论文摘要
目的采取体外研究的方法,探讨表皮生长因子（EGF）在大肠癌化疗中的可能作用及其机制。方法MTT法检测不同浓度的EGF（0.1、1、5、10、50ng/ml）作用于大肠癌细胞株Caco-2细胞24h、48h、72h后的细胞存活率,观察EGF对癌细胞株体外增殖的最佳剂量及时间效应。检测Caco-2细胞未行EGF处理及经EGF预处理24h后,5-Fu、奥沙利铂、依立替康对大肠癌细胞株Caco-2半抑制率IC50的变化。细胞按处理方法不同分为:①对照组②EGF③5-Fu④5-Fu+EGF⑤奥沙利铂⑥奥沙利铂+EGF⑦依立替康⑧依立替康+EGF八组,其中EGF为5ug/ml预处理24h。AnnexinV-PI流式细胞术分析比较EGF与化疗药物联用后对Caco-2的细胞凋亡率的变化,观察肿瘤细胞经EGF预处理后对化疗药物的敏感性改变。Cyclins /DNA多参数流式细胞术分析EGF对细胞周期的影响,初步探讨EGF的作用机制。结果EGF浓度在1至50ng/ml范围内时对Caco-2细胞有明显的促增殖作用（P<0.05）,5ng/ml作用24h时其细胞存活率提高23.1±0.54%,随着EGF浓度的增大,作用时间的延长其促增殖能力反而降低。MTT法测得Caco-2细胞未行EGF处理时,5-Fu、奥沙利铂、依立替康的半抑制率分别为53.23、5.12、33.47 ug/ml,经5ng/mlEGF预处理细胞24h后,三种化疗药物对Caco-2细胞株的半抑制率IC50是45.12、3.81、27.98ug/ml。AnnexinV-PI流式细胞术分析细胞凋亡率:对照组凋亡率为6.75±0.64%,EGF组为2.73±0.36%,5-Fu:37.65±1.84%,5-Fu+ EGF:60.54±2.12%;奥沙利铂:51.11±1.89%,奥沙利铂+EGF:69.23±2.36%;依立替康:41.78±1.68%,依立替康+EGF:66.14±2.01%。CyclinE /DNA双参数流式细胞术检测静止期（G0期）细胞在细胞周期中所占比率:对照组为67.64±2.36%,EGF组为35.95±1.54%,5-Fu:49.90±1.68%,5-Fu+ EGF:32.51±1.94%;奥沙利铂:42.07±1.85%,奥沙利铂+EGF:14.46±2.54%;依立替康:49.00±2.35%,依立替康+EGF:24.22±2.12%。结论EGF可促进Caco-2细胞增殖,浓度为5 ng/ml作用24h时促增殖作用最强。肿瘤细胞经5 ng/ml的EGF预处理24h后,对5-Fu、奥沙利铂、依立替康的敏感性明显提高,这可能是EGF促进肿瘤细胞中的静止期细胞重新进入增殖周期,搞高了对化疗的敏感性。
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