卓倩:pNZ8149-IL21基因乳酸菌表达载体的构建与表达特性论文

卓倩:pNZ8149-IL21基因乳酸菌表达载体的构建与表达特性论文

本文主要研究内容

作者卓倩,韩煜东,徐文雨,袁婷,王庆苓,赵树立(2019)在《pNZ8149-IL21基因乳酸菌表达载体的构建与表达特性》一文中研究指出:构建重组质粒pNZ8149-IL21,并将其转到乳酸球菌中,利用Nisin诱导基因表达系统分析重组质粒在乳酸球菌中的表达。采用基于聚合酶链式反应的精确合成(PCR-based accurate synthesis,PAS)的方法,合成目的基因IL21,连入载体pUC57,获得重组质粒pUC57-IL21;对含有目的基因的pUC57-IL21和pNZ8149质粒进行双酶切后,构建pNZ8149-IL21质粒;采用电转化方法将连接产物转化进NZ3900,涂板挑取12个单菌落培养后,进行PCR验证,筛选出阳性克隆,从诱导剂Nisin的浓度(30,50和100 ng/m L)和诱导时间(12和24 h)进行诱导条件优化分析IL21在乳酸菌中表达。目的蛋白在乳酸菌NZ3900中得到表达,在50 ng/m L的Nisin诱导24 h可见目的蛋白在相对分子质量15 k左右有条带表达,Nisin诱导24 h的效果优于12 h。结果说明选择乳酸菌作为载体表达系统,构建IL21高表达的重组乳酸菌是可行的。

Abstract

gou jian chong zu zhi li pNZ8149-IL21,bing jiang ji zhuai dao ru suan qiu jun zhong ,li yong Nisinyou dao ji yin biao da ji tong fen xi chong zu zhi li zai ru suan qiu jun zhong de biao da 。cai yong ji yu ju ge mei lian shi fan ying de jing que ge cheng (PCR-based accurate synthesis,PAS)de fang fa ,ge cheng mu de ji yin IL21,lian ru zai ti pUC57,huo de chong zu zhi li pUC57-IL21;dui han you mu de ji yin de pUC57-IL21he pNZ8149zhi li jin hang shuang mei qie hou ,gou jian pNZ8149-IL21zhi li ;cai yong dian zhuai hua fang fa jiang lian jie chan wu zhuai hua jin NZ3900,tu ban tiao qu 12ge chan jun la pei yang hou ,jin hang PCRyan zheng ,shai shua chu yang xing ke long ,cong you dao ji Nisinde nong du (30,50he 100 ng/m L)he you dao shi jian (12he 24 h)jin hang you dao tiao jian you hua fen xi IL21zai ru suan jun zhong biao da 。mu de dan bai zai ru suan jun NZ3900zhong de dao biao da ,zai 50 ng/m Lde Nisinyou dao 24 hke jian mu de dan bai zai xiang dui fen zi zhi liang 15 kzuo you you tiao dai biao da ,Nisinyou dao 24 hde xiao guo you yu 12 h。jie guo shui ming shua ze ru suan jun zuo wei zai ti biao da ji tong ,gou jian IL21gao biao da de chong zu ru suan jun shi ke hang de 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自药物生物技术的卓倩,韩煜东,徐文雨,袁婷,王庆苓,赵树立,发表于刊物药物生物技术2019年02期论文,是一篇关于基因论文,重组质粒论文,重组质粒论文,乳酸乳球菌论文,表达鉴定论文,诱导基因表达系统论文,药物生物技术2019年02期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自药物生物技术2019年02期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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