Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞与肺癌的临床和实验研究

论文摘要

肺癌的发生发展与机体的肿瘤免疫功能失调和肿瘤的免疫逃逸密切相关,其中一个重要的机制是调节性T细胞的产生,使肿瘤特异性T效应细胞不能扩增到一定水平以根除肿瘤。近年来研究发现,叉状头/翅状螺旋转录因子Foxp3特异表达于调节性T细胞,与其发育和功能成熟密切相关,在一定程度上可以反映调节性T细胞的水平和功能活性。目的通过检测肺癌患者外周血和肿瘤组织中转录因子Foxp3的表达水平,分析调节性T细胞与肺癌不同病理类型、肿瘤TNM分期和淋巴结转移以及手术治疗的关系,探讨其在肺癌肿瘤免疫调节中的作用及其临床意义。方法1.外周血单个核细胞（PBMC）分离和肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）分离分别采取肺癌患者手术前后和正常对照者的外周血,应用Ficoll密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞;收集新鲜肺癌组织标本并提取肿瘤组织中浸润淋巴细胞。2.利用RT-PCR法检测检测肺癌患者和正常对照者外周血、肿瘤组织中Foxp3的表达水平,分析其相关性。结果1.肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中Foxp3mRNA的相对表达量明显高于肺癌患者和正常对照外周血的相对表达量;而肺癌患者外周血中Foxp3mRNA的相对表达量较正常对照者也有明显升高。2.Foxp3mRNA的表达水平与肿瘤大小及肿瘤局部浸润程度有关,在不同病理类型肺癌患者外周血和肿瘤组织中,以小细胞肺癌患者表达量较高,其次是腺癌,鳞癌最低。TNM分期越晚、组织分化越低、淋巴结转移阳性组Foxp3mRNA的表达显著升高。3.术后患者Foxp3mRNA的表达水平显著降低。结论1.Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞介导的免疫抑制与肺癌的发生、发展和预后有关,手术切除肿瘤,可以减少体内的荷瘤环境和Treg细胞,解除对肿瘤免疫功能的抑制,有利于术后机体免疫功能的恢复。2.选择有效的肿瘤生物治疗方案,下调Foxp3基因的表达,降低Treg细胞的数量和功能,将有助于提高机体的抗肿瘤免疫,提高肺癌的治疗水平。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 实验材料
• 1.1 主要试剂
• 1.2 主要仪器
• 1.3 主要溶液及配制
• 1.4 试验器具的处理与准备
• 1.5 标本采集
• 第二章 实验方法
• 2.1 实验原理
• 2.2 实验操作方法、步骤
• 2.3 统计学处理
• 第三章 实验结果
• 3.1 细胞总RNA抽提结果
• 3.2 肺癌患者外周血和肿瘤组织中淋巴细胞Foxp3基因的表达
• 3.3 Foxp3mRNA表达与肺癌患者临床病理因素的关系
• 3.4 肺癌患者手术前后外周血Foxp3基因的表达
• 讨论
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 综述的参考文献
• 攻读学位期间发表的论文
• 附录
• 致谢