论文摘要
目的:通过对佛手散不同提取部位给药血清指纹图谱建立及其药效学的研究,筛选佛手散活血有效部位。方法:首先采用超临界C02萃取(SFE)佛手散得SFE部位,其药渣醇提后经大孔吸附树脂柱分离为几个不同的醇洗脱部位(EE20部位、EE40部位、EE60部位和EE95部位)。GC/MS测定SFE部位指纹图谱;HPLC测定不同醇洗脱部位的指纹图谱。将不同提取部位分别给小鼠灌胃,腹腔注射异丙肾上腺素(Iso)致小鼠急性心肌缺血,测定动物给药前后心电图的S—T段的偏移值,并取血测定红细胞膜的流动性。将不同提取部位给新西兰大白兔灌胃后,不同时间点采集血清,建立含药血清HPLC指纹图谱,结合抗心肌缺血的药效学研究筛选出佛手散中活血的有效部位。结果:通过不同提取部位给药前后血清HPLC指纹图谱的比较,发现EE20组、EE40组、EE60组和SFE组给药血清与空白血清指纹图谱有差异,比较给药前后血清HPLC指纹图谱的欧氏距离的变化,可以发现EE20组和EE40组吸收速度最快。通过不同提取部位抗心肌缺血的药效学研究发现,与模型对照组相比,EE20组和EE40组的荧光偏振度P降低,有显著性差异(P<0.05,P<0.01),对于S—T段偏移值的影响,在5min时EE20组和SFE组有显著性差异(P<0.01,P<0.05);在10min时EE20组有非常显著性差异(P<0.01),EE40组和SFE组有显著性差异(P<0.05);在20min时EE20组和SFE组有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论:EE20组、EE40组和SFE组可拮抗Iso引起的AS—T段升高,可使小鼠升高的AS—T段明显降低,能够保护心肌细胞,起到抗急性心肌缺血的作用,增加细胞的抗缺血缺氧能力;通过红细胞膜流动性实验发现,EE20组、EE40组也可代偿性增强膜的流动性,改善急性缺血期的能量代谢障碍的状态,防止心肌的进一步坏死。对不同提取部位给药前后血清HPLC指纹图谱研究,将有助于快速发现中药的药效部位,使中药中活性成分的发现概率增加、周期缩短。