论文摘要
聚-β-羟基烷酸(PHA)是一类由微生物在生长受限的条件下合成的储藏性物质。它既具有与传统塑料相似的热塑性,又具有可降解性,是理想的石化塑料替代品。目前PHA已通过纯菌发酵方式实现商业化生产,但由于纯菌利用的底物价格昂贵,发酵设备又需灭菌处理,因此提高PHA的生产成本为石化塑料的4-9倍,较高的生产成本阻碍了其进一步推广应用。研究发现用于污水处理的活性污泥微生物能够合成PHA,且活性污泥可利用的底物种类丰富、来源广泛,培养设备不需灭菌,因此利用活性污泥生产PHA越来越多地受到人们的关注,并成为研究的热点。本课题主要针对活性污泥驯化培养和PHA生产两个阶段进行研究。首先在活性污泥的驯化阶段,比较了两种不同培养方式的驯化效果,确定较优方式,并在较优方式的培养下考察了碳源组成对驯化效果的影响。然后在PHA生产阶段,分别对比了利用三种碳源组成配水培养时不同氮、磷供给方式对PHA生产的影响,确定了较优方式,并进一步在较优供给方式培养下考察了碳源组成对PHA生产的影响。在对群落结构的研究中,采用16Sr DNA文库与T-RFLP技术对活性污泥中细菌种群结构进行了确定和分析。研究结果表明,针对活性污泥驯化阶段,本研究在单阶段驯化模式的基础上提出了双阶段驯化模式,通过对比驯化效果发现双阶段模式更适于培养高PHA合成能力的活性污泥。双阶段模式下乙酸的利用速率比单阶段模式提高了210%,污泥浓度增加了125%,PHA含量能在更短的时间内达到峰值。进水碳源组成不同导致驯化效果不同:进水乙酸钠浓度为20mM/L、丙酸钠浓度为10mM/L时,活性污泥合成PHA能力最强,PHA合成量为0.48g PHA/g碳源。针对PHA生产阶段,对直接降低氮、磷供给的方式进行改进,提出了逐渐降低氮、磷供给的方式;对比两种方式促进PHA积累的效果发现,逐渐降低方式的效果更显著,PHA含量提高到污泥干重的38.00%,而直接降低方式下最高PHA含量仅为12.02%。只利用乙酸钠为碳源生产的PHA中HV单体含量可达45.51%,这一结果较之前的报道有很大程度的提高;HV单体含量随进水中丙酸钠浓度的升高而增加,只利用丙酸钠为碳源时PHA中HV单体含量最高,占多聚物总量的81.50%。通过微生物群落结构分析发现,合成PHA活性污泥中的细菌大部分属于α-变形细菌纲,主要包括Alpha proteobacterium,Meganema perideroedes,Paracoccus sp.和Rhodobacteraceae bacterium等。随进水丙酸钠浓度的提高,前三种微生物的丰度逐渐增大,而Rhodobacteraceae bacterium的丰度逐渐减小。不同碳源培养体系中,微生物种群丰富度越小,PHA产量越高;培养活性污泥的配水碳源组成越接近,微生物群落结构越相似。
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