NOS、NO、ET-1及TGF-β1在甲状腺功能亢进大鼠心肌组织中的表达及意义

论文摘要

目的:通过对一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）、一氧化氮（nitric oxide,NO）、内皮素-1（endothelin-1,ET-1）及转化生长因子β1（transforming growth factor beta1,TGF-β1）在甲状腺功能亢进症（简称甲亢,Hyperthyroidsm,TH）大鼠心肌组织中的表达及动态变化的观察,探讨以上因子在甲亢性心脏损伤发病过程中的作用及意义,以及它们之间的关系。方法:通过给予左甲状腺素钠（L-T4,商品名为优甲乐）连续灌胃的方法制作甲亢大鼠模型,期间所有大鼠均自由进食水,在25天、45天、60天分批宰杀对照组（分别为A1、A2、A3组）和甲亢组（分别为B1、B2、B3组）,动态观察大鼠心肌组织的病理改变及损伤情况,并通过酶法测定心肌组织中NOS、NO的含量及免疫组化方法观察ET-1、TGF-β1的表达。结果:1症状及体征:对照组大鼠进食水情况、精神状态、大小便情况及日常活动均正常且三组之间无明显变化。对照大鼠平均体重稳定增加。甲亢组大鼠饮食、饮水较对照组明显增加,大便呈糊状,并含有不消化食物;毛色无光泽,大部分出现严重的脱毛现象;活动增加、惊恐躁动、易受激惹及肌肉细微震颤等,体重与同期对照组相比均显著减轻（P <0.05）。2甲状腺功能测定:甲亢组B1、B2、B3的FT3、FT4均较同期对照组显著升高（P<0.01）,且随着病程的延长进行性升高, TSH均较同期对照组显著降低（P<0.01）并随着病程的延长进行性下降。3血生化检测结果:心肌酶:甲亢组大鼠CK、CK-MB、AST均较同期对照组显著升高（P<0.01）,且随着病程的延长,呈进行性升高;LDH、α-HBDH在B1组较对照组升高,但无统计学意义,LDH在B2组较对照组显著升高（P<0.05）,在B3组其升高更显著（P<0.01）,α-HBDH只在B3组较对照组显著升高（P<0.05）。4心脏重量及心脏重量指数（心重/体重,HW/BW）的测定:甲亢组大鼠心脏重量在B1组较同期对照组有所增加,但无统计学意义,B2、B3组心脏重量较对照组显著增加（P<0.01）;HW/BW在B1组较同期对照组显著增加（P<0.01）,B2、B3组其变化更加明显。5心肌病理改变:光镜下观察:对照组大鼠心肌纤维排列规则,结构清晰,细胞核染色质均匀分布,核呈椭圆形,心肌细胞之间排列紧密,细胞核致密,大小形状规则,间质中血管壁细胞呈单层排列且规则;甲亢组大鼠心肌细胞排列紊乱,心肌细胞肥大,胞浆淡染,细胞核明显增大松散,细胞浊肿,心肌间结缔组织增生,心肌纤维有断裂现象,分支增多,间隙增宽,间质中血管壁增厚,中性粒细胞、淋巴细胞浸润,间质充血。6心肌组织中NOS、NO的测定:甲亢组大鼠心肌组织中NO、结构型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,cNOS）、诱导型一氧化氮合酶（induced nitric oxide synthase,iNOS）的表达在B1组较同期对照组无明显变化（P>0.05）。NO、cNOS从B2组起较对照组显著降低（P<0.01）,且随病程延长进行性降低,iNOS从B2组起较对照组显著升高（P<0.05）,B3组升高更明显（P<0.01）。7免疫组化测定结果:甲亢组大鼠心肌中ET-1的表达在B1组较同期对照组显著增强（P<0.05）,B2、B3组时其改变更加显著（P<0.01）;甲亢组大鼠心肌中TGF-β1的表达在B1组较对照组虽有所增强,但无统计学意义,B2、B3组较同期对照组表达显著增强（P<0.01）。8甲状腺功能与心肌酶,心脏重量及心肌组织中表达因子的直线相关分析结果:CK、CKMB、AST均与FT3、FT4呈显著正相关（P<0.01）,与TSH呈显著负相关（P<0.01）;LDH与FT3、FT4呈显著正相关（P<0.01）,与TSH呈显著负相关（P<0.05）,α-HBDH只与FT4呈明显正相关（P<0.05）,而与FT3、TSH无明显相关性。HW/BW与FT3、FT4呈显著正相关（P<0.01）,与TSH呈显著负相关（P<0.01）。NO、cNOS与FT3、FT4呈显著负相关（P<0.01）,与TSH呈显著正相关（P<0.01）;iNOS与FT3、FT4呈显著正相关（P<0.01）,与TSH呈显著负相关（P<0.05）。ET-1、TGF-β1均与FT3、FT4呈显著正相关（P<0.01）,与TSH呈显著负相关（P<0.01 ）。9其他直线相关分析结果:CK、CK-MB、AST、LDH与ET-1、TGF-β1（平均灰度值）均呈显著负相关,α-HBDH与ET-1、TGF-β1均无相关性。HW/BW与ET-1、TGF-β1（平均灰度值）均呈显著负相关。NO、cNOS与ET-1、TGF-β1（平均灰度值）呈显著正相关,iNOS与ET-1、TGF-β1（平均灰度值）呈显著负相关;ET-1、TGF-β1之间存在显著正相关性（P<0.01）。结论:本实验通过给予左旋甲状腺素灌胃法建立甲状腺功能亢进大鼠模型,模型组灌胃后出现甲亢症状,同时甲状腺功能检查也符合甲亢的特点,并随着甲亢病程的进展,出现了心脏损伤,表现为心肌肥厚、心脏重量增加、HW/BW比值增加和心肌酶的升高。随着甲亢病程的延长,心脏损伤进行性加重,通过动态观察心脏组织形态、血清心肌酶学、心肌组织中NO、NOS、ET-1及TGF-β1的表达变化及相关分析,表明NO、NOS、ET-1及TGF-β1等因子在甲亢性心脏损伤的发生过程中起着重要的作用,且它们之间也存在着联系,使他们相互作用,共同促进病程的发展。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 NOS、NO、ET-1 及 TGF-β1 在甲状腺功能亢进大鼠心肌组织中的表达及意义
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 内皮素、血管紧张素Ⅱ、转化生长因子β1与心肌肥厚关系进展
• 致谢
• 个人简历