论文摘要
金丝桃以其绚丽多彩的浆果和丰富多彩的花色,在商业切花和盆花市场上日益受到消费者的喜爱。然而,金丝桃具有分布相对集中,杂合性高,易受土壤中线虫危害特征,严重影响了其在生产上的应用,使其远远不能满足日益增长的市场需求。金丝桃离体培养和再生体系的建立,不仅开拓了金丝桃快速繁殖的新途径,而且为金丝桃种质资源离体保存,提高育种效率及遗传转化和创新种质资源创新奠定了基础。本研究的主要目的是建立一个有效的金丝桃离体快繁和再生体系,为进行下一步的通过遗传转化体系的建立提供参考。本试验选取了金丝桃10个杂交新品种并从微繁,直接再生,间接再生三方面进行研究。首先建立了其离体微繁体系,就基因型、培养基类型等因素对金丝桃微繁体系的影响进行了探索;然后进一步建立了金丝桃植株直接再生体系,对不同培养基组成和培养条件对再生条件影响进行了比较;最后对其间接再生体系进行了研究,获得了较好的愈伤组织。本研究主要的研究结果如下:1.金丝桃的离体微繁体系的建立金丝桃组培苗分别在1/2MS、B5和MS基本培养基上继代,生长状态最好,其中以观果金丝桃1号品种增殖率最高,达到2.6。最佳生根培养基是:1/2MS+IBA（0.1mg/l）,移栽成活率为80%。2.金丝桃不定芽直接再生体系的建立以金丝桃1号、3号和7号品种叶片为外植体,研究了不同基因型、滤纸、初期暗培养时间和植物生长调节剂等因素对不定芽分化和植株再生的影响。结果表明:1号品种在诱导培养基MS+TDZ0.05mg/l+NAA0.01mg/l上黑暗培养20d后再转入光照培养,20d后再生效果最好,达到36.67%;暗培养时间过长,易形成愈伤组织而不利于不定芽的分化和植株再生;在培养基表面添加滤纸有利于前期愈伤的形成,从而提高了外植体的再生效率。3.金丝桃间接再生体系的建立以金丝桃的茎段和叶片为外植体,探讨了愈伤组织诱导及再分化的方法。结果表明:茎段更容易诱导愈伤,诱导率分别为93.3%;生长素类物质以2,4-D的诱导的愈伤生长量最大,但褐化也是最严重;不同细胞分裂素物质对愈伤进行诱导,以TDZ的效果最好。对由2,4-D诱导的愈伤进行各种抑制褐化的处理,表明以改良MS（不加CuSO4,CaCl2半量）培养基对愈伤的防褐处理效果最好;三种细胞分裂素TDZ、ZT、BA分别用于愈伤组织的再分化,但再生效率很低,关于金丝桃愈伤组织的再分化有待进一步研究。