金黄色葡萄球菌及其肠毒素基因分布的研究

论文摘要

近年来,随着消费者对食品安全的关注及国际贸易环境的要求,食品安全问题得到了前所未有的重视。而由致病性微生物和其他有毒、有害因素引起的食物中毒和食源性疾病的发病率是衡量食品安全状况的直接指标,是食品安全问题最直接的体现。我国亦将食源性疾病尤其是微生物污染引起的食源性疾病列为当前我国食品安全面临的八大难题的首要问题。金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一种普遍存在于自然界的重要的食源性致病菌,能产生多种致病性物质,如毒素、酶类和菌体的一些成份。其中肠毒素（Staphylococcal enterotoxins,SE）在该菌的致病性中起着重要的作用。本文对采自石家庄地区的速冻食品、生鲜肉、肉制品、水产品、生肉加工车间棉拭子等114份样品进行金黄色葡萄球菌的分离与鉴定,金黄色葡萄球菌的总检出率为20.2%;本实验室前人对保定地区人化脓组织样品、理发用具、生牛奶、速冻食品、生鲜肉、肉制品、水产品、果蔬、豆制品、空气、动物粪便及水等685份样品进行金黄色葡萄球菌筛选,金黄色葡萄球菌的阳性检出率为22.6%。综合两个地区试验数据,证实保定和石家庄两地金黄色葡萄球菌的污染程度较高,人化脓组织、理发用具、生牛奶、速冻食品以及生鲜肉受其污染严重,应引起相关人员的高度重视。金黄色葡萄球菌引起的食物中毒主要是由于进食了含有金黄色葡菌球菌肠毒素的食物。目前,金黄色葡萄球菌肠毒素按血清学分型常可分为14型（A、B、C、D、E、G、H、I、J、K、L、M、N、O）,随着现代分子生物学技术的不断发展,新型的葡萄球菌肠毒素也相继被发现,如葡萄球菌肠毒素SEp、SEq、SEr、SEu等[1]。本试验设计合成金黄色葡萄球菌SEg、SEi、SEh、SEu致病基因的引物,进行PCR鉴定,以研究这四种金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布状况。在分离得到的371株金黄色葡萄球菌中,共有327株含有SEg、SEi、SEh、SEu中的一种或多种肠毒素基因,总检出率为88.14%。可见肠毒素基因在金黄色葡萄球菌中大量存在。SEg与SEi同时存在的几率极高,说明SEg与SEi之间存在着协同作用,与其他报道相符[2-6]。SEi与SEu之间很可能存在着某种抑制作用,但当SEg与SEi和SEu同时出现时,检出率上升,说明该抑制作用可能受SEg的影响。SEh和SEu基因型在低温食品中检出率相对较高,很可能其对低温有更强的抵御和适应能力,应引起特别注意。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 目的意义
• 1.2 金黄色葡萄球研究现状
• 1.2.1 金黄色葡萄球菌生物学特征
• 1.2.2 金黄色葡萄球菌的流行病学
• 1.2.3 金黄色葡萄球菌的致病性
• 1.2.4 金黄色葡萄球菌的鉴定和分型方法
• 1.3 肠毒素研究现状
• 1.3.1 肠毒素的种类
• 1.3.2 肠毒素的理化特性
• 1.3.3 肠毒素的分子组成
• 1.3.4 肠毒素的流行病学
• 1.3.5 肠毒素的致病性
• 1.3.6 肠毒素的超抗原活性
• 1.3.7 肠毒素的检测方法
• 1.4 研究目的和内容
• 2 材料和方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 菌株
• 2.1.2 样品的采集
• 2.1.3 培养基和有关溶液的配制
• 2.1.4 主要试剂
• 2.1.5 主要仪器设备
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 样品的采集
• 2.2.2 金黄色葡萄球菌的分离
• 2.2.3 金黄色葡萄球菌的鉴定
• 2.2.4 金黄色葡萄球菌致病因子——肠毒素基因的鉴定
• 3 结果与分析
• 3.1 食源性金黄色葡萄球菌分布的研究
• 3.2 肠毒素基因的鉴定及其分布研究
• 3.2.1 标准菌株的PCR 鉴定
• 3.2.2 SEg 的PCR 鉴定
• 3.2.3 SEh 的PCR 鉴定
• 3.2.4 SEi 的PCR 鉴定
• 3.2.5 SEu 的PCR 鉴定
• 4 讨论
• 4.1 食源性金黄色葡萄球菌自然分布
• 4.2 金黄色葡萄球菌肠毒素的分布
• 5 结论
• 6 参考文献
• 作者简历
• 致谢