不同蛋白质水平日粮对湖羊肽—氨基酸利用的影响

论文摘要

本实验借助瘤胃、十二指肠造瘘,肠系膜静脉、门静脉、颈动脉血插管技术,研究四种蛋白质水平(8.4%(A)、11.2%(B)、14.0%(C)、16.8%(D))日粮下,湖羊体内肽的释放特点及肽氨基酸占总氨基酸的比例(PAA/TAA)。利用液质联用技术测定肽分子量,分析肽释放的种类和比例的动态变化。研究的主要结果如下:1.本试验四种蛋白质水平日粮对湖羊瘤胃液pH值有显著影响,pH值随着蛋白质水平的升高而升高。四组日粮的平均pH值分别为6.28、6.39、6.40、6.49,D组显著高于A组(P<0.05)。各组pH值都在采食后开始下降,4h后降至最低,随后开始回升。十二指肠食糜中,各组pH值变化趋势相近,均在采食后开始上升,然后下降再上升。四组的平均值分别为2.89、2.95、3.04和3.22,D组显著高于A组(P<0.05)。2.瘤胃液氨氮浓度呈现了随蛋白质水平升高而升高的趋势,四组在采食后开始上升,食后4h达到峰值。十二指肠中,四组氨氮浓度的平均值分别为7.37、8.60、8.63、11.26 mg/100mL,A组与C、D组差异极显著(P<0.01),与B组差异显著(P<0.05);B组与D组差异显著(P<0.05)。3.瘤胃液中的菌体蛋白随蛋白质水平升高而升高。四组平均值分别为4.18、4.98、5.14、5.24mgN/100mL,A组与B、C、D三组差异显著(P<0.05)。4.瘤胃液中,FAA浓度随蛋白质水平的升高而升高,A组FAA最低,C组最高, C组显著高于A组(P<0.05)。四组PAA浓度分别为10.52、10.70、14.04和14.96mg/100mL,同样呈现随蛋白质水平升高而升高的趋势,D组最高,极显著高于A、B组(P<0.01),显著高于C组P<0.05);C组显著高于A、B组(P<0.05)。十二指肠液中,FAA浓度以A组最低,D组最高,D组显著高于A组(P<0.05),与B、C组差异不显著。PAA浓度在采食后4h达到峰值,四组PAA浓度中,D组最高(14.28 mg/100mL),A组最低;C、D组显著高于A、B组(P<0.05)。5.肠系膜静脉中,FAA和PAA浓度在采食后4h达到峰值,随后开始下降,随着蛋白质水平的升高而升高。6.门静脉中,FAA的变化趋势与肠系膜中的基本一致,都在4h时达到峰值,随后降低。四组的平均值以D组最高,A组最低, D组显著高于A组(P<0.05),与B、C组差异不显著。各组PAA浓度平均值比较,C、D组显著高于A组(P<0.05)。7.动脉中,各组FAA浓度相差不大,差异不显著。PAA浓度随着蛋白质水平的升高而升高,各组平均值分别为:28.86、29.96、31.45、33.37mg/100mL, D组显著高于A组(P<0.05)。8.肠系膜静脉和门静脉的PAA/TAA变化范围在70%～80%之间,颈动脉和消化道中的PAA/TAA变化范围在60%～70%之间。9.日粮蛋白质水平对MDV和PDV组织PAA净流量有显著影响,PDV组织存在明显的PAA净流量。10.从相关性分析来看,门静脉血浆PAA浓度与瘤胃液PAA浓度有显著相关性。C组菌体蛋白与瘤胃液PAA有显著正相关(r=0.999)。11.不同蛋白质水平日粮在湖羊胃肠道及血液中的小肽的种类和数量不同,肽分子量(m/z)分布在100～500之间,以200～399的为主。日粮蛋白质水平对肽的含量分布影响较小。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 文献综述
• 1 小肽的吸收机制及途径
• 2 瘤胃微生物对肽降解及蛋白质分解的影响
• 3 影响肽吸收的因素
• 4 血液中肽的来源
• 5 肽在反刍动物中的营养作用
• 6 本论文研究的意义及内容
• 试验研究
• 试验一 不同蛋白质水平日粮对湖羊胃肠道内游离氨基酸和肽氨基酸的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验动物
• 1.2 试验日粮与饲养管理
• 1.3 试验设计
• 1.4 瘤胃液、十二指肠液的采集
• 1.5 测定指标与分析方法
• 1.6 计算方法与统计分析
• 2 结果与分析
• 2.1 日粮蛋白水平对湖羊消化道pH 值的影响
• 2.1.1 日粮蛋白质水平对瘤胃液pH 值的影响
• 2.1.2 日粮蛋白质水平对十二指肠食糜pH 值的影响
• 2.2 日粮蛋白质水平对湖羊消化道氨态氮浓度的影响
• 2.2.1 日粮蛋白质水平对瘤胃液氨态氮浓度随的影响
• 2.2.2 日粮蛋白质水平对十二指肠食糜氨态氮浓度的影响
• 2.3 日粮蛋白质水平对瘤胃微生物蛋白氮的影响
• 2.4 日粮蛋白质水平对湖羊游离氨基酸和肽氨基酸的影响
• 2.4.1 瘤胃液游离氨基酸（FAA）和肽氨基酸（PAA）的变化
• 2.4.2 十二指肠食糜游离氨基酸（FAA）和肽氨基酸（PAA）的变化
• 2.4.3 瘤胃液和十二指肠食糜中FAA/TAA、PAA/TAA 的变化
• 3 讨论
• 3.1 日粮蛋白质水平对湖羊消化道pH 值的影响
• 3.2 日粮蛋白质水平对湖羊消化道氨氮浓度的影响
• 3.3 日粮蛋白质水平对湖羊瘤胃菌体蛋白的影响
• 3.4 日粮蛋白质水平对湖羊消化道游离氨基酸和肽氨基酸的影响
• 4 小结
• 试验二 不同蛋白质水平日粮对湖羊 MDV、PDV 中游离氨基酸和肽氨基酸净流量的影响
• 1 材料和方法
• 1.1 试验动物
• 1.2 试验日粮同试验一
• 1.3 试验设计
• 1.4 试验方案
• 1.5 样品的处理与分析
• 1.5.1 肽氨基酸的测定
• 1.5.2 样品预处理
• 1.5.3 游离氨基酸（FAA）的测定
• 1.5.4 总氨基酸（FAA）的测定
• 1.5.5 色谱条件
• 1.5.6 PAH 的分析测定
• 1.5.7 指标计算与数据处理
• 1.6 统计分析
• 2 结果与分析
• 2.1 日粮蛋白质水平对肠系膜静脉血浆中FAA 和PAA 的影响
• 2.2 日粮蛋白质水平对门静脉血浆中FAA 和PAA 的影响
• 2.3 日粮蛋白质水平对颈动脉血浆中FAA 和PAA 的影响
• 2.4 日粮蛋白质水平对MAV、PDV 组织游离氨基酸和肽氨基酸净流量的影响
• 2.5 胃肠道食糜及血浆FAA/TAAP、AA/TAA 的比较
• 2.6 血液与消化道内各指标的相关性分析
• 2.6.1 瘤胃液菌体蛋白与胃肠道及血浆中PAA 的相关性
• 2.6.2 门静脉PAA 与其它部位PAA 的相关性
• 3 讨论
• 3.1 日粮蛋白质水平对湖羊FAA、PAA 和PAA/TAA 的影响
• 3.2 日粮蛋白质水平对湖羊 MDV、PDV 组织游离氨基酸和肽氨基酸净流量的影响
• 4 小结
• 试验三 不同蛋白质水平日粮对湖羊消化道及血液中寡肽的影响
• 1 材料和方法
• 1.1 试验动物
• 1.2 试验日粮
• 1.3 样品采集
• 1.4 样品预处理
• 1.5 主要试剂
• 1.6 液质联用分析
• 1.7 数据统计
• 2 结果与分析
• 2.1 寡肽分子质量的测定
• 2.2 日粮蛋白质水平对消化道寡肽含量的影响
• 2.2.1 日粮蛋白质水平对瘤胃液寡肽含量的影响
• 2.2.2 日粮蛋白质水平对湖羊十二指肠食糜寡肽含量的影响
• 2.3 日粮蛋白质水平对血浆寡肽含量的影响
• 2.3.1 肠系膜静脉寡肽含量的变化
• 2.3.2 门静脉寡肽含量的变化
• 2.3.3 颈动脉寡肽含量的变化
• 2.4 不同蛋白质水平日粮下各部位寡肽的分子量范围
• 3 讨论
• 4 小结
• 结论
• 创新点
• 有待解决的问题
• 参考文献
• 附图:血液各肽峰保留时间对应的质谱图
• 附表:不同蛋白质水平日粮下各时间点各部位寡肽的峰面积百分含量（%Area）
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文