论文摘要
目的：研究SYT-SSX融合基因不同亚型在滑膜肉瘤中的表达情况，探讨它们与滑膜肉瘤临床病理资料的关系，并从蛋白质水平研究不同融合基因类型之间在某些细胞周期因子表达上的差异，从而为进一步探索融合基因的作用机制提供实验依据。方法：选取天津医科大学附属肿瘤医院1974-2005年收治的滑膜肉瘤患者中SYT-SSX融合基因表达阳性的病例54例，提取石蜡包埋组织中的RNA，通过逆转录-聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）检测SYT-SSX亚型的表达，并比较SYT-SSX1、SYT-SSX2的表达与临床病理参数之间的关系。筛选和复查切片，选择典型区域，并在相应的蜡块上标记靶点。用组织芯片制作机在受体蜡块上进行打孔，制作组织芯片。使用免疫组织化学染色的方法检测不同类型融合基因Ki-67、CyclinD1、CDK4、p21、p27的表达情况。计数方法如下：选择有代表性的10个高倍视野，每个视野计数100个肿瘤细胞，使用阳性细胞指数来评价整张切片的染色状况。应用SPSS11.5统计学软件对所有结果进行计数资料的正态性检验、方差齐性检验和t检验，比较这些细胞周期相关蛋白在SYT-SSX1和SYT-SSX2阳性病例中的表达差异，并同时分析这些细胞周期蛋白之间的关系，以P＜0.05，差别具有统计学意义。结果：（1）54例滑膜肉瘤患者中，男性28例，女性26例，男女比例1.08：1，年龄9～70岁，平均年龄36.91岁，中位年龄33.00岁。最大径1～29cm，平均最大径7.25cm,中位值5.00cm。发生于四肢的患者为37例，躯干及近躯干部为17例，比例为2.18：1。研究显示表达不同融合基因类型的患者性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤大小之间差别无统计学意义（P＞0.05）。（2）54例滑膜肉瘤患者中，单相型患者33例，双相型患者13例，分化不良者8例，以单相型多见（61.10％）。组织学分级为Ⅱ级和Ⅲ级的肿瘤分别为24例（44.44％）和30例（55.56％）。54例患者中Ⅰ～Ⅱ期患者19例（35.19％），Ⅲ～Ⅳ期患者35例（64.81％）。SYT-SSX1与SYT-SSX2在不同组织学类型肿瘤中的表达具有显著差异（P＜0.05），但与组织学分级、临床分期之间无明显关系（P＞0.05）。（3）54例滑膜肉瘤患者中SYT-SSX1与SYT-SSX2阳性滑膜肉瘤患者Ki-67表达存在显著差异（P＜0.05），前者的Ki-67阳性指数明显高于后者。（4）54例SYT-SSX1与SYT-SSX2阳性滑膜肉瘤患者之间CyclinD1和CDK4表达存在显著差异（P＜0.05，P＜0.05），前者的CyclinD1和CDK4阳性指数明显高于后者。所有SYT-SSX1与SYT-SSX2阳性滑膜肉瘤患者p21和p27表达存在显著差异（P＜0.05，P＜0.05），前者的p21和p27阳性指数明显高于后者。（5）全部病例的CyclinD1表达阳性细胞指数与CDK4、P21表达阳性细胞指数之间，p21与p27表达阳性细胞指数都呈现线性相关（P＜0.05），但是CyclinD1表达与p27之间不呈现线性相关（P＞0.05）。结论：（1）组织学分型与不同的融合基因类型具有明显的相关性。SYT-SSX1型患者更多表现为双相分化型滑膜肉瘤，而SYT-SSX2型患者则较多表现为单相分化，提示SYT-SSX1型融合基因可能促发某种机制而导致肿瘤干细胞向上皮方向分化；（2）SSX1型滑膜肉瘤患者具有较高的Ki-67阳性指数，与SYT-SSX2型患者相比，SSX1型患者的肿瘤具有更强的增殖能力；（3）SSX1型的融合基因表达更多的CyclinD1／CDK4，而表达较少的抑制肿瘤的CDI家族p21，p27，提示可能是因为SSX1促发了某种转录机制使得细胞更多的进入细胞周期而获得恶性表型，并且逃离细胞增殖的监督机制。