马铃薯高频再生体系建立及离体茎尖诱变筛选耐盐突变体的研究

论文摘要

本论文以4个不同基因型的马铃薯无菌试管苗为材料,分别以茎尖、茎段、叶片、试管薯为外植体建立高频再生体系,并对不同外植体类型离体再生培养基进行了优化,提高了丛生芽分化率,实现了高效再生。以马铃薯茎尖愈伤组织为试材进行了耐盐突变体的辐射诱变及筛选研究,初步建立了耐盐突变体诱变筛选的技术体系。另外本论文还研究了植物生长延缓剂缩节胺在脱毒马铃薯组培快繁中的应用。结果如下:1.建立了4种基因型马铃薯的的高频再生体系。结果如下:马铃薯茎尖高频再生体系最佳培养基为: MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0 mg/L+KT0.05 mg/L+GA0.1 mg/L+CH 500mg/L ; MS+NAA0.01mg/L+ 6-BA2.0 mg/L+ GA.5.0mg/L和MS+NAA0.25 mg/L + 6-BA1.5 mg/L mg/L + GA 7.0mg/L两种再生培养基均能直接诱导马铃薯茎段丛生芽分化;马铃薯叶片高频再生体系的愈伤诱导培养基为MS+NAA0.2 mg/L + 6-BA2.5 mg/L + GA10.0 mg/L+ AgN03 4.0 mg/L,芽分化最佳培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+GA10.0 mg/L +AgN03 4.0 mg/L ,;马铃薯试管薯薯片高频再生体系的最佳培养基为MS+ZT2.0 mg/L+IAA1.0 mg/L+GA0.1 mg/L,GA 0.1 mg/L促进马铃薯试管薯薯片丛生芽的分化。2.本实验确定了10Gy的辐射剂量为适宜马铃薯茎尖愈伤的诱变剂量;经过初步筛选获得了NaCl最大耐受浓度0.8%突变体31株和1.0%的突变体17株;通过对耐盐突变体的生理生化指标的测定,表明耐盐突变体的叶绿素含量和丙二醛含量均低于对照,游离脯氨酸含量和过氧化氢酶含量高于对照,耐盐突变体表现出较强的耐盐潜力;离体鉴定表明耐盐突变体后代仍保持耐盐性。3.适宜剂量的缩节胺可用于马铃薯试管苗的快繁、壮苗、移栽和保存。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 马铃薯再生体系的研究进展
• 1.1.1 马铃薯再生体系中外植体的选择及再生途径
• 1.1.1.1 外植体的选择
• 1.1.1.2 再生途径
• 1.1.2 影响马铃薯再生体系建立的因素
• 1.1.2.1 基因型
• 1.1.2.2 外植体
• 1.1.2.3 培养基
• 1.2 植物离体培养筛选耐盐突变体的研究
• 1.2.1 耐盐突变体的选育
• 1.2.1.1 材料选择
• 1.2.1.2 变异来源
• 1.2.1.3 耐盐突变体的筛选
• 1.2.2 耐盐突变体的鉴定
• 1.3 马铃薯耐盐研究进展
• 1.4 本研究的目的与意义
• 第二章 马铃薯高频再生体系的建立
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.1.1 供试材料
• 2.1.1.2 培养条件
• 2.1.2 方法
• 2.1.2.1 马铃薯茎尖丛生芽的诱导
• 2.1.2.2 马铃薯茎段直接诱导丛生芽分化
• 2.1.2.3 马铃薯叶片诱导丛生芽分化
• 2.1.2.4 马铃薯试管薯薯片诱导丛生芽分化
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 马铃薯茎尖丛生芽诱导
• 2.2.2 马铃薯茎段直接诱导丛生芽
• 2.2.3 马铃薯叶片丛生芽的诱导
• 2.2.4 马铃薯试管薯丛生芽的诱导
• 2.3 讨论
• 2.3.1 马铃薯茎尖高频再生体系的建立
• 2.3.2 马铃薯茎段直接再生体系
• 2.3.3 马铃薯叶片再生体系
• 2.3.4 马铃薯试管薯再生体系
• 2.4 小结
• 第三章 离体茎尖诱变筛选耐盐突变体的研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.1.1 供试材料
• 3.1.1.2 培养条件
• 3.1.2 方法
• 3.1.2.1 马铃薯试管苗对 NaCl 的敏感性试验
• 3.1.2.2 马铃薯茎尖愈伤组织辐射剂量的选择
• 3.1.2.3 耐盐品系筛选
• 3.1.2.4 耐盐突变体的生根扩繁
• 3.1.2.5 耐盐突变体后代耐盐性的鉴定
• 3.1.2.6 耐盐突变体扩繁苗的生理生化指标测定
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 马铃薯试管苗的耐盐性分析及选择压力的确定
• 3.2.2 马铃薯茎尖愈伤组织的辐射剂量的确定
• 3.2.3 耐盐突变体的筛选
• 3.2.4 耐盐突变体的生根与扩繁
• 3.2.5 马铃薯耐盐突变体的初步鉴定
• 3.2.5.1 马铃薯耐盐突变体后代耐盐性鉴定
• 3.2.5.2 耐盐突变体扩繁苗的生理生化指标测定
• 3.3 讨论
• 3.3.1 辐射诱变与茎尖培养相结合诱导耐盐突变体
• 3.3.2 辐射剂量的选择
• 3.3.3 生理生化指标作为耐盐性鉴定的可行性
• 3.3.4 辐射诱变结合植物组织培养进行育种的优点与缺点
• 3.4 小结
• 第四章 缩节胺在马铃薯组培快繁上的应用研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 供试材料
• 4.1.2 试验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 DPC 对马铃薯试管苗生长发育的影响
• 4.2.1.1 缩节胺对马铃薯试管苗生长的影响
• 4.2.1.2 DPC 对马铃薯试管苗芽增殖的影响
• 4.2.1.3 DPC 对马铃薯试管苗移栽成活率的影响
• 4.2.2 缩节胺对不同基因型马铃薯试管苗生长和保存的影响
• 4.3 讨论
• 4.4 小结
• 参考文献
• 致谢