导读:本文包含了氨基丁酸转氨酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:DART-MS,家蚕组织,ALT活力,桑叶成分
氨基丁酸转氨酶论文文献综述
李无双[1](2018)在《家蚕中谷丙转氨酶活力及桑叶中荞麦碱、γ-氨基丁酸含量的快速直接质谱分析》一文中研究指出谷丙转氨酶(ALT)是家蚕体内一种重要的氨基酸代谢酶,可将谷氨酸转化为丙氨酸(桑叶中含量较低,而蚕丝中含量高达30%),从而影响家蚕丝蛋白的产量。桑叶因含有生物碱类、氨基酸类等多种药理成分,从而具有丰富的生理活性。荞麦碱(fagomine)是桑叶中的一种多羟基哌啶类生物碱。因具有降血糖等生物活性,fagomine不仅用于治疗疾病,更可作为膳食补充剂和功能性食品。γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid,GABA)是桑叶中的重要成分,属于非蛋白质氨基酸。GABA具有降血压、治疗神经退行性疾病等诸多生理活性。实时直接分析(Direct analysis in real time,DART)电离源,是一种非表面接触、热解析、等离子体电离技术,可在大气压环境中实现原位、直接和快速的样品分析。由于众多检测方法存在有待改进之处,基于DART离子源的各种优势,本研究旨在建立新方法(实时直接分析电离源串联质谱法,即DART-MS法),用于测定家蚕组织中的ALT活力、桑叶中的fagomine以及GABA。不仅可以丰富各成分的测定方法,也为DART离子源在家蚕及桑叶的深入研究中提供了实验依据。1.本研究建立了用于测定五龄家蚕组织中的ALT活力的方法(DART-MS法),并与传统方法(赖氏法)作了对比分析。首先对影响DART离子源分析物质的参数进行了优化。讨论了丙氨酸在DART-MS下的质谱行为:正离子模式下,丙氨酸标准品有两个特征离子m/z 90[M+H]~+和m/z 179[2M+H]~+;进行二级质谱分析后,m/z 90只得到的m/z 44.3[M+H-HCOOH]~+;负离子模式下,所得质谱图背景复杂、杂质峰多,且响应强度低;因此选择正离子模式、选取m/z 90→m/z 44.3作为定量离子对,在SRM模式下进行实验。DART-MS法所得的标曲线性良好,精密度(RSD%)分别为5.10%、4.61%和10.90%,加标回收率在97.61%-112.07%范围内。对比两种方法发现,DART-MS法所测结果与赖氏法呈现高度一致,表明DART-MS法是一种可靠的用于测定家蚕组织中ALT活力的方法。2.本研究建立了一种DART-MS法以定性及定量分析桑叶中的fagomine的方法。在预实验部分优化了质谱和DART离子源的条件。在正、负离子模式下,对fagomine标准品进行全扫,通过质谱图发现,正离子模式下的质谱图响应强度更高,且无杂志峰;结合二级质谱分析,最终选取m/z 148→m/z 130作为定量离子对,在SRM模式和正离子模式下进行后续操作。对桑叶提取物和fagomine标准品进行全扫和二级质谱分析,发现二者的质谱图中可观察到相同的离子峰,且具有类似的相对丰度,由此判定桑叶提取物中的离子m/z 148即为[Fagomine+H]~+。DART-MS法的方法学验证结果:标曲线性良好;精密度(RSD%)分别为2.46%、4.17%、4.92%;加标回收率在88.75%-98.50%之间。此外,使用DART-MS法对江浙皖不同产地的8种桑叶中的fagomine进行定量分析。3.本研究建立了使用DART-MS对桑叶中GABA含量进行定性和定量检测的方法。首先优化了质谱和DART离子源参数。GABA标准品的正、负离子模式下的全扫质谱图证实,正离子模式的效果更佳;同时二级质谱图表明,m/z 87为主要碎片峰,因此选取m/z 104→m/z 87作为定量离子对,在SRM模式下进行实验。通过比较桑叶提取物和GABA标准品的全扫及二级质谱图发现,二者具有相同的碎片离子以及响应强度;因此,我们判定桑叶提取物中的离子m/z104即为[GABA+H]~+。经方法学验证,DART-MS法的标曲线性良好,RSD%为3.98%、5.60%、2.28%,加标回收率位于85.60%和97.47%范围内。此外,还利用DART-MS法测定了不同产地的6种桑叶中的GABA含量。ALT的转氨基作用可影响家蚕丝蛋白的合成,我们建立的新方法测定家蚕组织中的ALT活力对于家蚕产丝量及蚕桑效益有重要意义。相比于赖氏法,DART-MS法更为环保,不仅可以实时监测酶反应进程,而且可快速测定酶活力。桑叶中的fagomine和GABA由于具有丰富的生理活性,已应用于各大领域。本文所建立的DART-MS法无需繁杂冗长的样品前处理过程,在很大程度上避免了时间和资源的浪费,且可对样品进行快速、直接、高通量以及高灵敏度分析。由DART-MS测定的桑叶中的fagomine和GABA含量可知,不同省份地区的桑叶中二者的含量存在差异,我们推断这可能与桑叶的品种以及产地的土壤、温度、湿度等环境因素有关。(本文来源于《江苏科技大学》期刊2018-04-25)
李碧,方雄,龚晏,张晨泽,闫文强[2](2016)在《γ-氨基丁酸转氨酶抑制剂筛选方法的建立及其在天麻成分筛选中的应用》一文中研究指出目的建立以γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)抑制剂类抗癫痫神经系统药物筛选模型,并运用此模型对天麻有效成分及其类似物进行体外活性筛选和构效关系分析。方法优化酶催化反应温度、反应时间、底物NAD+浓度、底物α-酮戊二酸浓度、底物γ-氨基丁酸(GABA)浓度等因素建立GABA-T酶系活性筛选模型,采用对羟基苯甲醛(HBA)及其11种结构类似物验证模型可靠性。结果成功构建GABA-T酶系抗癫痫活性筛选模型,HBA及11个结构类似物测定结果与文献报道抗癫痫作用相一致,且构效分析发现-OH及苯环对位上的-CHO为必需药效团。结论建立的模型可应用于GABA-T酶抑制剂的高通量筛选,为GABA-T酶抑制剂类抗癫痫活性成分的筛选及其作用机制研究提供参考。(本文来源于《中草药》期刊2016年03期)
周露,沈贝贝,白苏阳,刘喜,江玲[3](2015)在《以RNA干扰γ-氨基丁酸转氨酶1基因(OsGABA-T1)表达提高稻米γ-氨基丁酸(GABA)含量》一文中研究指出γ-氨基丁酸(GABA)是一种四碳非蛋白质氨基酸,具有降血压等功能。为提高稻米中GABA含量,利用RNA干扰技术,构建水稻中GABA代谢关键酶GABA转氨酶1基因(Os GABA-T1)的干扰载体,通过农杆菌介导法,将其转化至粳稻品种宁粳1号中。实时荧光定量PCR检测结果表明导入的RNA干扰结构成功地降低了目的基因Os GABA-T1的表达,且干扰家系中Os GABA-T2基因表达也随之下降。对转基因T3代稻米GABA含量测定发现,糙米中GABA含量相对于对照增加了13倍以上,精米中GABA含量也显着增加,而其他主要氨基酸含量则没有明显变化。测定储藏4个月的转基因稻米发现,GABA含量仍具有较高水平。所以,利用RNA干扰技术可有效提高稻米γ-氨基丁酸(GABA)含量,为培育富含GABA的降血压功能性水稻品种提供基础。(本文来源于《作物学报》期刊2015年09期)
秦思,金荣疆,文超,袁可竹,代宇[4](2015)在《针刺治疗脑卒中后肢体痉挛调控氨基丁酸转氨酶的研究进展》一文中研究指出脑卒中后肢体偏瘫是脑血管疾病常见的临床症状之一,不仅限制关节运动,而且还严重影响患者的生活质量。针刺疗法是治疗脑卒中后肢体痉挛的主要方法,前期有研究证实针刺对γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)及其受体功能有重要调节作用。本文假设以GABA消除的相关因素为主要靶点,应用阴阳跷脉理论,将跷脉"阴缓而阳急、阳缓而阴急"的致病特点与现代医学痉挛的产生及缓解机制相结合,提出针刺跷脉腧穴可能是通过影响氨基丁酸转氨酶(aminobutyric aminotransferase,GABA-T)对GABA突触间信号传递的精确调控实现的假说。(本文来源于《社区医学杂志》期刊2015年07期)
陈亮,王鑫,冯心池,邸欣[5](2015)在《分子对接技术筛选石菖蒲中γ-氨基丁酸转氨酶抑制成分》一文中研究指出目的从石菖蒲药材中筛选抑制γ-氨基丁酸转氨酶(gamma aminobutyric acid-transaminase,GABA-T)的活性成分,拓展虚拟筛选技术在中药药效物质基础研究中的应用。方法从文献中收集石菖蒲药材已知的化学成分群,采用分子对接的方法,筛选石菖蒲药材的化学成分群以辨识GABA-T抑制剂。结果以阳性对照药氨己烯酸的打分函数值为阈值,筛选出化学成分群中9种与GABA-T结合较好的化学成分。结论基于分子对接的虚拟筛选方法可快速筛选石菖蒲药材中GABA-T抑制活性成分,研究结果为石菖蒲抗癫痫药效物质基础研究提供了理论参考。(本文来源于《沈阳药科大学学报》期刊2015年03期)
刘建,朱德锐,李逸,李丹丹,李耀东[6](2013)在《青海湖盐单胞菌QHL1 ectABC基因簇克隆鉴定及二氨基丁酸转氨酶基因ectB的异源表达》一文中研究指出从青海湖20份水样筛选得到一株优势中度嗜盐菌QHL1,经初步鉴定为盐单胞菌属。设计保守基因ectB的引物,以基因组DNA为模板,PCR扩增获得ectB基因(1269 bp)。利用染色体步移技术,克隆获得四氢嘧啶合成基因簇ectABC及其上下游调控序列。DNAStar软件分析表明ectA、ectB和ectC位于同一个操纵子上,大小分别为579 bp、1269 bp和390 bp,预测分别编码192、422和129个氨基酸的肽链。同源性分析表明:Halomonas sp.QHL1ectABC基因簇所编码的二氨基丁酸转乙酰基酶(EctA)、二氨基丁酸转氨酶(EctB)和四氢嘧啶合成酶(EctC)与Halomonas sp.Nj223 ectABC基因簇所编码的酶蛋白相似性分别达57%、96%和85%。利用分子克隆技术构建二氨基丁酸转氨酶基因ectB的重组表达载体pET-28-ectB,通过限制性内切酶酶切和测序分析,结果表明其目的基因的插入位置、大小和读码框均正确。诱导表达重组菌,SDS-PAGE分析,目的蛋白条带约46 kDa。(本文来源于《生物学杂志》期刊2013年02期)
李学仕[7](2008)在《甲基强的松龙对脊髓损伤后G蛋白和γ-氨基丁酸转氨酶基因表达的影响》一文中研究指出目的:研究脊髓损伤后G蛋白(G protein)和γ-氨基丁酸转氨酶(GABAT)的基因表达及探讨甲基强的松龙(MP)对其表达的影响及意义。方法:SD大鼠30只。随机分为假手术组、单纯脊髓损伤组(损伤组)和脊髓损伤+大剂量MP治疗组(MP组),每组10只。应用改良的Allen’s打击法致T8脊髓损伤。假手术组不作处理,MP组大鼠尾静脉内注射大剂量MP (30mg/kg),单纯脊髓损伤组静脉内注射等量的生理盐水。损伤后24h切取损伤平面上下各0.5cm的脊髓组织,进行RT-PCR反应,检测G蛋白和GABAT的基因表达。结果:术后24h假手术组G蛋白和GABAT基因的表达相对丰度分别为0.9998±0.1763和0.8871±0.0162;损伤组G蛋白基因和GABAT基因表达的相对丰度降低,分别为0.5945±0.2976和0.2083±0.1521,与假手术组比较差异有显着性(P<0.05,P<0.01);MP组上述两个因子的表达升高,分别为1.5329±0.1548和1.0646±0.3057,与损伤组比较差异有显着性(P<0.01,P<0.01);其中MP组G蛋白基因表达的相对丰度与假手术组比较差异也有显着性(P<0.01),而GABAT基因表达的相对丰度与假手术组比较差异则无显着性(P>0.05)。结论:脊髓损伤后G蛋白基因的表达水平降低,γ-氨基丁酸转氨酶基因的表达水平降低,应用甲基强的松龙后能促进并逆转G蛋白基因的表达,使γ-氨基丁酸转氨酶基因的表达恢复到正常水平。(本文来源于《福建医科大学》期刊2008-03-01)
傅英楠,陈志亮,姜蔚宇,陈荣忠[8](2007)在《南极深海底泥色盐杆菌属NJS-2 ectABC基因克隆及二氨基丁酸转氨酶ectA基因的表达》一文中研究指出从南极深海底泥中分离筛选得到一株中性嗜盐菌Chromhalobacter sp.NJS-2,以该菌株基因组为模板,利用PCR技术扩增出ectABC基因,基因全序列大小为2378bp。OMIGA软件分析该基因序列上含有叁个阅读框,大小分别为576bp、1272bp和393bp,预测其分别编码二氨基丁酸乙酰转移酶(EctA)、二氨基丁乙酸转氨酶(EctB)和四氢嘧啶合酶(EctC)。将二氨基丁酸乙酰转移酶ectA基因的PCR扩增产物克隆至表达载体pET-his,构建重组表达载体pET-his-ectA,并经酶切、PCR鉴定和测序验证,结果表明其目的基因的插入位置、大小和读码框均正确。SDS-PAGE分析,出现大小约21kDa的目的蛋白条带。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2007年12期)
李玉凤,关勇彪,廖明阳[9](2004)在《大鼠不同脑区中γ-氨基丁酸转氨酶活力的测定》一文中研究指出γ-氨基丁酸转氨酶(GABAtransaminase,GABAT)是催化中枢神经系统抑制性神经递质γ氨基丁酸(gammaaminobutyricacid,GABA)代谢生成琥珀酸半醛(SSA)的关键酶,其活力高低直接影响到神经递质GABA的水平。肼、一甲(本文来源于《卫生毒理学杂志》期刊2004年S1期)
纪之莹,石年,王素青,董杰,陈茂山[10](2003)在《拟除虫菊酯对大鼠脑组织γ-氨基丁酸转氨酶活力的影响》一文中研究指出目的 研究拟除虫菊酯对大鼠脑组织γ 氨基丁酸转氨酶 (GABAT)活力的影响。方法 应用偶联酶学紫外分光光度法 ,在体外和整体实验中 ,观察溴氰菊酯 (DM)和氯菊酯 (PM)对大鼠大脑皮层、海马、纹状体和小脑GABAT活力的影响。结果 在体外 ,终浓度为 10 -9~ 10 -4mol/L的DM或PM对大鼠大脑皮层、海马、纹状体和小脑的GABAT活力无明显影响 ;一次性经口给予 37.5mg/kg的DM组大鼠大脑皮层、海马和小脑的GABAT活力分别为 (2 .96± 0 .4 3)、(2 .13± 0 .4 4 )、(5 .12± 1.36 )nmol·mgpro-1·min-1,低于对照组 [(3.4 3± 0 .4 1)、(2 .6 8± 0 .4 7)、(6 .74± 1.6 4 )nmol·mgpro-1·min-1],差异有显着性 (P <0 .0 5 ) ,6 0 0mg/kgPM一次性染毒组大鼠大脑皮层和海马的GABAT活力分别为(4.5 7± 0 .30 )、(4.18± 0 .6 3)nmol·mgpro-1·min-1,高于对照组 ,差异有显着性 (P <0 .0 5 ) ;连续 5d每天 1次经口给予 12 .5mg/kg的DM或 2 0 0mg/kg的PM ,均对大鼠大脑皮层、海马、纹状体和小脑的GABAT活力无明显影响。结论 在体外 ,DM和PM均对大鼠脑组织GABAT活力无明显影响 ;在整体实验中 ,DM和PM对大鼠脑组织GABAT活力的影响可能存在差异。(本文来源于《中华劳动卫生职业病杂志》期刊2003年03期)
氨基丁酸转氨酶论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的建立以γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)抑制剂类抗癫痫神经系统药物筛选模型,并运用此模型对天麻有效成分及其类似物进行体外活性筛选和构效关系分析。方法优化酶催化反应温度、反应时间、底物NAD+浓度、底物α-酮戊二酸浓度、底物γ-氨基丁酸(GABA)浓度等因素建立GABA-T酶系活性筛选模型,采用对羟基苯甲醛(HBA)及其11种结构类似物验证模型可靠性。结果成功构建GABA-T酶系抗癫痫活性筛选模型,HBA及11个结构类似物测定结果与文献报道抗癫痫作用相一致,且构效分析发现-OH及苯环对位上的-CHO为必需药效团。结论建立的模型可应用于GABA-T酶抑制剂的高通量筛选,为GABA-T酶抑制剂类抗癫痫活性成分的筛选及其作用机制研究提供参考。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
氨基丁酸转氨酶论文参考文献
[1].李无双.家蚕中谷丙转氨酶活力及桑叶中荞麦碱、γ-氨基丁酸含量的快速直接质谱分析[D].江苏科技大学.2018
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[3].周露,沈贝贝,白苏阳,刘喜,江玲.以RNA干扰γ-氨基丁酸转氨酶1基因(OsGABA-T1)表达提高稻米γ-氨基丁酸(GABA)含量[J].作物学报.2015
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