异性转录因子的相互作用。新发现T-bet和GATA3是在Th细胞分化为Th1细胞和Th2细胞过程中起重要作用的两种转录因子。T-bet属于T盒家族的转录因子，是Th1类细胞分化的关键因子，在初始T细胞分化为Th1细胞过程中被特异性上调表达，促使细胞Th1型应答优势，同时，T-bet也可以抑制GATA3的功能。GATA3属C4锌指结构家族成员，可以诱导Th2型细胞因子的产生，对早期T淋巴细胞形成及Th2细胞的定向分化具有重要作用，同时可以通过下调STAT4和IL-12Rβ2链的途径来抑制Th1型细胞分化。在哮喘患者，主要表现为Th2型细胞的数量增多，使体液免疫应答占优势。B细胞分化成浆细胞，大量产生IgE，诱发Ⅰ型超敏反应，从而引发支气管的慢性炎症。特异性免疫治疗（specific immunotherapy，SIT）是WHO推荐，哮喘治疗中唯一的对因治疗方法。自1911年Noon和Freeman首先将变应原特异性免疫治疗应用于变态反应临床治疗以来，已经取得了较好的效果，但至今对其治疗机制不甚明了。本研究以哮喘患儿为研究对象，分析SIT治疗前后转录因子T-bet和GATA3在PBMCs（Peripheral Blood Mononuclear Cell外周血单个核细胞）的表达变化，揭示其在SIT中的作用，为哮喘治疗和新药开发提供理论依据。方法：本实验选取的36例过敏性哮喘患儿来自郑州大学第一附属医院儿科门诊，其中男性19例，女性17例；年龄6～14岁，平均年龄12.5岁。按照治疗前，治疗15周和治疗51周分为三组，每组12人。所有病例有明确的哮喘病史和症状，符合支气管哮喘诊断标准。皮肤点刺试验尘螨抗原阳性，采用Alutard屋尘螨变应原制剂（ALK丹麦）脱敏方法进行标准化脱敏治疗。分别于治疗前、治疗15周（此时为最大剂量）、治疗51周后采集静脉血，分离外周血单个核细胞，提取总RNA放入-80℃冰箱保存。待RNA收集完成后，将RNA逆转录为cDNA。设计β-actin，T-bet，GATA3三对特异性引物，用荧光PCR的方法分别检测T-bet，GATA3相对β-actin的表达变化，用2-ΔΔct的方法进行分析。结果：随着治疗时间的延长，15周时T-bet相对β-actin的表达是治疗前的2.96倍，51周时，是治疗前的0.35倍；15周时GATA3相对β-actin表达，是治疗前的0.75倍；51周时，GATA3相对表达是治疗前的0.09倍。T-bet／GATA3的比值随着治疗的进展逐渐增高。15周时是治疗前的3.78倍，一年时是治疗前的4.69倍。结论：本试验表明在脱敏治疗前后患者外周血单个核细胞中转录因子T-bet基因表达水平相对与GATA3升高，表明转录因子T-bet和GATA3在哮喘脱敏治疗中起重要作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 论文 T-bet和GATA3在儿童过敏性哮喘脱敏治疗中的变化
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 综述 转录因子T-bet、GATA3和支气管哮喘
• 参考文献
• 缩略语
• 致谢