论文摘要
目的:探讨体外基因转染及三维培养体系对诱导BMSCs向软骨细胞定向分化的影响。方法:研究体外单层培养及三维培养条件下BMSCs传代、增殖的生物学特性;构建TGF-β1基因重组腺病毒粘粒载体和重组腺病毒载体Ad.TGF-β1;研究Ad.TGF-β1基因转染的兔骨髓间充质干细胞促成软骨细胞分化的影响。结果:我们采用全骨髓漂洗法获取兔长骨腔骨髓血并结合密度梯度离心法从骨髓血中分离出BMSCs加以纯化,并成功进行体外单层培养及三维培养,构建了较为稳定的BMSCs体外三维培养体系;建立了安全、稳定、有效的TGF-β1基因重组腺病毒载体Ad.TGF-β1构建方法;转染TGF-β1后BMSCs能持久地分泌显著增加的特异性软骨细胞外基质成分Collagen Ⅱ、蛋白多糖等,且转染后三维培养组优于单层培养组。结论:体外基因转染及三维培养体系具有明显的促进诱导BMSCs更好向软骨细胞分化的作用。
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