论文摘要
目的:证实种兔子细胞BMSCs与NPs体外立体共培养可诱导分化成类髓核细胞,表达髓核细胞生物学特性,体外与组织工程细胞支架材料体外构建组织工程髓核体内移植能够抑制椎间盘退变并修复椎间盘缺损,为退变性椎间盘疾病的治疗开辟一条新的有效途径。方法:体外分离、培养及获取髓核细胞及骨髓间充质干细胞,并鉴定及检测其生物活性检测;通过胶原包被的transwell建立NPs与BMSCs立体共培养体系,显微镜下观察其生物形态,并通过免疫组化鉴定诱导后的BMSCs及RT-PCR检测其RNA表达量;接种诱导后的BMSCs接种海藻盐凝胶复合体体外建立组织工程髓核,倒置显微镜、扫描电镜下进行细胞形态学观察,观察CM-Dil荧光示踪诱导后的BMSCs种子细胞增殖情况,通过细胞增殖检测及RT-PCR方法检测种子细胞与海藻盐凝胶的组织相容性;经后路兔椎间盘髓核针刺建立椎间盘退变模型,建立椎间盘退变模型;体内移植组织工程髓核,观察CM-Dil示踪种子细胞移植后体内增殖情况,HE染色及免疫荧光检测移植后组织工程髓核的生物特性,运用MRI观察移植后组织工程髓核对抑制兔椎间盘退变并重建椎间盘的情况,westernblot检测组织工程髓核体内移植后表达特异蛋白的情况。结果:体外分离、培养及鉴定BMSCs与NPs,细胞生长曲线证明BMSCs作为种子细胞的优越性;transwell立体共培养体系下,种子细胞BMSCs与NPs共培养下,分化成类髓核细胞,表达髓核细胞的生物特性;种子细胞诱导后的BMSCs接种于海藻盐凝胶体外建立工程组织髓核,体内移植有效抑制并修复兔髓核组织。结论:BMSCs的易取材与生物特性,在一定外界条件下,可定向分化以及其生长活跃,为其作为组织工程髓核种子细胞提供可能性;组织工程髓核体外构建并体内移植有效抑制椎间盘退变,并体内表达Ⅱ型胶原和多聚糖蛋白,为组织工程髓核临床应用提供可能。
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标签：组织工程论文; 髓核论文; 椎间盘退变论文; 海藻酸盐凝胶论文; 骨髓间充质干细胞论文;