论文题目: 脱氧核酶阻断period1基因表达的体内外研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 生物医学工程
作者: 周薇
导师: 王正荣
关键词: 药物成瘾,基因,脱氧核酶,体外切割,条件位置偏爱
文献来源: 四川大学
发表年度: 2005
论文摘要: 药物成瘾是长期滥用药物造成的,已成为全球关心的医学和社会问题,对药物的精神依赖至今尚无理想的治疗方法,本研究立足于近日基因period1（per1）和药物成瘾的关系,采用脱氧核酶阻断per1基因的表达,深入探讨per1基因对药物成瘾影响作用,进而寻求解决药物成瘾的基因疗法。 针对period1（per1）RNA组分模板区设计合成10—23型脱氧核酶（deoxyribozyme）DRz164、DRz256,构建pcDNA3.1（+）-per1164:256体外转录质粒,T7/SP6体外转录后,转录产物和DRz164或DRz256在一定的条件下行体外切割反应,用地高辛核酸检测试剂盒检测脱氧核酶对per1mRNA组分的体外切割效率。脂质体介导法,pcDNA3—per1和DRz分别导入NIH3T3细胞,逆转录聚合酶链反应和流式细胞术检测NIH3T3细胞per1表达。结果显示DRz164和DRz256可以特异性地切割per1mRNA组分,反应2h切割效率分别为63%和50.5%。pcDNA3—per1和DRz共转染NIH3T3后,per1基因表达下降,Per1蛋白生成减少。 预先小鼠脑室注射DRz164,建立吗啡成瘾（慢性依赖）动物模型,通过条件位置偏爱实验观察DRz164对吗啡奖赏效应的影响。最后一次吗啡（盐水）注射后每隔4h提取脑组织蛋白,western blot检测Per1蛋白变化,观察DRz164对Per1蛋白的影响。最后一次吗啡（盐水）注射后
论文目录:
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 脱氧核酶抑制per1基因表达的体外研究
一 材料和方法
二 结果
三 讨论
四 结论
五 参考文献
第二部分 脱氧核酶缓解小鼠吗啡成瘾(依赖)的研究
一 材料和方法
二 结果
三 讨论
四 结论
五 参考文献
第三部分 脱氧核酶转染吗啡依赖SH-SYSY细胞的研究
一 材料和方法
二 结果
三 讨论
四 结论
五 参考文献
总结及创新点
综述
在读期间发表的文章
致谢
声明
发布时间: 2005-10-08
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