论文摘要
目的:观察普罗布考在ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡过程中对Daxx、CD36、Caveolin-1、ABCA1、Caspase3表达的影响,初步探讨普罗布考抗ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡的机制。 方法:流式细胞术检测细胞凋亡率;吖啶橙（AO）荧光染色观察细胞核形态。RT-PCR、间接免疫荧光法分别检测Daxx、Caveolin-1、CD36、ABCA1、Caspase3 mRNA和蛋白质的表达。Western blot检测Daxx蛋白质的表达。检测细胞内丙二醛硫代巴比妥酸反应物（TBARS）含量反映过氧化脂质的水平。 结果:100μg/mL ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡率时序增加;ox-LDL孵育细胞48小时后,细胞出现核浓缩、碎裂、凋亡小体等凋亡特征;Daxx、Caveolin-1、CD36、ABCA1的表达增高。用50μmol/L普罗布考预处理细胞4小时,再用100μg/mL ox-LDL孵育48小时后,细胞凋亡率由8.56±0.23%下降至3.86±1.14%;Daxx、Caspase3 mRNA和蛋白质水平下调,Caveolin-1、ABCA1 mRNA水平无明显改变,蛋白质表达下调,而CD36的表达没有改变。细胞内TBARS含量由9.37±0.21下降至4.16±0.13nmol/mg protein。 结论:1.普罗布考通过下调Daxx、Caspase3蛋白质的表达,抑制ox-LDL诱导THP-1巨噬细胞凋亡。 2.普罗布考抗凋亡作用与普罗布考降低细胞内氧化脂质含量有关。
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