论文摘要
第一部分大鼠肝硬化模型的制备目的：建立稳定可靠的肝硬化大鼠动物模型，探讨肝硬化大鼠肝脏组织中α-SMA表达的变化及意义。方法：90只雄性SD大鼠随机分为两组，实验组（80只）经皮下注射40％四氯化碳（CCl4），2周后改为50％（CCl4），根据体重调整给药剂量，每周2次，总共持续8周。对照组（10只）皮下注射生理盐水，频率、剂量和持续时间同实验组。8周后取肝组织行HE、Massion三色染色，免疫组织化学检测肝组织中α-SMA表达。结果：实验组80只大鼠造模结束时，死亡9只，死亡率11.25％。实验结束时，按照成模标准，造模成功大鼠共为71只，均可观察到肝硬化结节及镜下假小叶形成，成模率88.75％，与对照组比较，实验组α-SMA表达明显增强。对照组10只全部存活。结论：采用皮下注射四氯化碳并根据体重变化调整四氯化碳剂量可建立稳定可靠的肝硬化大鼠动物模型，α-SMA参与肝硬化病程。第二部分Akt抑制肝星状细胞活化的实验性研究目的：观察pcDNA3.1／Akt重组质粒经门静脉注射后大鼠肝组织胶原沉积及α-SMA表达的变化，探讨Akt对肝星状细胞活化的抑制作用。方法：肝硬化模型SD大鼠（60只）随机分为3组：Akt治疗组（n=20），空质粒处理组（n=20）和Tris处理组（n=20），分别经门静脉注射脂质体-Akt质粒、脂质体-空质粒和Tris缓冲液，术后第5天处死动物取下肝脏标本，免疫组化（SABC）法检测肝组织α-SMA的表达，Massion三色染色法观察肝组织胶原沉积情况。结果：与空质粒处理组或Tris处理组相比，Akt治疗组肝脏病理结构明显恢复，假小叶吸收或消散、胶原沉积减少，mSMA表达显著减少。结论：经门静脉导入脂质体-Akt入肝，可显著降低α-SMA表达，抑制肝星状细胞活化。