论文摘要
近年来,由于化学杀虫杀螨剂的广泛使用带来的严重的“3R”问题（residual残留,resistance抗性,resurgance再猖獗）已经引起全社会的关注。随着人们健康环保意识的增强,对人畜及环境相对安全、低毒、不致残留、不易产生耐药的天然源药物成为杀螨剂发展的主导方向。本文以23味常用于杀螨的中药进行杀螨活性筛选,并对丁香有效部位提取物进行处理,研制一种绿色环保高效的透皮制剂。本课题研究内容包括:中约杀螨活性初步筛选,丁香活性部位筛选,丁香有效部位提取物透皮制剂的研制及体外渗透性评价,丁香有效部位提取物透皮制剂的稳定性、皮肤急性毒性及刺激性评价和该制剂杀兔螨效果比较。取得了以下结果:1、中药杀螨活性初步筛选:采用点滴法离体杀螨试验观察了23味中药医用酒精索氏提取物对家兔痒螨（P.communis cuniculi）成虫的杀灭活性。试验结果表明,50%浓度的丁香提取物具有明显的杀螨活性,可在20min以内杀死全部供试螨虫,其余杀螨活性不显著,其中枳实、大枫子、地骨皮等7味中药医用酒精索氏提取物无杀螨活性。2、丁香有效部位筛选:用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、蒸馏水五种溶剂对丁香进行部位提取,采用离体杀螨试验观察各部位提取物的杀螨活性。试验建立了HPLC-UV法以测定丁香中丁香酚的含量,采用L6（34）正交试验设计,考察提取时间、溶媒量、溶媒浓度三个因素对丁香中丁香酚含量的影响并以此判断较好的提取工艺。结果表明:丁香乙醇提取物14.3min、石油醚提取物115min、氯仿提取物82min、乙酸乙酯提取物53min左右可杀死全部供试螨虫,而蒸馏水提取物不具备杀螨活性。其中丁香乙醇提取物杀螨活性最为突出,是丁香的主要杀螨活性部位。而乙醇提取丁香中丁香酚的最佳条件是:乙醇浓度为85%,料液比为1:15和提取时间为6小时,结果还表明杀螨效果与丁香乙醇提取液中丁香酚的含量呈正相关。3、丁香有效部位提取物透皮制剂的研制及体外渗透性评价:试验建立了HPLC-UV法以测定丁香溶液性透皮释药系统中丁香酚的含量。利用建立的HPLC-UV法和经典的体外渗透实验法,进行了促渗透剂的筛选和体外渗透性试验。试验采用正交设计,单室Franz扩散池,池内温度为37±0.5℃,磁力搅拌速度约200r.min-1,小白鼠离体皮肤作透皮介质。结果:2%冰片,4%丙二醇与1%氮酮混合作该制剂的三元促渗剂,其体外渗透率最高,其渗透速率为19.874gg/h.cm2。按10cm2的皮肤面积给药1.0mL,16h后丁香酚的渗透量为807.694μg,能够满足临床治疗剂量的需要。4、丁香有效部位提取物透皮制剂的稳定性、皮肤急性毒性及刺激性评价:采用经典恒温加速试验研究该透皮释药系统的稳定性,按初均速法计算主药降解反应的初均速率。试验考察了该透皮释药系统外用于家兔完整皮肤以及破损皮肤的刺激性及急性毒性。试验表明,该透皮释药系统在室温条件下的有效期为26个月,基本可以满足生产、储存、运输及使用的需要。外用于家兔完整皮肤无刺激性,破损皮肤仅具有轻度刺激性,无急性毒性。5、丁香有效部位提取物透皮制剂杀兔螨效果比较:临床评价采用对自然感染螨病的家兔进行离体杀螨试验和兔体杀螨效果观察试验,试验考察了丁香溶液性透皮释药系统（高、中、低剂量）透皮给药与阳性对照组（10mg/mL阿维菌素注射液）比较。试验结果表明,丁香溶液性透皮释药系统（高、中剂量）对离体杀螨和兔体杀螨效果与10mg/mL阿维菌素注射液杀螨有效率相当,均在92.6%以上,试验期间未见不良反应。