论文摘要
全世界大约20亿人曾经感染过或者现在感染了乙型肝炎病毒,超过了3亿五千万人是乙肝病毒携带者。该病毒虽然是最常见的人类病原之一,但是它却引起了非常严重的公众健康问题。然而由HBV感染所导致的肝癌的发生机理目前尚不完全清楚。研究表明,病毒与宿主因子之间的相互作用可激活致瘤信号通路并引起一系列的细胞转化,如细胞染色体不稳定性的提高、端粒磨损、基因突变等。而且,研究发现,HBV基因组所编码的HBx在诱导宿主基因组不稳定性方面发挥着重要功能。RecQ DNA家族解螺旋酶在进化中是高度保守的,在维持细胞基因组的完整性方面具重要功能。微生物如大肠杆菌、酿酒酵母仅仅只有一种RecQ解螺旋酶,但高等真核生物却含有几种RecQ解旋酶,如在人细胞中,目前发现了五种RecQ解螺旋酶,即RECQL、BLM, WRN、RTS和RecQ4。RecQ解螺旋酶定位在细胞核里,在DNA复制、重组和修复中发挥重要作用。为了进一步揭示HBx的生物学功能及其在肝癌诱导发生中的作用,本研究通过酵母双杂交方法筛选到了一个可以与HBx发生相互作用的人解螺旋酶蛋白（DNA helicase Q1-like, RECQL）。为了进一步验证它们的相互作用是否真实,本研究构建了在哺乳动物细胞中表达的载体,接着在哺乳动物细胞内采用免疫共沉淀方法证实了它们之间的相互作用,免疫荧光实验说明它们定位在一起。同时,我们根据它们的蛋白质结构特点,构建了相应的缺失突变体。本研究结果是HBx可以与RECQL发生相互作用,RECQL的主要功能是抑制染色体不稳定,而HBx可以诱导基因组染色体稳定性下降,导致肝癌。那么,在HBx引起的HCC中,HBx到底是以何种机制引起了染色体稳定性下降,这是我们下一步工作要研究。同时,我们的结果为进一步探索HBx引起的染色体稳定性下降奠定了基础。