论文摘要
研究目的1．检测COX-2、PCNA、BCL-2在宫颈癌化疗前后的表达。2．分析COX-2、PCNA、BCL-2与治疗反应的关系，评价其作为宫颈癌化疗敏感性指标的可能性。3．研究选择性COX-2抑制剂SIN对宫颈癌细胞生长的影响及其与卡铂联合对宫颈癌细胞的协同抑制作用，初步探讨选择性COX-2抑制剂在宫颈癌中的作用机制。实验方法1．收集31例Ⅰb期-Ⅱb期（肿瘤直径≥4cm）宫颈癌患者新辅助化疗（经静脉全身给药）前及手术后的宫颈癌组织（包括新鲜组织及石蜡块），采用免疫组织化学S-P法检测新辅助化疗前后宫颈癌组织中COX-2、PCNA、BCL-2的表达，统计学分析化疗前后各指标的表达差异及COX-2与PCNA、BCL-2表达的相关性。2．收集宫颈癌患者临床资料，分析化疗前后COX-2、PCNA、BCL-2的表达变化与化疗效果的关系。3．MTT法检测选择性COX-2抑制剂SIN对宫颈癌细胞生长的影响，及其与卡铂联合对宫颈癌细胞生长的影响。4．流氏细胞仪检测SIN及其与卡铂联合处理后宫颈癌细胞周期及凋亡的变化。实验结果1．NACT后，临床完全缓解9.7％（3／31），部分缓解54.8％（17／31），总的临床有效率为64.5％，临床稳定无进展35.5％。2．COX-2、PCNA、BCL-2在宫颈癌化疗前后组织中的表达31例宫颈癌患者化疗后组织中COX-2、PCNA的表达较化疗前表达明显下降，而BCL-2的表达较化疗前无明显下降。3．不同临床疗效NACT前后宫颈癌组织中COX-2、BCL-2、PCNA表达变化的比较。临床完全缓解组（CR）和部分缓解组（PR）NACT后COX-2及PCNA的表达显著下降（P＜0.05），而BCL-2无明显下降（P＞0.05），临床稳定无进展组（SD）NACT前后COX-2、PCNA及BCL-2的表达均无明显变化（P＞0.05）。4．COX-2与PCNA、BCL-2表达的相关性COX-2与PCNA、BCL-2的表达均呈明显正相关（P＜0.05）。5．选择性COX-2抑制剂SIN对宫颈癌细胞生长的影响SIN以时间和剂量依赖性特点抑制宫颈癌细胞的增殖，SIN与卡铂联合对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制具有协同作用。6．流氏细胞仪检测SIN及其与卡铂联合处理后宫颈癌细胞周期及凋亡的变化流式细胞仪细胞周期分析表明，SIN处理组G1期细胞比例明显增加，S期细胞比例明显减少；卡铂处理组G1期细胞比例明显降低，而S期细胞比例明显增加；两药联合处理组G1期细胞比例较SIN处理组低，较卡铂处理组高，S期细胞比例较SIN处理组高，较卡铂处理组低。细胞凋亡分析表明，SIN处理组细胞凋亡率较对照组升高，呈时间和剂量依赖性特点；卡铂处理组细胞凋亡率较对照组也升高；两药联合处理组细胞凋亡率较单药处理组高。结论1．COX-2、PCNA在宫颈癌化疗后表达明显降低，且与宫颈癌化疗效果相关，提示COX-2、PCNA可能作为评价宫颈癌患者对化疗的敏感性的指标。2．COX-2与PCNA、BCL-2的表达呈明显正相关，提示COX-2可能通过促进宫颈癌细胞的增殖、抑制其凋亡从而促进宫颈癌的发展。3．选择性COX-2抑制剂SIN以时间和剂量依赖性抑制宫颈癌细胞的增殖，其作用机制与改变细胞周期分布、促进细胞凋亡有关。4．选择性COX-2抑制剂SIN与卡铂联合对宫颈癌细胞的抑制作用明显增强，提示SIN与卡铂联合对宫颈癌细胞的增殖抑制产生协同作用，其机制可能与共同影响细胞周期分布、促进细胞凋亡有关。