Photofrin-Herceptin偶联物对肿瘤细胞株的体外杀伤效应研究

Photofrin-Herceptin偶联物对肿瘤细胞株的体外杀伤效应研究

论文摘要

【目的】 研究Photofrin-Herceptin偶联物对HER-2表达阳性肿瘤细胞的特异性杀伤作用,为进一步的光免疫治疗奠定基础。 【方法】 1.分别对SK-BR-3、MCF-7、A549三种肿瘤细胞株进行传代培养,用流式细胞术测定各细胞株细胞表面HER-2表达率; 2.将131I—Herceptin超滤,用纸层析进行组分分析以验证超滤法去除商品Herceptin中所含赋形剂及防腐剂的可行性; 3.将商品Herceptin用超滤法进行预处理,用碳二亚胺(EDCI)将光敏剂Photofrin与单抗Herceptin偶联,并用薄层层析对Photofrin-Herceptin偶联物进行鉴定,然后分别使用凝胶过滤、超滤、盐析及亲和层析的方法对Photofrin-Herceptin偶联物的纯化进行尝试; 4.用酶联免疫法测定Photofrin-Herceptin偶联物免疫活性,并用MTT法检测其对不同HER-2表达率的肿瘤细胞株的体外杀伤作用。 【结果】 1.传代培养的SK-BR-3、MCF-7、A549细胞生长状态良好,其在普通光镜下的照片与ATCC提供的照片相比无明显差异。流式细胞术(本院血液科实验室)测定SK-BR-3细胞、MCF-7细胞和A549细胞表面HER-2表达率,分别为:99.04%、7.55%和0.44%。 2.131I—Herceptin超滤前Rf值=0的百分数为77.1%,与总的截留率78.2%

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 第一部分 SK-BR-3、MCF-7、A549细胞株培养及HER-2表达鉴定
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第二部分 Photofrin-Herceptin偶联物的制备及鉴定
  • 第一章 Herceptin的偶联前准备
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第二章 偶联物的制备及鉴定
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第三部分 Photofrin-Herceptin偶联物免疫活性的测定
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第四部分 Photofrin-Herceptin偶联物体外抗肿瘤细胞活性的检测
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第五部分 Photofrin-Herceptin偶联物纯化的尝试
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 参考文献
  • 文献综述
  • 英文缩略词表
  • 附录 攻读硕士学位期间发表论文及参加的学术会议
  • 致谢
  • 原创性声明
  • 学位论文版权使用授权书
  • 相关论文文献

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