论文摘要
在早期断奶仔猪日粮中分别添加氧化锌(3000mg.kg-1)、蛋氨酸锌(500 mg.kg-1),研究高锌日粮长期暴露对断奶仔猪生长性能、细胞免疫、体液免疫、肠黏膜免疫以及血清和免疫器官中铜、铁、锌沉积的影响,探讨高锌日粮应用的免疫安全性。选用60头23±2日龄“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪,按体重和性别随机分成3组,每组20头。Ⅰ组(对照组)仔猪饲喂基础日粮;Ⅱ组仔猪饲喂基础日粮+3000mg.kg-1氧化锌(ZnO);Ⅲ组仔猪饲喂基础日粮+500mg.kg-1蛋氨酸锌(Zn-Met)。进行为期70d的试验。所有试验猪均于断奶后0、21、42、70 d空腹称重,计算采食量。同时于断奶后0、21、42、70 d,经前腔静脉采血用于测定免疫球蛋白(IgG,IgA和IgM)水平、淋巴细胞转化率及白细胞吞噬率以及血清中铜、铁、锌含量。3组仔猪均于断奶后70 d,各剖杀5只仔猪,共剖杀15只仔猪,在十二指肠近端、空肠前端1/4处、空肠后端1/4处和回肠中段剪取约1cm的肠管,迅速放入备用的10%福尔马林固定液中,待做组织切片,测量仔猪肠黏膜绒毛高度、绒毛宽度、粘液层厚度、隐窝深度和小肠间淋巴细胞和杯状细胞数量,另取空肠起始端到回盲括约肌肠管,收集小肠粘液,用于测定粘液中IgA的含量。结果表明:(1)高锌日粮长期暴露可显著降低断奶仔猪的生长性能在断奶后的21、42d,Ⅱ、Ⅲ组仔猪体重显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01),但试验结束时,3组仔猪体重没有显著差异(P>0.05)。断奶后0~21d,处理组仔猪平均日增重极显著高于对照组仔猪(P<0.01);断奶后21~42d,处理组仔猪平均日增重显著高于对照组仔猪(P<0.05);断奶后42~70d,处理组仔猪的平均日增重显著低于对照组仔猪(P<0.05)。在整个试验期内,Ⅱ、Ⅲ组仔猪的体重和平均日增重差异均不显著(P>0.05)。(2)高锌日粮长期暴露能显著提高断奶仔猪的免疫器官指数处理组仔猪脾脏和胸腺指数均极显著地高于对照组(P<0.01);Ⅱ、Ⅲ组之间脾脏指数有显著差异(P<0.05),而胸腺指数差异不显著(P>0.05)。(3)高锌日粮长期暴露显著降低断奶仔猪T-淋巴细胞转化率与断奶时相比,对照组仔猪T-淋巴细胞转化率在断奶后21d显著下降(P<0.05),在断奶后42、70d极显著升高(P<0.01);Ⅱ、Ⅲ组仔猪T-淋巴细胞转化率在断奶后21d显著升高(P<0.05),而在断奶后70d却极显著降低(P<0.01)。在整个试验过程中,Ⅱ、Ⅲ组仔猪T-淋巴细胞转化率无显著差异(P>0.05)。(4)高锌日粮长期暴露显著降低断奶仔猪白细胞吞噬率与断奶时相比,在断奶后21d,对照组仔猪白细胞吞噬率极显著降低(P<0.01),至断奶后42d又恢复到断奶时水平。在断奶后21d,Ⅱ、Ⅲ组仔猪的白细胞吞噬率显著地高于断奶时水平(P<0.05),而在断奶后42、70d均极显著降低(P<0.01)。(5)高锌日粮长期暴露可显著降低断奶仔猪的免疫球蛋白水平与断奶时相比,在断奶后的21d,3组仔猪血清中IgG和IgA水平都有所降低,但是对照组下降幅度最大,达到极显著水平。在断奶42d,对照组IgG和IgA水平回复到断奶时的水平,而试验组仔猪血清IgG和IgA继续降低。(6)高锌日粮长期暴露对仔猪小肠各段肠黏膜形态、上皮间淋巴细胞数量、杯状细胞数量均有显著或极显著影响(P<0.05或P<0.01)Ⅱ、Ⅲ组仔猪的小肠黏膜结构有明显的损伤,表现为绒毛高度下降,隐窝变深,肠黏膜上皮细胞萎缩,肠道粘液层厚度变薄。Ⅱ、Ⅲ组仔猪上皮间淋巴细胞数、杯状细胞数和肠道粘液中IgA水平都显著或极显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。(7)高锌日粮长期暴露对断奶仔猪血清及免疫器官微量元素铜、铁、锌的沉积有显著影响①高锌日粮对断奶仔猪血清铜、铁、锌水平有显著影响在试验的前期,3组仔猪血清铜和铁水平差异不显著,但是到试验后期,试验组仔猪血清铜和铁水平显著或极显著地低于对照组。整个试验期内,试验组仔猪血清锌水平都显著或极显著地高于对照组。②高锌日粮对断奶仔猪免疫器官中铜、铁、锌水平有显著影响与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ组仔猪胸腺和脾脏铜水平显著或极显著地降低(P<0.05或P<0.01)。Ⅱ、Ⅲ组仔猪胸腺铁水平极显著地高于Ⅰ组(P<0.01),而脾脏铁水平极显著地低于Ⅰ组(P<0.01)。Ⅱ、Ⅲ组仔猪胸腺和脾脏锌水平显著或极显著地高于Ⅰ组(P<0.05或P<0.01)。Ⅱ、Ⅲ组仔猪各段肠管中微量元素铜、铁、锌的沉积量均显著或极显著地高于Ⅰ组(P<0.05或P<0.01)。试验结果显示,饲喂高锌日粮的仔猪在断奶后6到10周出现严重的中毒反应,机体免疫系统遭到损害。由本试验结果可得出,在日粮中添加500mg·kg-1Zn-Met和3000mg·kg-1ZnO的最佳添加时间为3周。