论文摘要
前言 椎间盘退变(intervertebral disc degeneration, IVDD)是指椎间盘失去正常结构伴有进行性纤维化,表现为凝胶样髓核消失,髓核与纤维环原有清晰界限逐渐消失,纤维环板层粗糙和进行性纤维化,最后出现裂隙及老年色素沉积。椎间盘的退变与椎间盘组织中酶系活性改变和某些细胞因子的释放有关,VEGF与PDGF是重要的生长因子,目前关于PDGF和VEGF与椎间盘关系的研究主要集中在椎间盘的血管化、椎间盘再生和突出椎间盘的重吸收等方面。细胞因子在椎间盘退变中的作用仍不十分清楚,本研究旨在探讨退变椎间盘组织中VEGF、PDGF含量的变化,阐明VEGF、PDGF在椎间盘退变中的作用及其相互关系。 材料与方法 1.基础性研究 1.1 动物分组及标本采集 1.1.1 动物选择与分组:取清洁级1、3、6、12月龄及18月龄以上的Wistar大鼠共50只,雄性,体重不限。以月龄为单位,分为1、3、6、12、18月龄5个实验组,每组各10只。 1.1.2 标本采集:气胸法处死大鼠后,迅速取下L4-5及L5-6椎间盘,置于10%的甲醛溶液及2.5%戊二醛中固定。 1.2 观察指标及检测方法 1.2.1 不同月龄大鼠椎间盘组织细胞形态结构的观察:HE切片及透射电镜。 1.2.2 不同月龄大鼠椎间盘组织中VEGF的表达:SABC免疫组织化学法。 1.3 试剂及仪器 VEGF单克隆抗体,SABC免疫组化即用型试剂盒及DAB(联苯二胺)显色液、多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine)、去离子水、Leitz1512型切片机(Le-
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