BMP通路关键因子在人类牙胚组织中的表达检测

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人类牙齿的发育是一个相对比较复杂的过程,许多信号通路互相串联在一起,形成一个复杂的信号网络共同调控牙齿的发育过程。小鼠作为模式生物,其牙齿发育的调控机制已经研究的比较透彻,但是不同物种之间存在差异,至今为止,我们对人类牙齿发育过程中信号调控的过程仍不是十分清楚。为了弄清人类牙齿发生的分子机制,同时了解信号通路的调控模式,我们做了一些相应的基础研究。有文献报道在小鼠中敲除BMPRIA,阻断BMP信号会导致牙胚发育停留在蕾状期,还有众多文献表明BMP信号缺失导致牙齿发育异常,由此可见BMP信号对于调控牙齿发育是比较关键的。本实验研究了BMP信号通路的一些关键因子在人牙胚中的表达情况,这些基因包括BMP2, BMP7, SDAM4, BMPRIA, BMPRIB和BMPRII, noggin.通过对比相应时期小鼠基因的表达情况,我们发现在人类牙胚发育的分子调控过程中BMPRIB的表达与小鼠存在差异,而其余基因表达情况均与小鼠类似,我们可以推测是否在人类牙胚发育过程中BMPRIB受体而不是BMPRIA起到了关键的信号传递的作用。通过本实验可以进一步探讨调节牙齿发育过程的信号通路之间的相互作用关系。

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第一章绪论

1.1 牙齿发育过程

1.2 牙齿发育过程中的信号调控

1.3 BMP信号

1.3.1 BMPs配体

1.3.2 BMP拮抗物

1.3.3 BMP受体

1.3.4 SMADs

1.3.5 BMP信号调控过程

1.3.6 BMP信号在牙齿发育过程中信号调控的研究

1.4 实验技术----原位杂交

1.5 本研究意义

第二章材料和方法

2.1 材料

2.1.1 主要仪器

2.1.2 主要药品

2.1.3 常用培养基和基本缓冲液

2.1.4 RNA原位杂交试剂

2.2 实验方法

2.2.1 RNA探针模板的制备

2.2.2 RNA探针的沉淀与纯化

2.2.3 RNA电泳检测

2.2.4 胚胎的收集与切片

2.2.5 原位杂交

第三章实验结果

3.1 原位杂交结果

3.1.1 BMP2在人类牙胚中的表达

3.1.2 BMP7在人类牙胚中的表达

3.1.3 NOGGIN在人类牙胚中的表达

3.1.4 BMPR1A在人类牙胚中的表达

3.1.5 BMPR1B在人类牙胚中的表达

3.1.6 BMPRⅡ在人类牙胚中的表达

3.1.7 SMAD4在人类牙胚中的表达

第四章分析与讨论

4.1 影响原位杂交结果的因素

4.2 BMP信号通路关键因子在人类牙胚中的表达模式可能的调控机制

附录英文缩略词表

参考文献

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