论文摘要
大型真菌中富含具有抗肿瘤,抗病毒,调节机体免疫力等功能的活性化合物,在一些担子菌类,具有生理活性的化合物不仅存在于子实体,也发现于它的菌丝体以及发酵液中,这一点给原料来源问题提供了思路。前期的研究已经证明,黄粘盖牛肝菌（Suillus flavidus）和大白桩菇菌（Leucopaxillus giganteus）均具有显著的体外抗肿瘤效果,并且主要活性成分也比较清楚,给研究适宜的发酵条件提供了基础。本文分离了这两种蘑菇的菌丝体进行纯化培养,并测量在不同水平的理化参数的发酵条件下所产生的菌丝体生物量,从而选择发酵的最佳条件。同时,也用MTT法检测了两种菌丝体的甲醇和乙酸乙酯提取物的体外杀伤癌细胞的细胞毒活性。主要试验结果如下:1黄粘盖牛肝菌菌丝体发酵条件的优化结果该菌发酵的最佳培养基配方是葡萄糖20.0g/L,马铃薯200.0g/L,酵母浸膏7.0g/L,KH2PO43.0g/L,MgSO4·7H2O 1.5g/L,VB10.01mg/L,CaCO3 2.0g/L。摇瓶发酵最佳培养条件是:振荡速度160r/min,培养基初始PH值5.8,培养温度26℃,摇瓶装液量600mL/1000mL2黄粘盖菌丝体提取物的细胞毒性作用MTT的结果表明,黄粘盖牛肝菌菌丝体乙酸乙酯粗提物具有明显的抗肿瘤活性,对肝癌SMMC 7721和宫颈癌HeLa细胞的半数抑制率IC50＜50μg/ml,甲醇部分的细胞毒作用相比之下不明显,50μg/ml＜IC50＜100μg/ml。大量发酵菌丝体获得更多的乙酸乙酯提取物用于化合物分离,得到具有细胞毒性作用的活性物质,并鉴定为sullin。3大白桩菇菌丝体发酵条件的优化结果大白桩菇菌发酵的最佳培养基配方是蔗糖20.0g/L,玉米粉5.0g/L,酵母浸膏7.0g/L,KH2PO43.0g/L,MgSO4·7H2O 1.5g/L,VB10.01mg/L and CaCO3 2.0g/L.固体发酵最佳条件是:培养基初始PH值6,培养温度25℃.4大白桩菇菌丝体提取物的细胞毒性作用MTT的试验结果表明,大白桩菇菌丝体的乙酸乙酯提取物部分具有较强的体外抗肿瘤活性,对肝癌SMMC 7721和宫颈癌HeLa细胞的半数抑制率IC50均小于100μg/ml,而包括HPLC,MS在内的波谱数据说明菌丝体中抗肿瘤作用的有效成分可能是clitocin或者其结构类似物。