高强度聚焦超声治疗外阴上皮内非瘤样病变前后雌、孕激素受体及Survivin的表达及意义

论文摘要

目的1.研究高强度聚焦超声（high intensity focused ultrasound, HIFU）治疗外阴上皮内非瘤样病变（nonneoplasia epithelial disorders of skin and mucosa ofvulva）的疗效。2.检测HIFU治疗前后外阴上皮内非瘤样病变患者病变组织中雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptor，PR）及生存素Survivin的表达意义及相关性研究。3.探讨高强度聚焦超声治疗外阴上皮内非瘤样病变的可能机制。方法1.入选标准：收集2009年1月至2011年9月在济南军区总院经病理证实为外阴上皮内非瘤样病变患者86例。排除标准：妊娠、哺乳期女性，月经期女性，糖尿病的患者（尚未控制好病情者），患有严重心血管疾病、肺部疾病、脑部疾病，肝肾功能异常者。根据1987年国际外阴疾病协会（International Society for the Study of Vulva Disease, ISSVD）和国际妇科病理协会（International Society of Gyneocological Pathologists, ISGYP）讨论建议的分类标准，分组为：鳞状上皮细胞增生型（squamous hyperplasia of thevulva, SHV）43例，硬化性苔癣型（lichen sclerosus of the vulva, LSV）29例，硬化性苔癣合并鳞状上皮细胞增生型（lichen sclerosus combined withsquamous hyperplasia of vulva， LSCSH）14例。其中病人的病程为0.5～15年，平均（5.33±3.33）年，年龄为15～75岁，平均（43.06±14.45）岁。2.所有入选患者均知情，并签订患者知情同意书，其中对照组的选取为因外阴外伤、外阴撕裂伤等原因进行外阴手术的30例病例取其正常皮肤组织。高强度聚焦超声治疗前在阴道镜下取病变组织和30例对照的正常皮肤组织，超声治疗6个月后同样在阴道镜下在相同部位取病变组织及正常外阴组织。采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法（streptavidin-perosidase，S-P法）S-P免疫组织化学法检测各组织中雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptor，PR）及Survivin的表达阳性情况。3.免疫组织化学结果判定方法：ER、PR主要定位于细胞核,少量出现在胞浆，以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性染色,而Survivin主要定位于细胞质及细胞核，以细胞质或胞核内出现黄色或棕黄色颗粒为阳性染色。Survivin及ER、 PR表达判断均采用Fromowitz半定量分级法：根据阳性细胞数和细胞内颗粒的着色深度评分；在高倍镜视野为×40下计数每张片子，方法为：随机选取10个视野，在每个视野内计数100细胞，在其内确定其每个视野的阳性率，并取平均值作为阳性细胞百分数。按下列方法计分：（1）阳性表达细胞﹤10%，O分，（2）阳性表达细胞数10～25%，1分，（3）阳性表达细胞数，26～50%，2分，（4）阳性表达细胞数51～80%，3分，（5）阳性表达细胞数大于80%，4分。阳性表达细胞的着色深度,即细胞染色的强度:基本不着色为O分，浅黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。两者得分相乘，0分为阴性（-），1-4分为弱阳性（+），5-8分为阳性（++），9-12分为强阳性（+++）。4.统计学方法：数据分析采用SPSS16.0统计软件进行处理，两组间比较采用行×列表的χ2检验，两变量间的相关性用Spearman等级资料相关分析，在α=0.05的水平上，以P＜0.05为有统计学意义。结果1.在高强度聚焦超声治疗86例外阴上皮内非瘤样病变患者6个月后，患者的外阴瘙痒程度明显改善，皮肤颜色红润或接近正常，皮肤弹性好转。对患者进行治疗前后的评分比较，治疗后评分明显低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）。2.不同病理类型外阴上皮内非瘤样病变患者高强度聚焦超声治疗比较差异无统计学意义（P＞0.05）；高强度聚焦超声治疗不同病程患者临床效果比较差异有统计学（P＜0.05），提示病程越短，治疗效果越好；不同年龄的患者聚焦超声治疗效果比较差异有显著统计学意义（P＜0.05），提示年轻患者，治疗效果好。3.86例外阴上皮内非瘤样病变患者的病变组织和其中30例正常外阴皮肤组织的ER、PR、Survivin表达情况，发现两组中均有其阳性表达；ER、PR分别表达于表皮各层及真皮层内的细胞核，Survivin表达于表皮各层的细胞核及胞浆内；而且ER、PR在正常外阴组织中的阳性率高于外阴上皮内非瘤样病变患者组织（P＜0.05），Survivin在正常外阴组织中的阳性率低于外阴上皮内非瘤样病变患者组织（P＞0.05）。4.聚焦超声治疗后ER、 PR、 Survivin在正常外阴组织中的阳性率与外阴上皮内非瘤样病变患者组织中差异无统计学意义（P＞0.05），即ER、PR治疗后在病变组织中的阳性表达升高，接近或高于正常组织，Survivin治疗后在病变组织中阳性表达率降低，接近正常组织。聚焦超声治疗前后ER、PR、Survivin在外阴上皮内非瘤样病变患者组织中的表达差异有统计学意义，即治疗后高于治疗前。5.高强度聚焦超声治疗前ER、 PR、 Survivin在鳞状上皮增生型、硬化性苔藓型及混合性表达无统计学意义，其三型在治疗后也无统计学差异（P＞0.05）。结论1.高强度聚焦超声治疗外阴上皮内非瘤样病变患者有显著临床效果，但其对不同病理类型的患者治疗效果比较，差异无统计学意义（P＜0.05）。聚焦超声治疗的效果与患者的病程有关系，其病程短超声治疗效果好。与年龄有一定的关系，本实验结果提示年轻患者治疗效果较年老患者好。2.高强度聚焦超声治疗外阴上皮内非瘤样病变前， ER、 PR在病变组织内较正常组织低表达，提示雌孕激素受体水平降低可能是发生外阴上皮内非瘤样病变的机制之一。治疗后，其表达水平升高，提示高强度聚焦超声治疗该病后雌孕激素受体表达率增高。3.高强度聚焦超声治疗外阴上皮内非瘤样病变前，Survivin在病变组织相对于正常组织高表达，提示外阴上皮内非瘤样病变存在增生活跃区，Survivin在该病病变组织高表达，可能是其发病的病因之一。4.聚焦超声治疗前后ER、PR及Survivin的表达情况，在一定程度上可预测对该疾病的疗效。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文