细胞粘附分子与血小板在肿瘤转移中的作用

论文摘要

肿瘤的转移是一个复杂的病理生理过程,涉及肿瘤细胞从原发部位的迁出和肿瘤细胞在转移部位的植入,在此过程中涉及到多种粘附分子介导的肿瘤细胞、血管内皮细胞和血小板之间的相互作用。目的:分析细胞黏附分子及其配体在血管内皮细胞和肿瘤细胞的表达及其调控:比较肿瘤细胞在肿瘤血管内皮细胞和正常血管内皮细胞的黏附,分析这些黏附分子在肿瘤黏附中的作用;探讨血小板对肿瘤细胞—血管内皮细胞黏附的影响。方法:应用Real-time PCR和流式细胞分析比较J下常肝窦内皮细胞（LSEC）及肝癌的血管内皮细胞（T3A）ICAM-1、αvβ3和αvβ5的表达以及缺氧对其表达的调控。应用Real-time PCR和Western Blot方法分析6种肿瘤细胞Del-1和L1的表达及缺氧对其表达的调控。比较肿瘤细胞在LSEC和T3A两种血管内皮细胞的黏附。分析抗不同粘附分子的单克隆抗体对肿瘤细胞一内皮细胞黏附的阻断作用。研究血小板对肿瘤细胞一内皮细胞粘附的影响,分析不同粘附分子在肿瘤细胞-内皮细胞粘附中的作用。结果:流式细胞分析结果显示:肿瘤血管内皮细胞αvβ3和αvβ5的基础表达明显高于肝窦内皮细胞,而ICAM-1的表达明显低于肝窦内皮细胞。细胞黏附分子的表达差异通过Real-time PCR获得进一步证实。缺氧24小时后,肿瘤血管内皮细胞和肝窦内皮细胞表达αvβ3和αvβ5均明显上调,而ICAM-1表达在肝窦内皮细胞明显,而在肿瘤血管内皮细胞没有明显变化。6种不同肿瘤细胞Del-1和L1基础表达存在明显差异,其中BEL7402细胞表达Del-1和L1而HOS细胞缺乏Del-1和L1的表达。在12小时缺氧后,Del-1和L1的表达在BEL7402细胞明显上调,而在HOS细胞没有明显变化。细胞黏附实验显示:BEL7402细胞在肿瘤内皮细胞的黏附明显高于肝窦内皮细胞,两者间存在明显的统计学差异。内皮细胞或肿瘤细胞的缺氧均能增加肿瘤细胞在内皮细胞的黏附,并且这种黏附可以被抗αvβ3、αvβ5的抗体阻断,而抗ICAM-1的抗体没有阻断作用。有趣的是HOS细胞在肿瘤内皮细胞的黏附也高于肝窦内皮细胞,但这种黏附不被抗αvβ3、αvβ5或ICAM-1的抗体阻断,表明肿瘤细胞一内皮细胞的黏附还存在不依赖于αvβ3、αvβ5和ICAM-1的黏附机制。肿瘤细胞BEL7402及肺内皮细胞都能和血小板粘附,血小板能明显增加肿瘤细胞BEL7402在血管内皮细胞的粘附,而且血小板介导的肿瘤细胞粘附可以被抗gpⅡb/Ⅲa的抗体阻断。结论:细胞黏附分子αvβ3、αvβ5及其配体在肿瘤细胞从原发部位的迁出过程中起重要的介导作用;而血小板对肿瘤细胞在转移部位的植入过程起促进作用。

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料与方法
• 1.主要实验试剂
• 2.主要仪器设备
• 3.主要实验方法及统计学处理
• 实验结果
• 一、内皮细胞与肿瘤细胞粘附分子的表达及缺氧对其表达的调控
• 1.肝癌微血管内皮细胞（T3A）的鉴定
• 2.血管内皮细胞黏附分子的基础表达
• 3.缺氧对内皮细胞黏附分子表达的调控
• 4.肿瘤细胞黏附分子的基础表达
• 5.缺氧对肿瘤细胞表达黏附分子的调控
• 二、粘附分子在肿瘤转移中的作用
• 1.肿瘤细胞在不同血管内皮细胞的黏附
• 2.缺氧对肿瘤细胞-内皮细胞粘附的影响
• 3.不同抗体对肿瘤细胞-内皮细胞粘附的阻断作用
• 4.HOS细胞在血管内皮细胞的黏附及抗体的阻断作用
• 三、血小板在肿瘤植入过程中的作用
• 1.肺微血管内皮细胞（HLEC）的鉴定
• 2.血小板与肿瘤细胞的粘附
• 3.血小板与内皮细胞的粘附
• 4.血小板对肿瘤细胞-内皮细胞粘附的影响
• 5.不同数量血小板对肿瘤细胞.内皮细胞黏附的影响
• 6.不同抗血小板抗体对肿瘤细胞-内皮细胞黏附的影响
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 个人简历
• 致谢