不同光质对灵芝生长生理和有效成分的影响及灵芝抗氧化酶的开发研究

论文摘要

以飞船搭载的灵芝菌株为材料,研究不同光质对灵芝形态、灵芝多糖含量、抗氧化酶活性的效应,找出适于灵芝生长的最佳光质,为光质选择提供必要依据。对栽培灵芝进行不同光质处理,在灵芝不同生长发育时期观测其形态变化并测定抗氧化酶体系中主要酶活性。蓝色光质处理在现蕾期、开伞期、弹孢后期多糖含量均高于对照,且差异显著。红色光质处理孢子粉产量最高。蓝色光质处理POD、CAT活性均高于对照。蓝色光质处理提高了抗氧化酶的活性,对灵芝生长有利,表现为保护效应；同时蓝色光质处理可溶性蛋白含量在生长各时期均高于对照,在灵芝菌盖形成期可溶性蛋白含量最大,在开伞期可溶性蛋白质条带上Rf0.18和0.25处有其特征谱带。研究灵芝液体培养过程中pH值、菌丝体干重、SOD活性、蛋白质含量和灵芝多糖的变化趋势。在灵芝发酵过程中,灵芝菌丝体SOD比活力高于发酵液。菌丝体SOD比活力最大为99.36 U/mg,是发酵液SOD比活力的5.71倍。通过单因素实验确定产SOD适宜的培养基组成,淀粉为碳源时,灵芝发酵液产发SOD活力最高,SOD比活力为206.54 U/mg。以干酪素为氮源时,灵芝发酵液产发SOD活力最高,SOD比活力为228.47 U/mg。研究灵芝发酵液体外抗氧化作用。灵芝乙醇提取物有较好的清除羟基自由基能力,当提取物浓度达1 mg/ml时,清除率达90.06%,EC5o值为0.26 mg/ml。研究表明总酚含量与灵芝乙醇提取物清除羟基自由基能力密切相关。灵芝乙醇提取物总黄酮含量为11.82 mg/g,与还原能力呈正相关。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 文献综述
• 1. 光质对植物形态建成的影响
• 2. 光质对植物生长代谢影响
• 2.1 光质对氮代谢影响
• 2.2 光质对碳代谢影响
• 2.2.1 光质对碳水化合物调节作用
• 2.2.2 光质对光合色素形成调控
• 2.2.3 光质对植物光合速率和光合碳代谢的调控
• 2.3 光质对次生代谢产物影响
• 3. 光质对植物生理生化影响
• 4. 光质对真菌影响
• 4.1 真菌蓝光受体
• 4.2 光质对低等真菌的影响
• 4.3 光质对食药用菌的影响
• 5. 展望
• 参考文献
• 第一章 不同光质处理对灵芝生长发育过程中形态及有效成分的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.2.1 光质处理
• 1.2.2 灵芝不同生长阶段形态变化观测
• 1.2.3 灵芝产量的测定
• 1.2.4 灵芝多糖测定
• 1.2.4.1 样品的采集和处理方法
• 1.2.4.2 样品多糖含量的测定
• 1.2.5 采收灵芝孢子粉多糖及总三萜含量测定
• 1.2.5.1 灵芝孢子粉多糖含量测定
• 1.2.5.2 灵芝孢子粉总三萜含量测定
• 1.3 数据分析
• 2. 结果与分析
• 2.1 光质对不同生长时期灵芝形态的影响
• 2.2 不同光质条件下对灵芝子实体外观影响
• 2.3 光质对灵芝子实体和孢子粉产量的影响
• 2.4 光质对灵芝多糖含量的影响
• 2.5 不同光质处理灵芝孢子粉多糖含量的变化
• 2.6 不同光质处理灵芝孢子粉总三萜含量的变化
• 3. 讨论
• 参考文献
• 第二章 光质对灵芝生长抗氧化酶系统影响
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 处理方法
• 1.2.1 光质的处理
• 1.3 酶活性的测定
• 1.3.1 SOD活性测定
• 1.3.2 POD活性测定
• 1.3.3 CAT活性的测定
• 1.4 MDA及可溶性蛋白含量的测定
• 1.4.1 MDA含量测定
• 1.4.2 可溶性蛋白含量测定
• 1.5 可溶性蛋白质电泳
• 1.5.1 凝胶制备
• 1.5.2 样品溶液制备
• 1.5.3 电泳
• 1.5.4 固定染色
• 1.5.5 脱色
• 1.6 酯酶同工酶PAGE分析
• 1.6.1 凝胶制备
• 1.6.2 样品溶液制备
• 1.6.3 电泳
• 1.6.4 染色
• 1.7 数据分析
• 2. 结果与分析
• 2.1 不同光质条件下,不同生长发育期灵芝抗氧化相关酶的变化规律
• 2.1.1 SOD活性变化
• 2.1.2 POD活性变化
• 2.1.3 CAT活性变化
• 2.2 不同光质条件下,不同生长发育期灵芝MDA及可溶性蛋白变化
• 2.2.1 MDA含量变化
• 2.2.2 可溶性蛋白含量变化
• 2.2.3 蛋白质电泳结果
• 2.3 不同光质处理灵芝酯酶同工酶变化
• 3. 讨论
• 参考文献
• 第三章 灵芝液体培养其SOD、多糖及蛋白质变化研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 供试菌株
• 1.2 液体培养基（1L）
• 1.3 试验方法
• 1.3.1 发酵液pH测定
• 1.3.2 菌丝干重测定
• 1.3.3 SOD粗酶液制备
• 1.3.4 SOD活性测定
• 1.3.5 灵芝多糖含量测定
• 1.3.6 蛋白质含量测定
• 2. 结果与分析
• 2.1 发酵液pH值变化
• 2.2 灵芝菌丝体生物量变化
• 2.3 灵芝发酵液SOD活性及蛋白质含量变化
• 2.4 灵芝菌丝体SOD活性及蛋白质含量变化
• 2.5 灵芝发酵液和菌丝体SOD比活力比较
• 2.6 灵芝发酵过程中灵芝多糖含量变化
• 3. 讨论
• 参考文献
• 第四章 灵芝产SOD发酵培养基优化研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 供试菌株
• 1.2 液体培养基（1L）
• 1.3 试验方法
• 1.3.1 发酵液pH测定
• 1.3.2 菌丝干重测定
• 1.3.3 SOD粗酶液制备
• 1.3.4 SOD活性测定
• 1.3.5 蛋白质含量测定
• 1.4 灵芝液体培养产SOD碳源和氮源筛选
• 1.4.1 供试碳源培养基
• 1.4.2 供试氮源培养基
• 2. 结果与分析
• 2.1 不同碳源培养条件下灵芝液体发酵培养性状
• 2.2 不同氮源培养条件下灵芝液体发酵培养性状
• 2.3 不同碳源、氮源发酵液pH变化
• 2.4 不同碳源、氮源菌丝体生物量变化
• 2.5 不同碳源、氮源发酵液SOD活性变化
• 2.6 不同碳源、氮源菌丝体SOD活性变化
• 2.7 不同碳源、氮源培养灵芝发酵液及菌丝体蛋白质变化
• 2.7.1 不同碳源培养灵芝发酵液及菌丝体蛋白质变化
• 2.7.2 氮源培养灵芝发酵液及菌丝体蛋白质变化
• 2.8 不同碳源、氮源培养灵芝发酵液及菌丝体SOD比活力变化
• 2.8.1 不同碳源灵芝发酵液及菌丝体SOD比活力变
• 2.8.2 不同氮源灵芝发酵液及菌丝体SOD比活力变化
• 3. 讨论
• 参考文献
• 第五章 灵芝液体发酵提取物抗氧化研究
• 1. 试验方法
• 1.1 灵芝液体培养（1L）
• 1.2 灵芝发酵液处理
• 1.3 抗氧化活性测定指标
• 1.3.1 对羟基自由基的清除作用
• 1.3.2 超氧阴离子自由基清除试验
• 1.3.3 还原力
• 1.3.4 总多酚含量
• 1.3.5 总黄酮含量测定
• 1.4 统计分析
• 2. 结果与分析
• 2.1 羟基自由基的清除能力
• 2.2 对超氧阴离子自由基的清除结果
• 2.3 灵芝液体发酵提取物还原力能力
• 2.4 灵芝液体发酵提取物总酚含量
• 2.5 灵芝液体发酵提取物总黄酮含量
• 3. 讨论
• 参考文献
• 第六章 结论
• 致谢
• 作者简介与发表文章