基于ISSR分子标记的蜡梅遗传多样性研究

论文摘要

蜡梅为我国特产的优良冬季香花树种,分布广,栽培历史悠久,品种繁多。本文采用形态特征和ISSR分子标记对29个蜡梅品种材料进行了蜡梅花部表型多样性和遗传多样性分析,旨在为蜡梅品种选育、蜡梅品种分类、系统与进化生物学研究提供理论基础。主要研究结果如下:1.对29份蜡梅材料进行了花部形态特征的观察记载,从中选取11个性状进行主成分分析,得出“中被片长度”、“内被片紫纹”、“花径”、“花色”是蜡梅品种分类中的重要的特征因子。对蜡梅ISSR反应体系进行了优化,建立了适合蜡梅ISSR扩增的体系和程序。该反应体系（总体积为20μl）如下:10×扩增缓冲液2μl（Tris-Cl 200mmol/L PH 8.3, KCl 500mmol/L, 0.5%Triton-X 100）,1.6μl Mg2+ （25mmol/L）,0.6μl dNTPs （dATP、dCTP、dGTP、dTTP各10mmol/L）,10umol/L引物2.0μl,1.5 UTaq聚合酶,DNA模板约30 ng。扩增反应程序为:94℃预变性5min,再进入38个PCR循环（94℃变性1 min,52～59℃退火1 min,72℃延伸1 min）,最后72℃延伸10 min,4℃保存。扩增产物用2%琼脂糖凝胶进行电泳分析。3.应用10个ISSR引物对29份蜡梅材料进行了ISSR扩增,获得了75条可统计的条带,其中多态性条带38条,多态性条带比率为50.7%。平均观测等位基因数为1.5325,平均有效等位数为1.2956,平均Nei’s基因多样性指数为0.1873,平均Shannon信息指数0.2321遗传多样性水平较高。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• 引言
• 第一章 文献综述
• 1.1 蜡梅研究概况
• 1.1.1 种质资源分布及群落生态学研究
• 1.1.2 蜡梅繁殖研究
• 1.1.3 孢粉学及传粉生物学研究
• 1.1.4 花芽分化
• 1.1.5 成分分析
• 1.1.6 分子水平研究
• 1.1.7 应用研究
• 1.2 蜡梅品种分类研究现状
• 1.2.1 我国花卉品种分类现状
• 1.2.2 我国蜡梅品种分类概况
• 第二章 蜡梅花部表现型多样性研究
• 1 蜡梅品种分类的主要形态依据
• 1.1 花色（特指中、外花被片颜色）
• 1.2 内被片颜色
• 1.3 花径
• 1.4 花型
• 1.5 花期
• 1.6 中被片形状
• 1.7 花被片数
• 2. 材料
• 3 试验方法
• 3.1 花部性状的选取与编码
• 3.2 性状记载
• 4 结果与分析
• 4.1 表型标记聚类分析
• 4.2 主成分分析
• 5. 讨论
• 第三章 基于 ISSR 标记的蜡梅遗传多样性研究
• 1 蜡梅 ISSR-PCR 反应体系的优化
• 1.1 材料及试剂
• 1.2 方法
• 1.3 结果与分析:
• 1.3.1 DNA 提取结果与检测
• 1.3.2 退火温度的确定
• 1.3.3 数据处理与表观分析
• 1.3.4 影响 ISSR—PCR 反应因素的差异显著性
• 1.4 讨论
• 2 29 份蜡梅材料的 ISSR 标记研究
• 2.1 试验材料
• 2.2 实验方法
• 2.3 结果与分析
• 参考文献
• 附表
• 英文摘要