近年来NDV流行株F基因序列分析和NDV N88毒株单抗的初步研制

论文摘要

从2002-2004年期间不同地区的鸡新城疫病毒（NDV）野外分离株中选取10个有代表性的毒株,分别命名为YZ,ZJ,WX,FJ,BJ,BM,HA,SH,NT和LH。采用RT-PCR方法,分别扩增出这10个毒株的F基因重要功能区片段,构建克隆并进行序列测定,然后根据所得测序结果并参照已发表的NDV毒株的F基因序列绘制出遗传进化树。结果显示10个新城疫病毒分离株中8株为基因Ⅶ型,另2株为基因Ⅱ型。据此可初步认为目前基因Ⅶ型新城疫病毒在国内呈流行趋势。为了探索新城疫病毒疫苗株（基因Ⅱ型）与流行株（基因Ⅶ型）在抗原性上是否存在差异,我们采用疫苗株（Lasota）的克隆株N88毒株（基因Ⅱ型）经纯化后作为免疫原,免疫8周龄BALB/c小鼠试图制备一株单克隆抗体,以期能用于区分疫苗株和流行株。本试验应用淋巴细胞杂交瘤技术进行融合,经间接ELISA筛选,获得4株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞,分别命名为F12B7D6,F12H9F4,F12C7,G4E5E9。其中F12B7D6,F12H9F4,F12C7三株单抗与NDV基因Ⅰ型、基因Ⅲ型、基因Ⅵ型、基因Ⅶ型毒株均反应;单抗株G4E5E9与NDV基因Ⅰ型、基因Ⅲ型、基因Ⅵ型、基因Ⅶ型鹅源YG97毒株和基因Ⅶ型鸡源YG98均不反应,但与基因Ⅶ型的鸡源的SX毒株和YG毒株呈阳性反应。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 符号说明
• 研究一:近年来NDV流行株F基因序列分析
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 研究二:NDVN88 毒株单抗的初步研制
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 参考文献
• 致谢