茅苍术质量评价体系的建立与方法学研究

论文摘要

本论文以道地茅苍术为基准,结合传统用药方式和临床疗效,采用现代分析技术分析其挥发性及水提物不同极性部位的化学成分,探讨茅苍术道地性的主要特征成分并与不同产地茅苍术比较,结合植物化学方法和现代分析手段建立能够较全面反映茅苍术丰富化学信息的指纹图谱,作为茅苍术的质量评价和临床疗效的依据。主要研究内容和结论如下:1、采用柱层析和薄层跟踪联用的方法对茅苍术挥发油中主要化学成分进行了分离,得到了6种化合物,经理化常数、光谱学方法鉴定为苍术酮、苍术素、茅术醇、β-桉叶醇、白术内酯Ⅱ和乙酰苍术素醇。并利用面积归一化法进行纯度检查,6种化合物的纯度均达98%以上。2、建立了气相色谱法同时测定茅苍术药材中苍术酮、苍术素、茅术醇和β-桉叶醇含量的分析方法。方法学考察结果表明,方法准确、简便,具有良好的重复性和稳定性。15批不同产地茅苍术药材4种指标性成分含量测定结果显示,道地茅苍术药材与非道地茅苍术药材挥发性成分的主要化学成分有较明显的差别。SPSS聚类分析显示不同产地茅苍术可分为2大类,道地产区可与江苏南京灵山的和江苏宜兴的及湖北英山的聚为一类,安徽霍山、河南信阳和陕西的聚为一类。3、建立了GC-MS同时测定不同产地茅苍术中13种倍半萜类和多炔类成分的含量的方法。所鉴定的13种化学成分定性结果准确、可靠。且本研究首次采用GC-MS分析方法对苍术中白术内酯Ⅱ（Atractylenolide）、乙酰苍术素醇（Acetylatractylodinol）进行了鉴定。对不同产地茅苍术中13种成分的含量进行了测定,结果表明不同产地茅苍术药材挥发性成分的组成及其含量有较明显的差别。道地茅苍术药材所含化学成分种类较多;江苏镇江南山样品与道地茅苍术差别较小,安徽和湖北两地样品所含化学种类与道地样品相似,但在含量方面存在一定的差异;河南和陕西苍术样品的化学组成较接近,但二者所含化学成分种类较少,其中茅术醇、β-桉叶醇两种成分之和的含量较高,占所测13种成分总含量的87.65%～97.08%。分别以13种主要成分及4种特征性成分（苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇、苍术素）的GC-MS数据对19个样品进行了SPSS聚类分析。分析结果表明,两种聚类分析方式结果基本一致,19批不同产地样品可分为两大类,道地产区茅苍术与江苏镇江南山、湖北英山、安徽毫州茅苍术聚为一类,该类的特点是主要特征性成分为苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇、苍术素,且苍术酮与苍术素含量之和较高;河南和陕西等地茅苍术聚为另一类,该类的主要特点是样品中茅术醇、β-桉叶醇含量较高,而样品中苍术酮含量较少或者未检出,苍术素的含量也较低,因此该类样品的特征性成分为茅术醇、β-桉叶醇。上述结果分析进一步表明苍术酮、茅术醇、β-桉叶醇、苍术素这四种成分可作为茅苍术质量评价的挥发性指标成分。4、采用中药指纹图谱研究技术建立了不同产地的茅苍术水提物不同极性部位的指纹图谱。通过对不同产地茅苍术水提物不同极性部位指纹图谱的研究中发现,石油醚部位有10个主要共有峰,乙酸乙酯部位有11个主要共有峰,正丁醇部位有14个主要共有峰。综合3个不同部位的共有峰信息,能够较全面的反映样品的特征性。对不同产地16个茅苍术样品进行相似度计算,综合分析16个样品在不同极性部位相似度,结果表明6批道地茅苍术的相似度较高,其他非道地茅苍术与之相比相似度高低顺序依次为:南京灵山、安徽、湖北、河南、陕西。对不同产地茅苍术不同极性部位进行综合SPSS聚类分析表明:道地茅苍术、南京灵山茅苍术与安徽、.湖北产地茅苍术聚为一大类;河南和陕西产地茅苍术聚为另一大类。该聚类分析结果与以挥发性成分为指标的聚类分析结果较为相似,综合分析茅苍术挥发性与非挥发性化学成分的特征,所得到的实验结果能够更加客观的反映茅苍术的内在质量。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 茅苍术的研究概况
• 1.1.1 茅苍术的植物特征及其分布
• 1.1.2 茅苍术的本草考证
• 1.1.3 茅苍术化学成分分析及质量评价
• 1.1.4 茅苍术药理作用的研究
• 1.1.5 苍术的道地性研究
• 1.2 中药质量标准现代化研究现状
• 1.2.1 中药质量标准发展概况
• 1.2.2 中药质量控制研究方法
• 1.3 本课题的立题背景和意义
• 1.4 本论文研究的主要内容
• 第二章 茅苍术挥发性成分化学对照品的制备研究
• 2.1 茅苍术挥发性主要指标性成分的单体制备
• 2.1.1 仪器与试药
• 2.1.2 实验方法
• 2.2 本章小结
• 参考文献
• 第三章 茅苍术挥发性成分中4种指标性成分的定量分析
• 3.1 仪器、材料与试剂
• 3.1.1 仪器与试药
• 3.1.2 药材来源
• 3.1.3 色谱分析条件
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 对照品储备液的配制
• 3.2.2 供试品溶液的制备
• 3.2.3 标准曲线绘制
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 色谱条件选择
• 3.3.2 提取条件选择
• 3.3.3 线性关系考察
• 3.3.4 方法学考察
• 3.3.5 样品测定
• 3.3.6 测定结果分析
• 3.3.7 SPSS聚类分析
• 3.4 本章小结
• 参考文献
• 第四章 GC-MS法同时测定不同产地茅苍术中13种倍半萜类和多炔类成分的含量
• 4.1 茅苍术挥发性成分GC-MS含量测定分析方法的建立
• 4.1.1 仪器、材料与试剂
• 4.1.2 色谱分析条件
• 4.1.3 试验方法
• 4.1.4 结果与讨论
• 4.2 SPSS聚类分析
• 4.3 本章小结
• 参考文献
• 第五章 茅苍术水提物不同极性部位指纹图谱研究及综合聚类分析
• 5.1 茅苍术水提物石油醚部位HPLC指纹图谱
• 5.1.1 仪器、试剂与材料
• 5.1.2 实验方法
• 5.1.3 结果与讨论
• 5.2 茅苍术水提物乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱
• 5.2.1 仪器、试剂与材料
• 5.2.2 实验方法
• 5.2.3 结果与讨论
• 5.3 茅苍术水提物正丁醇部位指纹图谱研究
• 5.3.1 仪器、试剂与材料
• 5.3.2 实验方法
• 5.3.3 结果与讨论
• 5.4 综合聚类分析
• 5.5 本章小结
• 参考文献
• 第六章 全文总结与展望
• 6.1 主要结论
• 6.2 展望
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文
• 附录