导读:本文包含了体内转染论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:血管内皮生长因子,肺动脉高压,转染,基因治疗
体内转染论文文献综述
黄悦,兰江,胡蓉,高杰,李红[1]（2018）在《体内转染血管内皮生长因子基因对慢性低氧诱导小鼠肺动脉高压的影响》一文中研究指出目的探讨血管内皮生长因子(Vegf)体内转基因对慢性低氧诱导小鼠肺动脉高压(PAH)的治疗作用。方法将昆明雄性小鼠36只随机分为3组:低氧Vegf治疗组(P-V组),模型组(PAH组),对照组(C组),每组12只。采用间断性常压缺氧法复制小鼠PAH模型。观察4周后,P-V组经尾静脉注射聚乙烯亚胺(PEI)包被的pBudCE4.1-Vegf-EGFP载体,其他组注射等量生理盐水,继续低氧处理。转基因治疗后30 d,观察小鼠的一般情况、平均肺动脉压(mPAP)、动脉血气、右心肥大指数[右心室/(左心室+室间隔)]及肺小动脉形态学改变,RT-PCR方法检测增强绿色荧光蛋白(EGFP)表达情况;Real-time PCR方法检测各实验组肺组织Vegf mRNA量; ELISA方法及硝酸还原酶法分别检测各实验组肺组织VEGF和NO含量。结果 PAH组小鼠出现代谢性酸中毒,平均肺动脉压升高,右心室肥厚,肺小动脉管壁厚度(WT)增加,与C组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。与PAH组相比,P-V组小鼠平均肺动脉压升高、右心室肥厚及肺小动脉管壁增厚减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。与PAH组小鼠相比,P-V组小鼠外源基因Vegf的mRNA及蛋白水表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Vegf转基因治疗能上调慢性低氧诱导小鼠的肺组织中Vegf mRNA和VEGF的表达,从而拮抗肺动脉压升高,减轻右心肥厚及肺动脉血管增厚。(本文来源于《解剖学报》期刊2018年06期）
韩秀江,高晟,徐新建[2]（2018）在《pIL-13体内转染对病毒性心肌炎模型小鼠的保护作用及其机制》一文中研究指出目的探讨IL-13基因质粒水平基因转移(pIL-13 HGT)缓解柯萨奇病毒B3型(CVB3)诱导BALB/c小鼠急性病毒性心肌炎的机制。方法将BALB/c小鼠分为十二组,每组6～8只。A组为对照;其他组小鼠按照每只10~3半数组织培养感染剂量(TCID_(50))/100μl PBS的病毒量腹腔注射,建立CVB3诱导的急性病毒性心肌炎小鼠模型。B组采用脂多糖(LPS)+IFN-γ治疗;C组采用LPS+IFN-γ+IL-13治疗;D组单用IL-13治疗;E组没有经载体HGT处理;F组经载体HGT空质粒处理;G组经pIL-13HGT治疗;H组不做任何治疗作为阳性对照;四个采用不同IL-13用量(0、0.2、2和20ng/ml)治疗组。采用流式细胞术分析F4/80~+CD206~+巨噬细胞比例和CD206的表达,ELISA法检测各细胞因子表达水平。结果随着IL-13浓度的升高,F4/80~+骨髓巨噬细胞(BMDM)的CD206和IL-10的表达也增加(P<0.05)。B组BMDM的TNF-α、IL-12表达高于A、C和D组(P<0.05),而IL-10表达低于C、D组(P<0.05)。B组的IL-6表达高于A、D组(P<0.05)。G组心脏浸润细胞和脾细胞中F4/80~+CD206~+巨噬细胞比例和F4/80~+巨噬细胞荧光强度高于E、F组(P<0.05)。与F组相比,G组心脏组织和脾脏组织中TNF-α表达降低(P<0.05),而IL-10表达增加(P<0.05)。E组心脏浸润细胞中CD3~+CD4~+T细胞比例高于F、G组(P<0.05)。G组心脏浸润细胞中F4/80~+巨噬细胞比例高于E、F组(P<0.05)。G组血清中IFN-γ表达低于E、F组,而IL-4表达高于E、F和H组(P<0.05)。E、F组血清中Th1细胞的比例高于G、H组(P<0.05)。结论 IL-13在CVB3诱导的病毒性心肌炎中起保护性作用,而M2型巨噬细胞和Th2应答可能均参与了这一过程。(本文来源于《江苏医药》期刊2018年11期）
宾莉,杜之渝,陈晓莉[3]（2016）在《慢病毒载体体内转染大鼠角膜基质细胞的安全性实验研究》一文中研究指出目的:研究病毒载体介导的增强型绿色荧光蛋白(Lenti-EGFP)通过2种途径体内转染大鼠角膜基质细胞的安全性,为角膜相关疾病的基因治疗提供实验基础。方法:将Lenti-EGFP通过角膜基质注射和刮除角膜上皮敷贴带Lenti-EGFP的棉片2种不同方法体内转染大鼠角膜基质细胞,转染后定期在裂隙灯下观察,以3,7,26和48 d 4个不同时间点收集角膜,固定后切片,经HE染色后采用光镜、电镜检查和Tunel法检测细胞凋亡。结果:两组(1b组、1c组)大鼠转染了Lenti-EGFP的角膜各层细胞形态及超微结构与对照组(1a组)之间各组细胞凋亡百分率经比较其差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Lenti-EGFP通过上述2种转染途径均可安全的转染角膜基质细胞。(本文来源于《抗感染药学》期刊2016年04期）
S.Tavri,A.Vezeridis,W.Cui,F.Robert,R.F.Mattrey[4]（2015）在《在体内转染和检测经携带DNA微泡转染的干细胞基因表达》一文中研究指出摘要目的探讨(a)携带DNA的微泡(MB)能否在体转染干细胞;(b)转染的细胞是否具有活力并表达基因;(c)基因表达在体内能否足以被检测。材料与方法本研究经动物伦理委员会批准。准备荧光素酶绿色荧光蛋白(GFP)质粒标记的阳离子MB,标记经SYBR Gold染色法(Life Technologies,Carlsbad,Calif)确认。携带DNA的MB转染C17.2细胞。2×105个细胞悬浮在20μL磷酸盐缓冲液中,然后加入200μL(本文来源于《国际医学放射学杂志》期刊2015年05期）
张韬,程变巧,林伟国,朱琪[5]（2015）在《慢病毒介导PXR体内转染对CCl_4诱导的大鼠肝损伤的保护作用研究》一文中研究指出目的探讨PXR对CCl4诱导的大鼠肝损伤的保护作用。方法雄性SD大鼠48只,随机分为4组,空白组不做任何处理;模型组通过CCl4灌胃诱导肝损伤;空载体组在建立肝损伤模型前3天静脉注射慢病毒空载体;PXR慢病毒组在建立肝损伤模型前3天静脉注射PXR重组慢病毒。通过血清AST和ALT检测和肝脏HE染色评估肝损伤程度;Western blot及RT-PCR检测大鼠肝组织中PXR、NF-κB、IL-1、IL-2和TNF-α的表达。结果慢病毒介导PXR体内转染后肝损伤大鼠血清AST和ALT明显降低,肝损伤及纤维化程度明显减轻,PXR表达水平明显升高,相反,NF-κB、IL-1、IL-2和TNF-α的表达水平明显降低。结论 PXR可能通过抑制NF-κB的表达,下调炎症相关因子IL-1、IL-2和TNF-α的表达,从而对CCl4诱导的大鼠肝损伤具有一定的保护作用,可为肝损伤的治疗提供一种新的途径和思路。(本文来源于《中国肝脏病杂志(电子版)》期刊2015年01期）
马东青,崔红[6]（2014）在《miRNA体内转染的研究进展》一文中研究指出微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)是一种内源性非编码RNA,主要参与基因转录后水平的调控。虽然miRNA的生物学功能刚刚被人们熟知,它在疾病的发病和进展中所显现的治疗潜力已引起人们极大的兴趣。越来越多的证据表明,以miRNA为基础的基因治疗,不管是增强或抑制miRNA的表达和活性,都有很大的应用前景。但是靶向特定器官和组织特异性差的缺点,使得其应用于临床还存在限制。这些限制包括基因传递(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2014年21期）
梁峰,姚强,贾长青[7]（2014）在《GDF-5基因体外转染骨髓间充质干细胞移植与GAM体内转染对椎间盘退行性变作用的动物实验研究》一文中研究指出目的通过对比体外生长分化因子5(GDF-5)转染并移植和基因活化基质(GAM)体内转染对椎间盘退行性变的修复作用,评价这两种方法的差异,以期为临床应用提供依据。方法日本大耳白兔32只,体质量约1.5~2.0kg,雌雄不限。取兔骨髓,分离骨髓间充质干细胞(BMSC),用脂质体介导的pcDNA3.1(+)/GDF-5基因重组质粒转染BMSC。将兔随机分为A组(正常组)、B组(转染细胞组)、C组(GAM组)、D组(对照组)。B、C、D组从L1-2、L2-3、L3-4、L4-5抽吸约湿质量5mg的髓核组织,制作椎间盘退行性变动物模型;B组植入已转染GDF-5的BMSC,C组植入GDF-5GAM,D组植入空白培养液。术后2个月将包括软骨终板在内的各组完整的椎间盘取出,采用间苯叁酚法测量椎间盘髓核中蛋白多糖含量,采用流式细胞仪检测分析髓核细胞凋亡率。结果转染48 h后BMSC生长良好,体积略增大。经测定pcDNA3.1(+)/GDF-5基因转染成功后髓核内蛋白多糖含量,B组(0.2169±0.0264)与A组(0.2401±0.0300)间差异无统计学意义(P=0.149);其余组(C组、D组分别为0.1667±0.0278、0.1153±0.033 7)两两比较,差异都有显着的统计学意义(P<0.01)。髓核细胞凋亡率,A组(24.55%±2.681%)与B组(30.980%±2.462%)间差异具有统计学意义(P=0.012),其余各组(C组、D组分别为38.220%±2.524%、57.530%±2.349%)两两相比,差异都有显着统计学意义(P<0.01)。结论相对于利用GAM进行体内转染,体外转染BMSC然后再移植入体内的方法修复椎间盘退行性变的效率更高。(本文来源于《生物医学工程与临床》期刊2014年05期）
梁峰,贾长青,谭树森,刘振宁[8]（2014）在《GDF-5基因活化基质体内转染修复兔退变椎间盘的实验研究》一文中研究指出目的通过GDF5基因活化基质体内转染兔退变椎间盘,观察其修复效果。方法脂质体介导的pcDNA3.1(+)/GDF-5重组质粒混入Ⅰ型胶原支架,置入兔退变椎间盘;实验分为GAM组,普通支架组,脂质体对照组,2个月后RT-PCR和Western blot观察椎间盘髓核细胞GDF-5基因和蛋白表达的稳定性,间苯叁酚法检测髓核蛋白多糖含量,流式细胞仪检测细胞凋亡率来观察修复效果。结果 RT-PCR结果显示术后2个月GDF-5基因稳定表达。GAM组蛋白多糖含量高于另外两组(<0.05),空白支架组和对照组之间没有差异(=0.601)。GAM组髓核细胞凋亡率明显低于另外两组(<0.01),空白支架组和对照组之间没有差异(=0.902)。结论利用GAM可以有效的进行GDF-5基因体内转染并表达,从而修复退变椎间盘。(本文来源于《解剖科学进展》期刊2014年03期）
南淑良,申锷,林艳端,白文坤,胡兵[9]（2014）在《低频超声联合SonoVue微泡促进裸鼠基因体内转染的可行性》一文中研究指出目的探讨利用低频超声联合SonoVue微泡造影剂促进基因转染人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤的可行性。方法采用人前列腺癌PC-3细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后随机分为空白组(仅注射生理盐水)、单纯质粒组(注射生理盐水和质粒混悬液)、低频超声组(注射生理盐水和质粒混悬液后超声辐照)和低频超声+微泡组(注射超声微泡造影剂和质粒混悬液后超声辐照)。超声辐照条件:功率3W/cm2,占空比5∶5,频率80kHz,辐照10min。基因转染3天后在激光共聚焦显微镜下观察各组绿色荧光蛋白表达情况,并分析其平均荧光强度;同时行常规病理检查,观察低频超声联合微泡辐照对组织的损伤程度。结果 4组中,仅低频超声+微泡组可见明显绿色荧光,与其他各组差异均有统计学意义(P均<0.05);空白组、单纯质粒组和低频超声组均未见明显绿色荧光。各组均未见明显组织损伤。结论 SonoVue微泡造影剂在低频超声辐照下能够安全有效地促进pEGFP基因转染进入人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤组织内。(本文来源于《中国医学影像技术》期刊2014年04期）
黄琴[10]（2013）在《MRI引导聚焦超声联合载基因微泡靶向开放血脑屏障促进外源基因体内转染》一文中研究指出第一部分MRI引导聚焦超声靶向可逆开放小鼠BBB目的建立MRI引导超声靶向微泡破裂（ultrasound-targeted microbubbledestruction，UTMD)开放小鼠血脑屏障（blood-brain barrier，BBB）的模型，并为后续MRI引导UTMD介导基因体内转染筛选出最优的超声参数。方法将15只昆明小鼠随机分成叁组，分布接受MRI引导1.1MHz聚焦超声联合微泡以1.1W、2.2W、4.4W不同强度辐照小鼠脑部40s，通过靶点MRI增强扫描、伊文氏蓝(EB)染色和HE组织学检查了解不同超声强度下BBB开放的程度、24h后恢复状态和组织学变化，筛选出对脑组织影响最小的超声参数。结果1．MRI增强扫描图像：在超声辐照结束当时及24h两个时间点对鼠脑行增强扫描，结果显示：声功率1.1W组在两时间点均无增强；2.2W组在超声辐照后靶区当即出现明显的小范围增强，在24h后已未见增强；4.4W组在超声辐照后靶区出现明显的大范围增强，且24h后仍可在该区域见片状增强信号，但范围有所减小。2．EB染色：超声辐照后立即行EB染色，声功率1.1W组靶区脑组织未见蓝染，2.2W组和4.4W组均见蓝染，且4.4W组蓝染的程度和范围比2.2W组更为明显，并与辐照后靶点MRI增强扫描结果吻合。3．HE组织学检查：1.1W组靶区脑组织在光镜下未见红细胞渗出和组织损伤，与靶区外组织无明显区别；2.2W组靶区见少量红细胞渗出，但脑实质未见明显异常；4.4W组靶区见红细胞广泛渗出，脑组织液化坏死严重，间质水肿明显。结论MRI引导UTMD能成功可逆、靶向性的开放小鼠BBB，并筛选出最优超声参数为1.1MHz、2.2W、40s，为后续基因转染实验奠定基础。第二部分MRI引导聚焦超声联合载pEGFP-N1微泡跨BBB靶向基因转染研究目的探讨在MRI引导下聚焦超声联合载EGFP微泡跨BBB在脑组织内靶向转染的可行性，并对外源基因表达部位和表达量进行分析。方法通过“层-层”吸附的方式将质粒pEGFP吸附在微泡的表面。将60只小鼠根据处理因素的不同随机分成5组：对照组（Con组）、质粒组（P组）、质粒＋微泡组（P+M组）、质粒＋超声组（P+U组）、质粒＋超声＋微泡组（P+U+M组），分别在各实验组加入相应的处理因素，48h后通过免疫组化和免疫荧光来检测EGFP表达部分，通过RT-PCR和western-blot检测不同处理组EGFP转录和翻译情况。另将90只均接受P+U+M组处理方式的小鼠，根据观察时间点的不同，随机分为9组，分为0h/6h/12h/24h/48h/5d/7d/14d/28d组，通过RT-PCR和western-blot检测不同时间点EGFP转录和翻译情况。结果1．免疫组化：仅P+U+M组靶区能见到若干棕色胞浆的阳性细胞，而该组靶点对侧非超声照射区域及其他各组的脑组织均只能看到蓝染的细胞核。2.免疫荧光：绿色荧光的EGFP与红色荧光的神经元特异性标记物β-Tubulin III在神经元的胞浆内明显共区域化。3. RT-PCR和western-blot：Con组、P组、P+M组均未检测到EGFP,虽然在P+U组检测到少量的EGFP mRNA和蛋白，但不具备统计学意义，而在P+U+M组检测到较高水平EGFP mRNA和蛋白，其表达量分别是是P+U组的15倍和10倍（P<0.01）。EGFP基因的转录和翻译在超声辐照后的6h内发生，且在24h显着增加，在48h到达顶峰，然后逐渐降低，最后在28d时降到很低的水平。结论证实MRI介导UTMD促进外源基因跨BBB靶向转染的可行性，且首次提出转染部位为靶区神经元的胞浆，并具有较高的转录和翻译水平，外源基因的表达量在48h达到高峰，然后逐渐降低。第叁部分MRI引导聚焦超声联合载pEGFP-BDNF微泡跨BBB靶向基因转染及相关机制研究目的探讨MRI介导UTMD促进外源基因pEGFP-BDNF跨BBB在脑组织内靶向转染的可行性，分析该转染过程是否会对内源性BDNF产生影响，并对基因转染的相关过程和机制做初步的探索。方法将31只小鼠根据处理因素的不同，随机分为5组：对照组（Con组）、1组（载pBDNF-EGFP基因微泡组）、2组（载pEGFP基因微泡＋超声组）、3组（微泡＋质粒pBDNF-EGFP＋超声组）、4组（载pBDNF-EGFP基因微泡＋超声组）。每组5只于处理48h后行Western blot检测各组BDNF的含量，4组的另外6只于超声辐照1h后分别行电镜和冰冻切片检测基因转染的相关过程。结果1. Western blot结果显示：在载pBDNF-EGFP微泡＋超声组的小鼠靶区脑组织内BDNF含量最高，是对侧非超声照射区域BDNF含量的20倍（P<0.01），尽管在微泡＋质粒pBDNF-EGFP＋超声组的小鼠脑内检测到轻微BDNF含量的升高，但和对照组相比不具备统计学意义，而在载pBDNF-EGFP微泡＋超声组对侧非超声照射区域、载pBDNF-EGFP基因微泡组和载pEGFP基因微泡＋超声组靶区BDNF含量均较对照组无明显变化。2．冰冻切片在共聚焦显微镜下示：载DNA微泡经PI染色后在微泡表面形成红色的荧光，注入小鼠体内经超声辐照1h后，在对侧非超声照射区域的脑组织内除了看到些少量散在的红色小点外并没有看到明显的红色荧光，而在靶区脑组织内发现PI染色的质粒被吞噬进入许多神经元的胞浆内，呈现出簇状高浓度不均一分布的红色斑点。3.电镜：在靶区脑组织神经元胞浆内见到很多小的透明囊泡样结构，而对侧非超声照射区域的脑组织未见到任何超微结构的改变。结论本研究部分证实MRI引导UTMD能促进外源基因BDNF在靶区高表达，且该方式本身不会造成靶区及周围非超声辐照区域脑组织内源性的BDNF含量的升高。在超声辐照1h后，质粒已以较高的浓度不均一的分布在靶区神经元的胞浆内，且胞浆内见大量囊泡样结构，提示超声辐照后治疗性大分子物质进入神经元很可能是由囊泡介导的胞吞作用，其过程和机制仍需进一步研究，本试验为UTMD介导大分子内摄的体内研究提供了新的证据。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2013-05-01）
体内转染论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨IL-13基因质粒水平基因转移(pIL-13 HGT)缓解柯萨奇病毒B3型(CVB3)诱导BALB/c小鼠急性病毒性心肌炎的机制。方法将BALB/c小鼠分为十二组,每组6～8只。A组为对照;其他组小鼠按照每只10~3半数组织培养感染剂量(TCID_(50))/100μl PBS的病毒量腹腔注射,建立CVB3诱导的急性病毒性心肌炎小鼠模型。B组采用脂多糖(LPS)+IFN-γ治疗;C组采用LPS+IFN-γ+IL-13治疗;D组单用IL-13治疗;E组没有经载体HGT处理;F组经载体HGT空质粒处理;G组经pIL-13HGT治疗;H组不做任何治疗作为阳性对照;四个采用不同IL-13用量(0、0.2、2和20ng/ml)治疗组。采用流式细胞术分析F4/80~+CD206~+巨噬细胞比例和CD206的表达,ELISA法检测各细胞因子表达水平。结果随着IL-13浓度的升高,F4/80~+骨髓巨噬细胞(BMDM)的CD206和IL-10的表达也增加(P<0.05)。B组BMDM的TNF-α、IL-12表达高于A、C和D组(P<0.05),而IL-10表达低于C、D组(P<0.05)。B组的IL-6表达高于A、D组(P<0.05)。G组心脏浸润细胞和脾细胞中F4/80~+CD206~+巨噬细胞比例和F4/80~+巨噬细胞荧光强度高于E、F组(P<0.05)。与F组相比,G组心脏组织和脾脏组织中TNF-α表达降低(P<0.05),而IL-10表达增加(P<0.05)。E组心脏浸润细胞中CD3~+CD4~+T细胞比例高于F、G组(P<0.05)。G组心脏浸润细胞中F4/80~+巨噬细胞比例高于E、F组(P<0.05)。G组血清中IFN-γ表达低于E、F组,而IL-4表达高于E、F和H组(P<0.05)。E、F组血清中Th1细胞的比例高于G、H组(P<0.05)。结论 IL-13在CVB3诱导的病毒性心肌炎中起保护性作用,而M2型巨噬细胞和Th2应答可能均参与了这一过程。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体内转染论文参考文献
[1].黄悦,兰江,胡蓉,高杰,李红.体内转染血管内皮生长因子基因对慢性低氧诱导小鼠肺动脉高压的影响[J].解剖学报.2018
[2].韩秀江,高晟,徐新建.pIL-13体内转染对病毒性心肌炎模型小鼠的保护作用及其机制[J].江苏医药.2018
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[8].梁峰,贾长青,谭树森,刘振宁.GDF-5基因活化基质体内转染修复兔退变椎间盘的实验研究[J].解剖科学进展.2014
[9].南淑良,申锷,林艳端,白文坤,胡兵.低频超声联合SonoVue微泡促进裸鼠基因体内转染的可行性[J].中国医学影像技术.2014
[10].黄琴.MRI引导聚焦超声联合载基因微泡靶向开放血脑屏障促进外源基因体内转染[D].重庆医科大学.2013