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外燥致病机制的实验研究

2020-11-23阅读(761)

外燥致病机制的实验研究

论文摘要

本研究的理论基础及指导思想 “秋伤干燥”、“燥气先伤于华盖”、“燥胜则干”等经典理论均指出燥邪特点其形成与时令有关。后世论燥，或描其象，或述其性，其文又散在于少数名家精选病案之中，宏观的理论框架与缺乏系统的科学依据对其病因病机的精细阐析，成为对六淫之燥邪病因病机研究的重点问题之一。查阅近30年国内外文献资料，未见对外燥致病机理的系统实验研究和对温燥与凉燥“温度-湿度”空间量化指标的研究报道。如何运用多学科的现代科学理论与技术，模拟符合中医六淫病因理论中关于外燥之温度、湿度等空间量化指标，在此基础上探索建立外燥动物模型和开展更深入的研究，更是外燥病因病机研究中的“敏感性”课题之一。完整地模拟某个季节气候及变化以研究与疾病的关系是困难的，选择一个较小的时间段如一个季节，结合多学科理论与技术，是研究时令性疾病的有效途径之一。 本课题在《内经》“天人相应”指导下，遵循《内经》外燥致病的理论和后世名家思想与学说，在对外燥病邪进行理论回顾的基础上，根据气象学中“候平均气温”、“季平均温度”，拟以具有典型大陆气候特征的华中地区的郑州秋季之平均温度和相对湿度，结合现代免疫学、医学微生物学、分子生物学、血液流变学、组织病理学等理论与技术，首次模拟六淫燥邪之温燥与凉燥的“温度-湿度”量化空间并筛选相应指标，探索初步建立外燥小鼠模型；以检测“肺系”生理功能为主要切入点，选择反映外燥对“肺系”生理功能影响的相关指标，开展呼吸道液黏多糖与“肺津生成”、气道纤毛运动试验与“纤毛-黏液毯”生物防御屏障与气道免疫功能、血液流变学与“津血同源”及“燥胜则干”、气道细胞凋亡与bcl-2、bax基因表达、对细菌攻击的敏感性、气管、肺与皮肤病理组织学，以及经典方剂对温燥与凉燥的治疗效应等综合性研究，旨在为阐析外燥伤肺、伤津、“燥胜则干”之病因病机宏观理论框架提供科学实验根据，填补外燥病因病机系统性实验研究的“空白”，丰富六淫燥邪病因理论，为研究治疗秋燥之经典方作用机制提供基础模型和量化检测指标，具有理论创新和临床指导意义。 1 材料 1．1 实验动物：昆明种小鼠（SPF级），体重18±1g，雌雄各半，湖北省实验动物中心提供，许可证号：SCXK（鄂）2003-2005。 1．2 标准细菌菌株：金黄色葡萄球菌（ATCC 25923，北京天坛生物制品公司）。 1．3 主要仪器：LRH-250人工智能气候箱（温度：30-65℃±1℃，相对湿度：30％-90％±5％，广东医疗器械厂）；MASTER-K30H风扇程控仪（韩国Best机电有限公司），XSJ-D恒温倒置显微镜（重庆），紫外分光光度计（756MC，上海精密科学仪器有限公司），-85℃低温冰箱（VXE380，法国），酶标检测仪（KHB ST-360，上海），FASCO-全自动血液流变仪（重庆南方医疗设备公司），细菌菌落计数器（JLQ-S，江苏），图像分析系统（HPIAS-1000，华中科技大学同济医学院提供）。 1．4 主要试剂：咔唑（054K078，Sigma公司）、D-葡萄糖醛酸内酯（2711EC，Sigma公司）、羊抗鼠IgG ELISA试剂盒（华美生物工程公司，200501）、TUNEL试剂盒（MK1020）、Bcl-2兔IgG多抗（BA0412，200503）、bax兔IgG多抗（BA0315，200503）、各阳性对照片均购自武汉博士德生物工程有限公司，有效期内使用。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 英文缩略语表
  • 前言
  • 第一部分 理论探讨
  • 1.本课题的理论基础及指导思想
  • 2.外燥的概念
  • 3.燥气为自然界正常“六气“之一
  • 4.外燥与季节
  • 5.外燥致病特点与病证辨治
  • 6.外燥研究现状
  • 7.本课题的研究思路和意义
  • 第二部分 实验研究
  • 实验一 外燥对小鼠气管、肺与皮肤影响的病理学观察
  • 实验二 外燥对小鼠气管纤毛运动与呼吸道液分泌的影响
  • 实验三 外燥对小鼠血清与呼吸道液抗体的影响
  • 实验四 外燥对小鼠血液流变学的影响
  • 实验五 外燥对小鼠气管上皮细胞凋亡与bcl-2及bax基因表达相关性
  • 实验六 细菌攻击对外燥小鼠的影响
  • 实验七 桑杏汤对温燥小鼠的影响
  • 实验八 杏苏散对凉燥小鼠的影响
  • 结果与讨论
  • 一.外燥小鼠动物模型的评价
  • 1.《内经》对本课题研究的理论依据
  • 2.现代气象医学理论与模拟秋燥气候指标评价
  • 3.人工模拟外燥环境的技术条件选择
  • 4.对实验小鼠品系的选择与评价
  • 5.外燥致病的组织病理学证据
  • 二.选择外燥伤肺检测指标的意义与评价
  • 1.RS与IS和皮肤检查与肺“输布津液”功能
  • 2.气管纤毛运动和抗体与气道局部防御屏障
  • 3.生物病原攻击敏感性与燥邪病机相关性
  • 4.血液流变学与“津血同源”及“燥胜则干”理论
  • 5.气道细胞凋亡和bcl-2、bax基因表达与外燥分子致病机制
  • 6.经典方对外燥小鼠的治疗效应
  • 三.对外燥伤肺病因病机研究结论与意义
  • 参考文献
  • 附一 历代医家对外燥论述摘要
  • 附二 外燥病因病机之理论探讨
  • 附三 博士学位期间发表的学术论文
  • 附图
  • 致谢

    • 相关论文文献

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    • [4].外燥对两种品系小鼠气管纤毛运动影响的意义评价[J]. 时珍国医国药 2012(07)
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