论文摘要
目的:探讨在乳腺癌细胞中,去甲基化药物5-氮杂脱氧胞苷对雌激素受体α（estrogen receptor alpha, ERα）基因,上皮性钙粘连素（E-cadherin, E-cad）基因表达的影响,及其对细胞增殖和侵袭能力的影响,为乳腺癌的基因治疗提供一定的指导意义。方法:（1）使用去甲基化药物5-氮杂脱氧胞苷处理MDA-MB-231细胞,利用细胞生长曲线、MTT法及流式细胞仪检测5-氮杂脱氧胞苷对MDA-MB-231细胞增殖和周期的影响;（2）通过RT-PCR和免疫组化检测5-氮杂脱氧胞苷对ERα阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231 ERα、E-cad及基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）表达的影响;（3）通过Boyden小室侵袭实验检测5-氮杂脱氧胞苷对乳腺癌细胞浸润能力的影响;（4）用限制性酶PCR检测5-氮杂脱氧胞苷作用前后的乳腺癌细胞中ERα基因启动子及第一外显子区域的甲基化情况。结果:（1）5-氮杂脱氧胞苷能使MDA-MB-231细胞的生长速度明显减慢,细胞周期被阻滞在G0/G1期;（2）5-氮杂脱氧胞苷部分恢复ERα阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞ERα及E-cad基因的表达;（3）5-氮杂脱氧胞苷使MDA-MB-231细胞中MMP-2基因表达下降,及该细胞的侵袭能力降低;（4）MDA-MB-231细胞ERα基因中检测到HpaⅡ甲基化位点,5-氮杂脱氧胞苷作用后未检测到甲基化位点。结论:（1）5-氮杂脱氧胞苷可有效抑制乳腺癌细胞生长并导致细胞周期的阻滞,以及明显降低乳腺癌细胞的侵袭能力;（2）5-氮杂脱氧胞苷可以部分的去甲基化和恢复ERα的表达;（3）利用5-氮杂脱氧胞苷可部分恢复ERα和E-cad的表达及降低MMP-2的表达,这可能为其引起乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为改变的机制之一。