论文摘要
本文用划线分离的方法将天然胶乳中的细菌分离出来,并通过所分离细菌的培养液pH值的不同进行初筛,筛选出培养液显酸性的菌株,再根据对新鲜天然胶乳凝固的效果进行复筛,筛选出能够快速凝固新鲜天然胶乳,并且凝固效果较好的菌株。通过生理生化特性与16SrDNA同源性分析对所筛选细菌进行分类鉴定。考察单菌种微生物凝固天然橡胶的生胶（NR-m1、NR-m2、NR-m3）和硫化胶（NR-m4、NR-m5、NR-m6）与酸凝固天然橡胶的生胶（NR-a）和硫化胶（NR-b）性能的差异。探讨单菌种微生物凝固工艺及其工艺因素,并且通过Zeta电位-粒度分析仪对天然胶乳凝固过程中的橡胶粒子粒径与Zeta电位的变化进行了研究。实验结果如下：细菌的筛选与鉴定：从天然胶乳中分离出106株细菌,通过初筛,得到16株发酵液pH小于7的菌株,再通过复筛实验,得到3株能够在10h以内使天然胶乳完全凝固的细菌,而且凝块具有臭味小,发胀不明显等特点,凝固效果理想。将此三株细菌分别命名为NRC1、NRC2与NRC3。通过生理生化特性与16SrDNA同源性分析对其进行分类鉴定。结果显示：NRC1与NRC3为克雷伯氏菌属（Klebsiella）, NRC2为变形杆菌属（Proteus）,均属于肠杆菌科。单菌种微生物凝固胶和酸醋酸凝固胶性能对比：NR-m1、NR-m2和NR-m3挥发物含量、杂质含量、灰分含量和氮含量都较低,P0较大,PRI稍低于NR-a; NR-m4、NR-m5和NR-m6的物理机械性能较好,硫化时间短,硫化速度快,硬度略高,拉伸强度与撕裂强度都明显高于NR-b。三种不同单菌种微生物凝固工艺所制备的天然橡胶生胶和硫化胶的各项性能相比较,差别不是很大,且机械性能总体比醋酸凝固工艺的要好,说明筛选出的细菌对性能都有一定的改善作用,且细菌菌种的不同对性能没有明显的影响。单菌种微生物凝固工艺因素的探讨：单菌种微生物凝固工艺中,主要起作用的有葡萄糖、单菌种生物凝固液（SNRCL）以及十二烷基磺酸钠（SDS）。对凝固时间有影响的因素包括葡萄糖的加入量、细菌培养时间、鲜胶乳的干胶含量、SDS的加入量以及SNRCL的加液量。实验表明,葡萄糖的加入量应控制在0.6g～2.0g/100mL胶乳之间；在制备SNRCL时,细菌的培养时间应该控制在72-96h；待凝固的鲜胶乳不需要进行加水稀释,而且干胶含量应大于21%；SDS的加入量应控制在0.4%-0.8%（以干胶计）之间；最适宜的SNRCL的加液量应控制在鲜胶乳体积的15%-20%之间。凝固过程中橡胶粒子粒径与Zeta电位的变化：葡萄糖、SNRCL与SDS对胶乳稳定性的下降都有作用；SDS主要是通过降低橡胶粒子Zeta电位的绝对值,从而使胶乳的稳定性下降；SNRCL是通过降低橡胶粒子Zeta电位的绝对值,即降低橡胶粒子表面双电层的厚度与促进橡胶粒子碰撞粘合而使粒径增大两方面作用来降低胶乳的稳定性,促进胶乳的凝固；葡萄糖可增强SNRCL对橡胶粒子的作用。而且随着时间的增加,橡胶粒子的Zeta电位绝对值呈现出先减小后增大的趋势,粒径也呈现出先增大后减小的趋势,说明制约天然胶乳凝固完全的是剩余的部分稳定性较大的橡胶粒子。SNRCL浓缩液对天然胶乳凝固的影响：影响天然胶乳凝固时间进一步缩短的制约因素不仅是细菌量,还有SNRCL中的非细菌物质。