酸马奶乳酸菌的分离鉴定及其抗霉菌活性研究

论文摘要

本实验对分离自锡林郭勒盟的3份酸马奶样品中的乳酸菌进行了生理生化鉴定和分子鉴定,利用紫外分光光度测定其耐盐及耐酸性,并通过短线法进行了抗霉菌活性的研究。经实验得到以下结论:(1)共分离得到乳酸菌67株,全部为乳酸杆菌,未分离到乳酸球菌,分别鉴定为:棒状乳杆菌扭曲亚种(Lactobacillus coryniformis subsp. Torquens)7株,德氏乳杆菌德氏亚种(Lb. delbrueckii subsp. delbrueckii)11株,双发酵乳杆菌(Lb. bifermentans)5株,嗜淀粉乳杆菌(Lb. amylophilus)8株,瑞士乳杆菌(Lb. helueticus)24株,德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lb. delbrueckii subsp. bulgarcus)12株。(2)通过耐盐、耐酸和抗霉菌实验,筛选出耐盐耐酸性较好的菌株有:棒状乳杆菌扭曲亚种(Lb. coryniformis subsp. Torquens)1株,瑞士乳杆菌(Lb. helueticus)4株;抗5种霉菌的菌株3株、抗4种霉菌的菌株11株、抗3种霉菌的菌株1株。其中1株Lb. delbrueckii subsp. delbrueckii、6株Lb. helueticus对霉菌Fusarium oxysporum f. sp. Cucumerinum JCM9284的抗性较好。(3)对其中抗霉菌活性较好的11株菌进行分子鉴定,经与标准菌株序列进行序列比对,初步鉴定为瑞士乳杆菌。(4)综合上述实验,本实验得到耐酸、耐盐和抗霉菌活性较好的瑞士乳杆菌(Lb. helueticus)4株和棒状乳杆菌扭曲亚种(Lb. coryniformis subsp. Torquens)1株。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 我国马产业现状
• 1.2 马奶的成分分析
• 1.3 酸马奶的发展历史及医疗功效
• 1.4 酸马奶中微生物群研究现状
• 1.5 菌种鉴定发展概况
• 1.6 抗霉菌活性研究现状
• 1.7 本实验的研究目的和意义
• 2 乳酸菌的初步分离和生化鉴定
• 2.1 材料
• 2.1.1 样品来源
• 2.1.2 实验仪器设备
• 2.1.3 培养基与试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 酸马奶乳酸菌的分离和保存
• 2.2.2 酸马奶乳酸菌的鉴定
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 酸马奶乳酸菌的分离及生化鉴定结果
• 2.3.2 分析
• 3 抗霉菌实验
• 3.1 材料
• 3.1.1 乳酸菌来源
• 3.1.2 霉菌名称及来源
• 3.1.3 实验仪器设备
• 3.1.4 培养基与试剂
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 耐盐实验
• 3.2.2 耐酸菌株的筛选
• 3.2.3 霉菌孢子计数
• 3.2.4 霉菌的培养
• 3.2.5 抗霉菌实验
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 耐盐实验结果
• 3.3.2 耐酸实验结果
• 3.3.3 抗霉菌实验结果
• 3.3.4 分析
• 4 分子鉴定
• 4.1 材料
• 4.1.1 供试菌株
• 4.1.2 主要试剂及试剂盒
• 4.1.3 仪器设备
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 DNA 的提取
• 4.2.2 DNA 扩增及其扩增产物的琼脂糖凝胶检测
• 4.2.3 PCR 产物纯化回收
• 4.2.4 PCR 产物的克隆
• 4.2.5 质粒的提取
• 4.2.6 测序
• 4.2.7 序列分析方法
• 4.3 结果与分析
• 4.3.1 DNA 的提取结果
• 4.3.2 PCR 产物的检测结果
• 4.3.3 PCR 产物纯化回收结果
• 4.3.4 PCR 产物的克隆结果
• 4.3.5 质粒的提取结果
• 4.3.6 测序结果
• 4.3.7 分析
• 5 总体讨论与结论
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介