论文摘要
肾结石是一种临床常见疾病,结石的主要成份为草酸钙。现代医学认为尿液中草酸钙结晶的成核、生长、聚集及对肾小管上皮细胞的黏附在肾结石的形成过程中起重要作用。研究发现尿液中含有多种抑制草酸钙结晶形成的大分子物质,骨桥蛋白（osteopontin,OPN）是其中一种代表性的蛋白质。夏枯草是一种有效治疗尿石症的传统中草药,但其具体作用机制尚不清楚,在本研究中我们探讨了夏枯草不同提取物对草酸钙结晶形成的体外和体内影响,并研究夏枯草提取物对大鼠肾组织OPN表达的影响。目的:探讨中药夏枯草不同提取物体外抑制尿草酸钙结石形成的效应以及体内对大鼠尿草酸钙结石形成的影响;并研究夏枯草提取物对大鼠OPN表达的影响,初步探讨夏枯草抑制尿草酸钙结石形成的机制。方法:体外实验采用种晶技术检测不同浓度(10和20mg·ml-1)夏枯草水溶性提取物（C1、C2组）、50%甲醇提取物（D1、D2组）和100%甲醇提取物（E1、E2组）对体外一水草酸钙晶体生长的抑制指数。40只Wistar大鼠随机分为5组（每组8只）,采用乙二醇和氯化铵诱导的大鼠肾草酸钙结石模型进行试验研究。对照组（A组）、成石组（B组）、夏枯草水溶性提取物组（C组）、50%甲醇提取物组（D组）、100%甲醇提取物组（E组）,分别通过灌胃方式予一定剂量的夏枯草不同提取物。饲养4周后,检测各组大鼠血BUN、Cr,24h尿草酸（Ox）、Ca2+分泌量和肾组织Ca2+含量。镜下观察肾组织切片中草酸钙结晶及肾小管扩张情况,检测各组大鼠肾组织病理学改变和草酸钙结晶沉积情况,并采用原位杂交和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别观察各组大鼠肾组织中OPN mRNA表达,免疫组织化学和蛋白质印迹（Western blotting）检测各组大鼠肾组织OPN蛋白的表达水平。结果:体外实验显示夏枯草不同提取液体外对草酸钙结晶的抑制影响随药物浓度增加,其对草酸钙结晶生长的抑制作用也增强,且组间差异具有统计学意义（P＜0.05）。在相同药物浓度条件下,夏枯草水提取物和50%甲醇提取物对草酸钙结晶生长的抑制作用较强,而100%甲醇提取组的抑制作用相对较低。动物实验显示A组大鼠血BUN、Cr明显低于其他各组,差别有显著性意义（P＜0.05）,各组间血Ca2+、P浓度则无明显差异;24h尿Ox、Ca2+分泌量各夏枯草实验组与B组无明显差异（P＞0.05）;C、D组肾组织Ca2+含量明显低于B组,差别有显著性意义（P＜0.05）。A组肾小管正常,B组肾小管腔可见大量成片草酸钙结晶存在,管腔明显扩张;C组肾小管腔可见散在草酸钙结晶存在,少数呈片状,管腔轻度扩张;D组肾小管腔仅见少许散在草酸钙结晶存在,管腔未见明显扩张;E组基本同B组。原位杂交显示OPN mRNA主要在肾近曲小管和远曲小管,亨利氏袢,和集合导管（主要髓袢升支）明显表达,而在皮质肾小球中则未能检测到OPN mRNA的表达。A组大鼠肾组织中仅肾脏髓质小部分亨利氏袢中检测到OPN mRNA的表达,与此相反在B组和D理组大鼠肾组织中则明显检测到OPN mRNA的表达,只是B组中OPNmRNA的表达强度相对弱于成石对照组。RT-PCR检测结果与原位杂交一致。免疫组化显示OPN蛋白在所有3组中均有表达,在肾近曲小管和远曲小管,亨利氏袢,和集合导管（主要髓袢升支）明显表达OPN蛋白,而在皮质肾小球中则未能检测到OPN蛋白的表达。在正常对照组中仅能检测到OPN蛋白的微弱表达。但是在B组大鼠肾组织中OPN表达则明显增强。D组大鼠肾组织中OPN表达强度低于成石对照组。Western blotting检测显示A组轻度表达OPN,而B组则显著表达,D组表达强度低于结石组。结论:夏枯草水提取物和50%甲醇提取物体外能够有效抑制尿草酸钙结石形成。体内实验表明夏枯草50%甲醇提取物能有效防止大鼠体内尿草酸钙结石形成。夏枯草50%甲醇提取物能有效抑制大鼠肾组织OPN的表达,减少肾组织草酸钙结晶的沉积,从而能有效抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。
论文目录
相关论文文献
- [1].Osteopontin在肾细胞癌中的表达及意义[J]. 医学与哲学(B) 2012(11)
- [2].肾透明细胞癌组织Osteopontin表达及临床意义分析[J]. 新疆医学 2013(10)
- [3].The Yin-Yang of osteopontin in nervous system diseases: damage versus repair[J]. Neural Regeneration Research 2021(06)
- [4].Increased osteopontin and liver stiffness measurement by transient elastography in biliary atresia[J]. World Journal of Gastroenterology 2010(43)
- [5].Expression of NF-κ B and osteopontin of synovial fluid of patients with knee osteoarthritis[J]. Asian Pacific Journal of Tropical Medicine 2013(05)
- [6].Elevated Circulating Levels of Osteopontin Are Associated with Metastasisin Advanced Non-Small Cell Lung Cancer[J]. Chinese Journal of Cancer Research 2011(01)
- [7].Expressions of osteopontin and CD44v6 and their clinical significance in pituitary adenomas[J]. China Medical Abstracts(Surgery) 2011(03)
- [8].Osteopontin在蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛发生中的作用机制研究[J]. 齐齐哈尔医学院学报 2018(23)
- [9].Skeletal loading regulates breast cancer-associated osteolysis in a loading intensity-dependent fashion[J]. Bone Research 2020(02)
- [10].Osteopontin as potential biomarker and therapeutic target in gastric and liver cancers[J]. World Journal of Gastroenterology 2012(30)
- [11].Rapid Purification and Identification of Osteopontin from Human Milk by HPLC Coupled to FT-ICR-MS[J]. Chemical Research in Chinese Universities 2010(01)
- [12].FGF-2和osteopontin在非小细胞肺癌中的表达及其相关性[J]. 中南大学学报(医学版) 2009(11)
- [13].Efficacy of dietary phytase supplementation on laying performance and expression of osteopontin and calbindin genes in eggshell gland[J]. Animal Nutrition 2018(01)
- [14].鹿角形肾结石尿路感染患者肾内Osteopontin的表达意义[J]. 大理大学学报 2018(02)
- [15].Osteopontin调控骨髓间充质干细胞(MSCs)对促进糖尿病足创面愈合的作用[J]. 现代生物医学进展 2013(12)
- [16].Inhibition of Breast Cancer Metastasis and Angiogenesis by Antiosteopontin mAb 1A12[J]. 中国肺癌杂志 2009(06)
- [17].Associaton between plasma osteopontin levels and severity of coronary heart disease in non-diabetic subjects[J]. China Medical Abstracts(Internal Medicine) 2014(03)
- [18].Osteopontin特异性siRNA慢病毒表达载体的构建及其在U251胶质瘤细胞中OPN的表达[J]. 第四军医大学学报 2009(14)
- [19].Bone marrow-derived monocyte infusion improves hepatic fibrosis by decreasing osteopontin,TGF-β1,IL-13 and oxidative stress[J]. World Journal of Gastroenterology 2017(28)
- [20].骨桥蛋白和E-钙粘素与宫颈癌放疗抵抗的相关性[J]. 中国现代医学杂志 2015(16)
- [21].Osteopontin抗体在小鼠脊髓损伤性炎症反应中的作用[J]. 中华临床医师杂志(电子版) 2012(11)
- [22].Osteopontin基因SNP rs2728127和rs34527305与鼻咽癌易感性的相关性[J]. 右江民族医学院学报 2019(05)
- [23].Osteopontin: a leading candidate adhesion molecule for implantation in pigs and sheep[J]. Journal of Animal Science and Biotechnology 2015(02)
- [24].Expressions of Osteopontin (OPN),αVβ3 and Pim-1 Associated with Poor Prognosis in Non-small Cell Lung Cancer (NSCLC)[J]. Chinese Journal of Cancer Research 2012(02)
- [25].Disease Caused by Chemical and Physical Agents[J]. China Medical Abstracts(Internal Medicine) 2010(04)
- [26].Expression of Osteopontin and caudal-related homeobox gene 2:indications of phenotypes and prognosis in advanced gastric cancer[J]. 福州总医院学报 2010(04)
- [27].Osteopontin: A non-invasive parameter of portal hypertension and prognostic marker of cirrhosis[J]. World Journal of Gastroenterology 2016(12)
- [28].Dynamic Expression Profiles of Marker Genes in Osteogenic Differentiation of Human Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells[J]. Chinese Medical Sciences Journal 2015(02)
- [29].Identification of osteopontin as the most consistently over-expressed gene in intrahepatic cholangiocarcinoma: Detection by oligonucleotide microarray and real-time PCR analysis[J]. World Journal of Gastroenterology 2008(16)
- [30].Expression of Phosphorylated-STAT3 and Osteopontin and Their Correlation in Melanoma[J]. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2009(02)