论文摘要
目的:研究川贝母止嗽颗粒对急性支气管炎的治疗作用,揭示川贝母止嗽颗粒治疗急性支气管炎的作用机理。方法:采用体内外多种实验技术方法,从整体、器官、分子水平多层次全面系统深入评价川贝母止嗽颗粒治疗急性支气管炎的作用特点、作用机理。采用香烟加锯末面混合烟熏法复制急性支气管炎动物模型研究川贝母止嗽颗粒的治疗作用。实验结束后,采用病理组织学方法观察大鼠、小鼠的气管、支气管的病理形态;采用透射电镜观察大鼠的支气管超微结构改变;取大鼠、小鼠血清,采用Elisa法测定大鼠血清NF-kB、sICAM-1及相关细胞因子(IL-6、IL-8、TNF-α)及小鼠血清相关细胞因子(IL-8、TNF-α);从病理组织学、超微结构、分子的角度评价中药复方治疗急性支气管炎的作用。通过小鼠氨水喷雾法、豚鼠枸橼酸喷雾法、豚鼠辣椒素喷雾法研究川贝母止嗽颗粒的止咳作用;采用Elisa法测定豚鼠血清和支气管肺泡灌洗液中的P物质含量。磷酸组胺乙酰胆碱混合喷雾法、豚鼠离体气管螺旋条法研究川贝母止嗽颗粒的平喘作用。小鼠酚红排泌法、大鼠毛细玻管法研究川贝母止嗽颗粒的化痰作用;高效液相色谱法测定大鼠支气管肺泡灌洗液中二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)的含量,探索从支气管肺泡表面活性物质分泌的角度评价中药复方的化痰作用。体内外抗菌法研究川贝母止嗽颗粒的抗菌作用。二甲苯所致小鼠耳廓肿胀法、新鲜鸡蛋清大鼠足跖肿胀法、小鼠棉球肉芽肿法研究川贝母止嗽颗粒的抗炎作用。结果:1、川贝母止嗽颗粒对大鼠急性支气管炎的治疗作用研究表明,与模型组比较,川贝母止嗽颗粒组高、中、低剂量组大鼠支气管光镜下偶见或见少量炎细胞浸润;川贝母止嗽颗粒组高、中、低剂量组大鼠积分光密度值、目标面积显著降低。与模型组比较,川贝母止嗽颗粒高、中剂量组支气管纤毛上皮线粒体正常,低剂量组支气管纤毛上皮线粒体轻度肿胀。与模型对照组比较,川贝母止嗽颗粒高、中剂量组均能显著降低大鼠血清中IL-6、IL-8、TNF-α、NF-κB、sICAM-1的含量。低剂量组能够显著降低大鼠血清中的TNF-α、NF-κB、sICAM-1含量。2、川贝母止嗽颗粒对小鼠急性支气管炎的治疗作用研究结果表明,与模型组比较,川贝母止嗽颗粒组高、中、低剂量组小鼠支气管光镜下偶见或见少量炎细胞浸润;川贝母止嗽颗粒组高、中、低剂量组小鼠积分光密度值、目标面积显著降低。与模型对照组比较,川贝母止嗽颗粒高、中、低剂量组能够显著降低小鼠血清中IL-8的含量,高、中剂量组能够显著降低小鼠血清中的TNF-α的含量。3、川贝母止嗽颗粒的止咳作用研究结果表明,与空白对照组比较,川贝母止嗽颗粒中、低剂量组能显著提高氨水所致小鼠咳嗽潜伏期,川贝母止嗽颗粒高、中、低剂量组能显著降低2min内的小鼠的咳嗽次数。川贝母止嗽颗粒高、中、低剂量组能够显著提高枸橼酸致豚鼠咳嗽潜伏期及显著降低枸橼酸致豚鼠5min内的咳嗽次数。川贝母止嗽颗粒高、中、低剂量组均能显著降低辣椒素致豚鼠5min内的咳嗽次数及显著降低豚鼠血清中的P物质含量;川贝母止嗽颗粒中、低剂量组均能显著降低豚鼠支气管肺泡灌洗液中的P物质含量。4、川贝母止嗽颗粒的平喘作用研究结果表明,与空白对照组比较,川贝母止嗽颗粒高、中剂量组均能显著提高磷酸组胺乙酰胆碱混合溶液喷雾致豚鼠哮喘的引喘潜伏期。川贝母止嗽颗粒高、中、低剂量组均能显著降低氯化乙酰胆碱(终浓度1×10-7g/ml)引起的离体豚鼠气管螺旋条的收缩张力。5、川贝母止嗽颗粒的化痰作用研究结果表明,与空白对照组比较,川贝母止嗽颗粒中、低剂量组均能促进小鼠酚红排泌量;川贝母止嗽颗粒高、中、低剂量组能显著促进大鼠毛细玻管排痰量;能够不同程度地提高大鼠肺泡表面活性物质(DPPC)的含量。6、川贝母止嗽颗粒的抗菌作用研究结果表明,川贝母止嗽颗粒在体外对金黄色葡萄球菌、吉氏库特氏菌、巨型球菌、粪肠球菌、棒状杆菌、芽孢杆菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、产吲哚金黄杆菌、鲁氏不动杆菌、普通变形菌、弗氏志贺氏菌等革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌具有不同程度的抑制作用;川贝母止嗽颗粒高、中、低剂量组对小鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌的存活率分别为33.33%、41.67%、25%;对小鼠腹腔注射大肠埃希菌的存活率分别为58.33%、58.33%、41.67%。7、川贝母止嗽颗粒的抗炎作用研究结果表明,与空白对照组比较,川贝母止嗽颗粒高、中、低剂量组均能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,均能显著抑制10%新鲜鸡蛋清所致大鼠足跖肿胀的作用,均能显著减轻小鼠棉球肉芽肿的重量,抑制肉芽组织增生。结论:川贝母止嗽颗粒对急性支气管炎的治疗作用特点是通过多层次、多环节、多途径发挥综合调控效应,既能抑制致病因素,又能改善症状。川贝母止嗽颗粒能够明显改善急性支气管炎模型大鼠及小鼠支气管的病理状态;下调大鼠血清中升高的IL-6、IL-8、TNF-α、NF-κB、sICAM-1,下调小鼠血清中升高的IL-8及TNF-α;止咳、化痰、平喘、抗菌、抗炎作用,对急性支气管炎具有较好的治疗作用。
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