论文摘要
高等真菌（蘑菇）是菌物界最为重要的成员之一,富含结构新颖且生物活性多样的化合物,因而成为新药开发的一种重要的天然资源,越来越引起人们的重视。为了系统地挖掘和开发我国高等真菌资源,特别是有毒高等真菌（毒蕈）资源,本论文开展了以下工作: 1.系统采集了我国云南省90种毒蕈,基本建立了其在云南的品种资源分布图谱和生态信息库。这些有毒真菌约占云南省毒蕈资源50%,隶属于2亚门:担子菌亚门、子囊菌亚门;2纲:层菌纲、核菌纲:3目:伞菌目、非菌褶目、肉座菌目:8科:鹅膏菌科、蘑菇科、牛肝菌科、丝膜菌科、红菇科、齿菌科、肉座菌科、陀螺菌科;14属:鹅膏菌属、蘑菇属、牛肝菌属、疣柄牛肝菌属、粉牛肝菌属、粘盖牛肝菌属、粉孢牛肝菌属、丝膜菌属、丝盖伞属、乳菇属、红菇属、肉齿菌属、菌寄生菌属、陀螺菌属。 2.详细评价了这些毒蕈的体外抗癌细胞毒性。采用四氮唑盐酶还原法（MTT）,从90种毒蕈的石油醚、乙酸乙酯、乙醇和水四种溶剂提取物中,发现了43种毒蕈的石油醚及（或）乙酸乙酯提取物对宫颈癌HeLa细胞株具有较强的细胞毒性(IC50为5—100μg/ml),占所采毒蕈47.8%,其中8种毒蕈的提取物显示了强烈的抗癌细胞毒活性(IC50<35μg/ml);而所有收集的毒蕈的乙醇和水提取物几乎没有显示抗癌细胞毒活性(IC50>200μg/ml)。在有活性的43种毒蕈中共有35种毒蕈的体外抗癌细胞毒性均为首次报道,为进一步提取分离具有抗癌活性的先导化合物奠定了丰厚的材料基础。 3.分析鉴定了两种具有强烈抗癌细胞毒性的毒蕈——竹生肉球菌和黄赭鹅膏菌寄生菌的细胞毒性原因。论文首次报道轮枝胞菌素A是黄赭鹅膏菌寄生菌中的主要细胞毒性物质,而松胞菌素D是引起竹生肉球菌强烈细胞毒性的主要原因。经现代波谱技术确证了这两种物质的结构,论文也首次报道了轮枝胞菌素A晶体结构特征。 4.广泛探索了松胞菌素D和轮枝胞菌素A的体内外抗癌活性、抗真菌活性和杀虫活性。 松胞菌素D具有广谱抗癌细胞毒活性,对急性髓系白血病NB4、急性髓系白血病M3型HL-60、红白血病K562、急性髓系白血病单核型U937、急性髓系白血病慢粒型KU812,肝癌SMMC 7721,乳腺癌BCAP37,宫颈癌HeLa,口腔鳞癌SK等九个不同肿瘤株均有强烈的细胞毒活性(IC50平均值约7.35×10-6M),细胞毒性与紫杉醇接近(IC50为2.0×10-6M),并发现松胞菌素D可以通过诱导肿瘤细胞凋亡而抑制其增殖。论文首次报道松胞菌素D具有强烈的选择性抗作物病源真菌尖刀镰孢菌Fusarium oxysporium f.sp.活性（MIC为12.5μg/ml）和杀虫活性（对桃蚜、朱砂叶螨、小菜蛾均有一定的杀伤作用,但对朱砂叶螨、桃蚜的活性相对较高）。 轮枝胞菌素A也具有广谱抗癌活性,对红白血病K562,肝癌SMMC 7721、肝癌HepG2,乳腺癌BCAP37、乳腺癌MCF—7,宫颈癌HeLa,肺腺癌SPC—A1,前列腺癌DU145,大肠癌SW620,淋巴癌Jurkat等十个不同肿瘤株均有强烈的细胞毒活性,IC50平均值为6.6×10-8M,细胞毒性明显高于紫杉醇(2.0×10-6M),轮枝胞菌素A可以通过诱导肿瘤细胞凋亡而抑制其增殖;体内抗癌结果表明0.05mg/kg的轮枝胞菌素A连续给药7天,对小鼠S180肉瘤的抑瘤率30.39%;论文首次发现轮枝胞菌素A具有强烈选择性抗作物病源真菌灰霉菌Botrytis cinerea作用,其MIC为10μg/ml,优于阳性对照灰黄霉素（31.25μg/ml）。 5.总结综述了毒蕈毒素的化学分类及其毒理。 所有这些研究对充分利用我国的高等真菌资源,进行系统的新药开发特别是抗肿瘤药物开发具有重要的意义。