骨髓巨噬细胞归巢静脉血栓及作用机理研究

论文摘要

[目的]探讨骨髓细胞动员和静脉血栓的关系,并观察单核细胞趋化蛋白-3（MCP-3）对骨髓细胞动员的大鼠静脉血栓中巨噬细胞趋化功能的影响,从而了解人重组粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）动员骨髓细胞对大鼠静脉血栓机化和再通的可能机理。[方法]成年Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为正常组、假手术组、血栓组和rhG-CSF组。正常组未行任何处理。假手术组大鼠的下腔静脉未行缩窄及阻断,余处理同血栓组。rhG-CSF组为模型鼠术后当天开始连续7天在腹部皮下按25ug/kg注射rhG-CSF,其余组注射等体积生理盐水。术前0.5h,术后1、3、5、7、10和14天采集外周血,以全自动血细胞计数分析仪检测白细胞总数,血涂片显微镜下计数单个核细胞（MNC）比例;用ELISA检测外周血中MCP-3水平;术后7天、14天取血栓组和rhG-CSF组下腔静脉标本。切取左肾静脉以下下腔静脉至左右髂总静脉汇合处,用免疫组化和图像分析仪及电子显微镜观察血栓机化率和血栓中巨噬细胞密度;用RT-PCR检测血栓中MCP-3 mRNA的表达情况。[结果]1.外周血MNC计数术后第3、5和7天,与血栓组外周血MNC计数（1.72±0.22×109/L,1.56±0.36×109/L,1.46±0.41×109/L）比较,rhG-CSF组外周血MNC计数（2.92±0.36×109/L,3.28±0.26×109/L,4.48±0.33×109/L）升高有显著性差异。2.血栓机化率和电镜结果术后7天和14天,与血栓组血栓机化率（14.64±2.32%, 63.21±8.68%）比较, rhG-CSF组血栓的机化率（32.52±3.50%, 89.54±5.62%）有显著性差异（P﹤0.01）。电镜观察显示:与血栓组比较, rhG-CSF组巨噬细胞数量多,其周围常见新生幼稚血管和成熟再通血管,巨噬细胞吞噬功能活跃。3.巨噬细胞密度术后第7天,与血栓组血栓内巨噬细胞密度（1.57±0.82%）比较,rhG-CSF组明显升高（8.58±1.24%,P=0.0037）;术后第14天,血栓组血栓内巨噬细胞密度为（ 5.62±1.07% ）, rhG-CSF组为（14.52±1.32%,P =0.0079）,巨噬细胞密度升高有显著性差异。4.外周血MCP-3水平术后7天假手术组、血栓组和rhG-CSF组外周血MCP-3水平（96.53±8.21,99.81±7.96,138.44±10.01）明显升高,各组内分别与术前比较有显著性差异（P<0.05）。术后14天rhG-CSF组外周血MCP-3水平（108.8±9.26）虽有下降,但仍明显高于术前水平,且高于假手术组和血栓组术后14天外周血MCP-3水平（42.68±0.56,44.82±0.68）,分别与术前、假手术组和血栓组比较P<0.05,有统计学意义。5.血栓中MCP-3 mRNA表达术后7和14天, rhG-CSF组血栓中MCP-3mRNA表达较血栓组显著升高,两组间比较有显著差异（P<0.01）;术后14天血栓组MCP-3mRNA表达与术后7天比较,显著下降,而rhG-CSF组无显著性变化。[结论]1.静脉壁机械性损伤联合缩窄可稳定建立大鼠静脉血栓模型。2.rhG-CSF可增加外周血趋化因子MCP-3水平和血栓中MCP-3mRNA的表达。3.外周血MCP-3水平增高和血栓中MCP-3 mRNA表达增加引起血栓中巨噬细胞聚集增多。提示骨髓细胞动员的大鼠静脉血栓中MCP-3能促使巨噬细胞的趋化功能增强（巨噬细胞归巢静脉血栓）,从而加快了血栓机化、再通过程。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 图片
• 文献综述
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文