论文摘要
系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）是一种典型的自身免疫性疾病，以体内B细胞的高度活化和大量自身抗体的产生为免疫学特征，发病机制迄今不明。树突状细胞（Dendritic cells，DC）是目前所知功能最强大的抗原提呈细胞（Antigen presenting cell，APC），具有调节免疫应答和免疫耐受的双重作用，其功能状态与体内自身反应性T、B细胞的活化密切相关，可能在SLE的发病中起重要作用。已有研究表明SLE患者的DC存在数量、表型和功能的异常，但其中的机制并不明了。SLE血清中细胞因子网络失调，多种具有免疫调节作用的细胞因子表达异常，它们都有可能影响树突状细胞分化发育的过程。有研究报道，SLE患者体内高表达的IFN-α可诱导单核细胞向DC异常分化发育成熟，递呈自身抗原，诱导自身反应性T细胞活化。然而，体内DC的来源有多种，造血干细胞也是其重要来源之一。此外，SLE血清中还存在其他许多异常表达的细胞因子，都可能对DC的分化发育过程产生影响。为此，本文旨在探讨SLE血清中的IFN-α对造血干细胞定向分化为DC的影响，并进一步研究SLE血清中的IL-6在DC分化发育过程中的作用。我们首先收集SLE患者和正常人血清，用ELISA法检测SLE血清中最常见、最可能起致病作用的细胞因子IFN-α、IL-6和IL-10的表达水平，并分析其表达水平与疾病活动度SLEDAI评分、相关免疫学指标（如血清抗dsDNA抗体和补体C3、C4水平）的相关性。然后，用GM-CSF+IL-4+TNF-α方案在体外诱导磁珠分选的脐血CD34+造血干细胞定向分化为树突状细胞，并在培养过程中分别加入IFN-α单独升高、IL-6单独升高以及IFN-α、IL-6同时升高的SLE血清，用以分析血清细胞因子对DC分化发育及其功能状态的影响；运用流式细胞术检测DC的表型，ELISA法检测DC分泌细胞因子的水平，CCK-8法分析DC刺激同种异体T细胞增殖的能力，ELISA法和流式细胞术检测DC对T细胞亚群分化影响，以观察SLE血清中的IFN-α和IL-6对造血干细胞定向分化发育为DC的异常影响。研究结果表明SLE患者血清中IFN-α、IL-6和IL-10的水平均显著升高，并与疾病活动度SLEDAI评分呈正相关，SLE血清中的IFN-α和IL-10的水平还与抗dsDNA抗体水平呈正相关，与补体C3水平呈负相关。SLE血清中异常升高的IFN-α和IL-6均可促进DC表面MHC-Ⅱ类分子HLA-DR和共刺激分子CD80、CD86的表达，增强其刺激同种异体T细胞增殖的能力，降低其分泌IL-12的水平；在对DC刺激T细胞亚群分化的影响上，IFN-α和IL-6却发挥了不同的作用，IFN-α参与诱导的DC促进了CD3+CD8-IFN-γ+Th1细胞亚群和CD3+CD8+IFN-γ+Tc1细胞亚群的分化以及Th1型细胞因子IFN-γ的产生，而IL-6参与诱导的DC则抑制了IFN-γ的产生，并存在抑制Th1和Tc1细胞分化的趋势；此外，当SLE血清中出现IFN-α和IL-6同时升高时，IFN-α与IL-6发挥相似的作用，促进DC的表型成熟，增强其刺激T细胞增殖的能力，抑制其分泌IL-12，但两者并未显示协同或叠加效应；关于IFN-α和IL-6在对所诱导的DC刺激T细胞亚群分化中的相互作用，则显示IFN-α可拮抗IL-6的效应，使其所诱导的DC刺激T细胞亚群分化时表现为Th1和Tc1细胞增多和IFN-γ水平升高的趋势。综合上述，本研究显示SLE血清中显著升高的IFN-α和IL-6对造血干细胞定向分化为树突状细胞的过程可产生显著的影响，促进树突状细胞的表型成熟和功能转变，并能间接影响T细胞亚群的分化，在SLE发病机制中可能起重要作用。