nm23、Fas/Fas-L蛋白表达与结直肠癌浸润转移的相关性

论文摘要

目的:结直肠癌是常见的恶性肿瘤,在经济发达国家如北美、欧洲等国,大肠癌往往是第1、2位常见的内脏恶性肿瘤,年发病率高达35～50/10万。在我国2000～2002年27个省、自治区、直辖市恶性肿瘤死亡抽样调查（约占同期人口10%）结果发现,结直肠癌发病率以4%的年增长率迅速升高,目前已占消化道肿瘤的第二位。结、直肠癌早期即可发生淋巴转移,是临床治疗失败的主要原因。目前认为,肿瘤转移特性分别受到肿瘤相关基因的调控。研究表明至少有十几种癌基因的上调或下降被证实可诱发或促进癌细胞的转移潜能,如肿瘤凋亡基因bcl-2、bax、p53、Fas/FasL等;肿瘤转移抑制基因nm23、KAII、KISSI、MKK4、BrMSI等。Nm23基因作为肿瘤转移抑制基因,在调节控制肿瘤转移表型的众多“转移抑制基因”中,最引人注目。近年来已分离出两个人的nm23DNA克隆,即nm23-H1和nm23-H2型。Nm23基因在某些高转移特性肿瘤细胞中,可以发生表达下降,等位基因缺失和基因突变。Fas抗原（AP0-1/CD95）与Fas配体（FasL）组成的Fas系统,在将凋亡信号转导入细胞内发挥重要作用。效应细胞FasL结合靶细胞Fas抗原后,在数小时内通过细胞凋亡途径使靶细胞死亡。近年来很多研究发现Fas在多种细胞表面均有表达,而FasL表达只限于少量细胞类型,诸如淋巴细胞、免疫特权器官的细胞和多种恶性肿瘤细胞。在多种肿瘤细胞出现Fas表达下调和FasL表达上调的现象,这与清除肿瘤浸润性淋巴细胞和抑制抗肿瘤免疫反应有关,参与了免疫逃逸。本研究用免疫组化的方法检测nm23、Fas/FasL在结直肠癌组织中的表达,探讨其与局部浸润,淋巴结转移的关系及临床意义。材料与方法:一、实验材料1.标本来源结直肠癌标本51例来自2007年11月-2008年2月在辽宁省肿瘤医院行结直肠癌手术切除的存档蜡块。男33例,女18例,年龄26-81岁,平均55.34岁;肿瘤部位:直肠33例,乙状结肠7例,横结肠5例,升结肠6例;大体类型:溃疡型31例,隆起型20例;组织类型:高分化20例,中分化28例,低分化3例;临床病理分期:Dukes’A期5例,Dukes’B期19例,Dukes’C期13例,Dukes’D期14例。所有病例术前均经肠镜、常规病理检查明确诊断为腺癌。排除多发癌和复发癌的病例。患者术前未接受放化疗及其他针对肿瘤的其他治疗。所有大肠癌病理标本均经10%中性福尔马林液固定,石蜡包埋、切片。并取9例癌旁距肿瘤5cm以上的正常结肠组织标本及44例经纤维结肠镜摘除的大肠腺瘤标本作对照研究。2.实验试剂试剂nm23、Fas/FasL鼠抗人单克隆抗体及S-P试剂盒,均为福建迈新试剂公司产品。二、实验方法:免疫组织化学染色:采用常规链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶连接（Streptavidin-Peroxidase,SP）免疫组化SP法以鼠抗人nm23、Fas/FasL即用型单克隆抗体作为一抗检测癌组织nm23、Fas/FasL蛋白的表达。Nm23蛋白表达以细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性细胞,Fas/FasL蛋白表达以细胞膜和（或）细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性细胞。采用半定量AB值法评分计算结果。三、统计学分析:用SPSS11.5统计学软件对率的分析采用χ2检验,对两因子相关性的分析采用χ2检验,双侧P <0.05具有统计学意义。结果:一、大肠肿瘤及正常上皮组织nm23、Fas/FasL的表达结直肠癌中nm23,Fas表达最低,其次是结肠腺瘤,表达水平最高的是正常结肠组织;FasL在不同结肠组织中的表达规律与Fas正好相反,结直肠癌组织中表达最高,其次是结肠腺瘤,正常组织中几乎不表达FasL。各组间nm23﹑Fas﹑FasL的表达差异均有统计学意义。二、Nm23、Fas/FasL表达与结直肠癌临床病理学特征的关系统计学示nm23,Fas/FasL的表达与结直肠癌患者的性别﹑年龄﹑肿瘤部位无关,与分化程度,浸润深度,淋巴结转移和Dukes’分期有关。三、结直肠组织nm23与Fas表达的协同性Nm23与Fas的表达在结直肠癌组织中有相关性。结论:一、Nm23、Fas/FasL系统蛋白在结直肠癌组织中的表达与在正常结肠组织、结肠腺瘤中的表达具有显著差异;二、Nm23、Fas/FasL蛋白表达与结直肠癌患者的性别年龄及肿瘤发生部位无关,而与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、Dukes’分期相关;三、Nm23与Fas的表达在结直肠癌组织中有相关性。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 附图
• （七） 讨论
• （八） 结论
• （九） 本文创新性的自我评价
• （十） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢