论文摘要
目的建立急慢性柯萨奇病毒性心肌炎小鼠模型,了解VMC小鼠心肌组织STAT3的表达和活化情况,并进一步探讨其具体作用及作用机理。方法通过对Balb/c小鼠腹腔注射CVB3建立VMC小鼠模型,同时用STAT3特异性抑制剂RPM干预急性VMC小鼠模型的建立。分为急性VMC对照组、急性VMC组、急性VMC雷帕霉素干预组（RPM干预组）、慢性VMC对照组和慢性VMC组。Western blot检测心肌组织中STAT3和p-STAT3蛋白含量;HE染色检查心肌组织的病理变化;Reed法检测心肌组织中CVB3病毒滴度;采用ELISA双抗夹心法检测外周血清中IFN-γ、TNF-α水平。结果免疫印迹（Western blot）检测结果:各组心肌细胞胞浆STAT3表达无明显差异,急性和慢性VMC组胞浆p-STAT3表达较对照组高,但无统计学意义（P﹥0.05）;急性和慢性VMC组心肌细胞胞核STAT3和p-STAT3表达明显高于对照组（P﹤0.05）,但急性VMC组和慢性VMC组胞核STAT3和p-STAT3表达无明显差异（P﹥0.05）。（2）免疫组化检测结果:各组小鼠心肌组织中STAT3均有明显表达,而急性和慢性VMC小鼠心肌组织胞核内STAT3和p-STAT3表达明显高于对照组小鼠,其变化趋势与Western blot一致。（3）一般情况观察:对照鼠体重逐日递增,无任何症状、无死亡。急性VMC鼠和RPM干预鼠在接种CVB3后第5天出现活动和摄食减少,并开始出现死亡。与急性VMC鼠比较,RPM干预鼠症状较重,体重明显减轻,各组体重增加有显著性差异（P﹤0.05）。（4）心脏组织病理学观察:正常对照鼠心脏形态观察及光镜下检查正常。而急性VMC鼠和RPM干预鼠心肌组织中均出现炎症细胞浸润,心肌细胞肿胀,并有散在局灶性坏死区,但RPM干预鼠较急性VMC鼠病理改变明显加重,心肌组织病理评分增高（P﹤0.05）。（5）ELISA检测结果:与正常对照鼠相比,急性VMC鼠和RPM干预鼠血清IFN-γ和TNF-α表达均增加,但RPM干预鼠血清细胞因子含量均显著高于急性VMC鼠,三组之间有显著性差异（P﹤0.05）。（6）心肌组织病毒滴度检测结果:对照鼠心肌组织中检测不出病毒,急性VMC鼠与RPM干预鼠均可检测出病毒,两组间病毒滴度无明显差异（P﹥0.05）。结论（1）VMC小鼠心肌组织中STAT3活化明显增加,说明STAT3与小鼠VMC发病密切相关。（2）急性VMC时STAT3活化虽不能干扰CVB3复制,但能够抑制IFN-γ和TNF-α的过度表达,从而减弱CVB3感染后诱导Th1过度反应对心肌组织的损伤,并进而显著降低死亡率,提示VMC时STAT3活化对心肌组织有保护作用。
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