绢丝昆虫柳蚕血液羧酸酯酶活力影响因素的研究

论文摘要

羧酸酯酶（carboxylesterase）是一类催化水解羧酸酯生成羧酸和乙醇的非特异性酯酶,参与多种药物、环境毒物和致癌物的解毒,以及脂质的运输和代谢,它能够与进入昆虫体内的有机磷杀虫剂快速结合,将杀虫剂在到达靶标作用位点之前阻隔或降解,使其无法发挥原有的杀伤效用,保护昆虫免受杀虫剂的毒害,产生抗性。柳蚕（Actias selene Hubner）是一种野生绢丝昆虫,属鳞翅目（Lepidoptera）,大蚕蛾科（Saturniidae）。国内外对其研究较少,大部分都是关于形态学和生活习性方面的报道和记载,而柳蚕生理代谢功能等方面的研究报道较少。本论文主要探讨了酶量、时间、温度、pH值等不同因素对柳蚕血液中的羧酸酯酶活性的影响以及不同龄期羧酸酯酶活力的分布情况。研究结果表明:羧酸酯酶活力随着酶量的增加而不断上升,30μl的酶液的比活力最高;羧酸酯酶活力将达到最大值的最适条件为44℃,反应时间30min;定量酶与同等量底物反应最适合时间是30min:柳蚕羧酸酯酶活力的最适pH为9.0:柳蚕羧酸酯酶活力在各龄期的分布规律为:各龄中期要比龄初和龄末高,而眠期要比眠后高;而羧酸酯酶活力在柳蚕盛食期达到最高,即5龄第6天酶活力最高,另外五龄酶活力整体高于四龄。几种杀虫剂对羧酸酯酶的活性具有不同程度的抑制,抑制作用最弱的为敌杀死,最强的是虫杀净。家蚕与柳蚕的影响因子曲线的决定系数R2的相关程度都非常高,结果是柳蚕R2高于家蚕R2;从其公式的-b/2a算出的各因子酶活最适值基本上相近。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 羧酸酯酶的研究进展
• 1.2 羧酸酯酶结构的特点
• 1.3 羧酸酯酶的性质及其抑制剂
• 1.4 羧酸酯酶的作用机理
• 1.5 羧酸酯酶的组织分布
• 1.6 羧酸酯酶的分类和命名
• 1.7 羧酸酯酶反应底物
• 1.7.1 羧酯类化合物
• 1.7.2 硫酯类化合物
• 1.7.3 酰胺类化合物
• 1.8 羧酸酯酶的分子生物学研究
• 1.9 羧酸酯酶的研究目的及意义
• 1.10 羧酸酯酶活性研究的基本技术路线
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 仪器
• 2.3 试剂
• 2.4 溶液的配制
• 2.5 酶液的制备
• 2.6 标准曲线的建立
• 2.7 杀虫剂离体抑制实验
• 2.8 CarE活性测定
• 3 结果与分析
• 3.1 标准曲线的建立
• 3.2 酶量对羧羧酸酯酶活力的影响
• 3.3 温度对羧酸酯酶活力的影响
• 3.4 时间对羧酸酯酶活力的影响
• 3.5 pH值对羧酸酯酶活力的影响
• 3.6 柳蚕各龄期羧酸酯酶活力的分布
• 3.7 杀虫剂对柳蚕羧酸酯酶活力的抑制
• 3.8 家蚕与柳蚕羧酸酯酶活力因子的比较
• 4 讨论
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介